预览加载中,请您耐心等待几秒...
1/10
2/10
3/10
4/10
5/10
6/10
7/10
8/10
9/10
10/10

亲,该文档总共14页,到这已经超出免费预览范围,如果喜欢就直接下载吧~

如果您无法下载资料,请参考说明:

1、部分资料下载需要金币,请确保您的账户上有足够的金币

2、已购买过的文档,再次下载不重复扣费

3、资料包下载后请先用软件解压,在使用对应软件打开

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN114934022A(43)申请公布日2022.08.23(21)申请号202210695148.6(51)Int.Cl.(22)申请日2022.06.20C12N5/20(2006.01)C07K16/10(2006.01)(83)生物保藏信息G01N33/577(2006.01)CGMCCNo.103012015.12.23G01N33/569(2006.01)CGMCCNo.103022015.12.23G01N33/58(2006.01)CGMCCNo.103032015.12.23G01N33/543(2006.01)CGMCCNo.103042015.12.23(71)申请人吉林省农业科学院地址130033吉林省长春市净月高新开发区生态大街1363号(72)发明人王永志李小宇张春雨苏颖(74)专利代理机构北京超凡宏宇专利代理事务所(特殊普通合伙)11463专利代理师张金铭权利要求书2页说明书9页附图2页(54)发明名称杂交瘤细胞、洋葱黄矮病毒抗体及其应用、ELISA检测试剂盒和ELISA检测方法(57)摘要本发明提供了杂交瘤细胞、洋葱黄矮病毒抗体及其应用、ELISA检测试剂盒和ELISA检测方法,涉及生物技术领域。本发明提供的杂交瘤细胞分泌单抗4G12、单抗6D7、单抗6E10或单抗10C8,能够用于上述单抗的制备。经发明人研究发现,上述单抗均能够特异性的与洋葱黄矮病毒结合,能够用于构建洋葱黄矮病毒的检测方法。本发明提供的洋葱黄矮病毒的ELISA检测方法,包括采用本发明提供的葱黄矮病毒抗体包被酶标板,然后依次进行待测样本孵育、抗体标记的辣根过氧化酶孵育和显色。该方法检测灵敏度高,特异性强,检测准确性好,方便快捷,为葱属植物病害检测、检疫、脱毒提供关键技术支持。CN114934022ACN114934022A权利要求书1/2页1.杂交瘤细胞,其特征在于,所述杂交瘤细胞分泌单抗4G12、单抗6D7、单抗6E10或单抗10C8;分泌单抗4G12的杂交瘤细胞保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为:CGMCCNo.10301;分泌单抗6D7的杂交瘤细胞保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为:CGMCCNo.10302;分泌单抗6E10的杂交瘤细胞保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为:CGMCCNo.10303;分泌单抗10C8的杂交瘤细胞保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为:CGMCCNo.10304。2.一种洋葱黄矮病毒抗体,其特征在于,所述洋葱黄矮病毒抗体包括单抗4G12、单抗6D7、单抗6E10和单抗10C8中的至少一种;分泌单抗4G12的杂交瘤细胞保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为:CGMCCNo.10301;分泌单抗6D7的杂交瘤细胞保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为:CGMCCNo.10302;分泌单抗6E10的杂交瘤细胞保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为:CGMCCNo.10303;分泌单抗10C8的杂交瘤细胞保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为:CGMCCNo.10304。3.根据权利要求2所述的洋葱黄矮病毒抗体,其特征在于,所述洋葱黄矮病毒抗体为单抗10C8。4.权利要求2或3所述的洋葱黄矮病毒抗体在构建洋葱黄矮病毒检测方法中的应用;优选地,所述检测方法包括ELISA检测方法。5.一种抗体标记的辣根过氧化酶,其特征在于,所述抗体包括权利要求2或3所述的洋葱黄矮病毒抗体。6.一种洋葱黄矮病毒的ELISA检测试剂盒,其特征在于,包括:权利要求2或3所述的洋葱黄矮病毒抗体、权利要求5所述的辣根过氧化酶、酶标板、洗涤液和显色液。7.根据权利要求6所述的ELISA检测试剂盒,其特征在于,所述洋葱黄矮病毒抗体为单抗10C8;优选地,所述洋葱黄矮病毒抗体的浓度为1‑2μg/mL,优选为2μg/mL;优选地,所述辣根过氧化酶为单抗10C8标记的辣根过氧化酶;优选地,所述辣根过氧化酶的浓度为1‑2μg/mL,优选为2μg/mL;优选地,所述ELISA检测试剂盒还包括封闭剂;优选地,所述封闭剂包括5%脱脂奶粉。8.一种洋葱黄矮病毒的ELISA检测方法,其特征在于,包括如下步骤:采用权利要求2或3所述的洋葱黄矮病毒抗体包被酶标板,然后依次进行待测样本孵育、权利要求5所述的辣根过氧化酶孵育和显色。9.根据权利要求8所述的ELISA检测方法,其特征在于,所述洋葱黄矮病毒抗体为单抗2CN114934022A权利要求书2/2页10C8;优选地,所述洋葱黄矮病毒抗体的浓度为1‑2μg/