一种籽用栝楼种苗的组培快繁方法.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN115152632A(43)申请公布日2022.10.11(21)申请号202210941968.9(22)申请日2022.08.08(71)申请人山东农业大学地址271000山东省泰安市泰山区岱宗大街61号(72)发明人赵飞何蓉蓉邢树堂蔡洪月孙阳阳孙晓琳赵一童(74)专利代理机构成都方圆聿联专利代理事务所(普通合伙)51241专利代理师张敏(51)Int.Cl.A01H4/00(2006.01)权利要求书1页说明书4页(54)发明名称一种籽用栝楼种苗的组培快繁方法(57)摘要本发明公开了一种籽用栝楼种苗组培快繁的方法，该方法将籽用栝楼的茎尖作为外植体，经灭菌消毒后，在合适的培养基和培养条件下培养，使其能够脱分化并分化形成不定芽，再经继代增殖、生根培养获得试管苗，试管苗经移栽壮苗炼苗后获得栽培苗。该方法在短时期内可获得大量的可以确定雌雄株的试管苗，试管苗经移栽后，其成活率高达90％以上，可迅速实现籽用栝楼的大面积推广。CN115152632ACN115152632A权利要求书1/1页1.一种籽用栝楼种苗的组培快繁方法，包括：a、外植体处理：取新萌发的栝楼侧枝，选取茎尖作为外植体，洗净消毒备用；b、不定芽的诱导：将处理后的外植体接种到初代培养基上，直至培养出不定芽；c、继代增殖：将不定芽转入繁殖培养基中进行不定芽的增殖，得到增殖的不定芽；d、生根培养：将增殖的不定芽转入生根培养基中培养，得到试管苗；e、试管苗移栽：将试管苗移栽到基质中，温室培养，即得一种籽用栝楼幼苗。2.根据权利要求1所述的籽用栝楼的组培快繁方法，其中：步骤a所述消毒处理包括：洗净后的外植体用75％酒精水溶液浸泡10s后，置于有效氯为1％的次氯酸钠溶液中浸泡8min，最后以无菌水洗涤干净。3.根据权利要求1所述的籽用栝楼的组培快繁方法，其中：步骤b所述培养基为：每升培养基中含有6‑苄氨基嘌呤1.0mg，萘乙酸0.1mg，余量为MS；所述不定芽的培养条件为：温度25±2℃；光照3800lx，组培专用LED灯管光照14h·d‑1。4.根据权利要求1所述的籽用栝楼的组培快繁方法，其中：步骤c所述继代增殖培养基为：每升培养基中含有6‑苄氨基嘌呤0.5mg，3‑吲哚丁酸0.05mg，余量为MS；所述继代增殖培养条件为：温度25±2℃；光照3800lx，组培专用LED灯管光照14h·d‑1。5.根据权利要求1所述的籽用栝楼的组培快繁方法，其中：步骤d所述生根培养基为：每升培养基中含有3‑吲哚丁酸0.5mg，余量为MS；所述生根培养条件为：在温度25±2℃；光照3800lx，组培专用LED灯管光照14h·d‑1。6.根据权利要求1所述的籽用栝楼的组培快繁方法，其中：步骤e所述基质由如下方法制得：蛭石、草炭、消毒田园土等体积混合，每立方米基质加入2kg磷酸二铵做基肥，即得基质。7.根据权利要求1所述的籽用栝楼的组培快繁方法，其中：步骤e所述温室条件为：温室遮光率为70％，日间温度28±2℃，夜间温度25±2℃。2CN115152632A说明书1/4页一种籽用栝楼种苗的组培快繁方法技术领域[0001]本发明属于植物组织培养领域，具体涉及一种籽用栝楼种苗的组培快繁方法。背景技术[0002]栝楼(Trichosantheskirilowii)为葫芦科栝楼属多年生草质藤本植物。籽用栝楼为主要栽培种之一，主要用于生产食用栝楼籽，是一种雌雄异株植物。栝楼籽口感润绵、脆香特异、风味独特，被誉为“瓜籽之王”。食用栝蒌籽营养丰富，富含大量人体必需的氨基酸、脂肪酸、维生素及多种微量元素，有较高的营养价值，有健胃、润肺、化痰、散结、滑肠、消炎、抗癌的功效。对高血压、高血脂、高胆固醇、急性心肌缺血有明显的保护作用，是中老年人首选绿色保健食品。同时，栝楼籽能提高肌体免疫功能，并有瘦身、美容功效。近年来，栝楼籽以其天然、绿色、保健的特色，逐渐成为炒货精品和保健食用品，市场需求量增加。[0003]栝楼为雌雄异株，开花前难以辨别，在人工栽培中控制雌雄栝楼的植株比例十分必要。以收获果实或种子为主的种植基地，雌雄栝楼的适宜比例一般为10：1。生产上以种子引种或繁殖种苗，成株后自然分化的雌雄株比例约为3：7，直接影响产量和经济效益。且种子繁殖与分根繁殖繁殖系数较低，周期长、效益差。而利用植物组织培养法进行快速繁殖，所需材料少，繁殖效率高，不受季节和气候的影响，还可以节约成本、生产脱毒苗等。目前，关于栝楼的组织培养已有研究，但针对籽用栝楼组培快繁的方法尚未见报道。[0004]基于上述分析，一种利用植物组织培养技术，建立籽用栝楼离体快繁体系，能在短期内培育出大量基因遗传稳定、经济性状表现一致的优质种苗，迅速实现籽用栝楼的大面积推广利用，对推动食籽栝楼的产业