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(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN110786244A(43)申请公布日2020.02.14(21)申请号201911272549.5(22)申请日2019.12.12(71)申请人遵义市龙驰生物科技有限公司地址563000贵州省遵义市播州区三合镇长青村科技园(72)发明人刘红美龚晓林梁大勇石建龙(74)专利代理机构遵义市创先知识产权代理事务所(普通合伙)52118代理人刘创先(51)Int.Cl.A01H4/00(2006.01)权利要求书1页说明书3页(54)发明名称一种杜娟兰种苗组培快繁方法(57)摘要本发明公开了一种杜娟兰种苗组培快繁方法,属于植物繁育技术领域,培育过程中将成熟种子播种于种子萌发培养基中,培养5个月后,将萌发的种子转接入圆球茎诱导培养基中培养3个月得到大量圆球茎,再将圆球茎转接入分化培养基中培养2个月,分化得到带根的植株,将植株取出进行驯化,驯化3个月后获得可以移栽大田的优质种苗,该方法提升了杜鹃兰繁殖率,为杜鹃兰种苗的规模化、工厂化生产提供了可靠的技术保障,为杜鹃兰大规模繁殖提供了一种新途径,有效地解决了当前杜鹃兰植物资源和种苗资源短缺的问题。CN110786244ACN110786244A权利要求书1/1页1.一种杜娟兰种苗组培快繁方法,其特征是:所述杜娟兰种苗组培快繁方法包含以下步骤:步骤一,采集杜鹃兰成熟种子,将种子消毒处理后播种于1/4MS+6-BA0.1mg/L+NAA0.05mg/L+蛋白胨5g/L+马铃薯30g/L+香蕉60g/L+琼脂5g/L+白糖30g/L,pH为6.0的种子萌发培养基中,培养5个月,其中前1个月处于完全黑暗条件,1个月后置于光照为1200Lx,12h/d的环境中培养;步骤二,将萌发的种子转接入改良MS+6-BA3.0mg/L+NAA1.0mg/L+维生素C5g/L+蛋白胨10g/L+马铃薯30g/L+香蕉60g/L+琼脂2g/L+白糖60g/L+活性炭2g/L,pH为6.0的圆球茎诱导培养基中,培养3个月得到大量圆球茎;步骤三,将圆球茎转接入1/4MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L+维生素C5g/L+马铃薯30g/L+香蕉60g/L+琼脂5g/L+白糖30g/L+活性炭2g/L,pH为6.0分化培养基中培养2个月,得到带根的完整植株;步骤四,将瓶内的植株移出,进行驯化,3个月后即可获得移栽大田的优质种苗。2.根据权利要求1所述的杜娟兰种苗组培快繁方法,其特征是:步骤四中所述驯化是指将步骤三得到的苗移出来,浸泡多菌灵500倍液+中生霉素1000倍液10-15min后备用;所述驯化是指在简易大棚内用竹片制成高1m、宽1m的小拱棚,拱棚内铺放一层厚10-15cm的育苗专用基质即制成驯化苗床,用1/1000高锰酸钾对苗床内的基质进行消毒;将准备好的苗移栽入驯化苗床内,行株距均为3cm,移栽完毕后用塑料薄膜完全覆盖在竹片拱棚上,保持苗床内湿度为80-90%,温度为26-28℃,每10天喷洒一次自制营养液。3.根据权利要求1所述的杜娟兰种苗组培快繁方法,其特征是:步骤二中所述改良MS是指将MS培养基中KNO3、NH4NO3、KH2PO4、VB1、VB6的量分别调整为:1500mg/L、1300mg/L、200mg/L、1mg/L、1mg/L,其余组分和浓度均不变。4.根据权利要求1所述的杜娟兰种苗组培快繁方法,其特征是:步骤二中所述圆球茎诱导培养基中的琼脂的用量为2g/L,配出来的培养基处于半固体状态。5.根据权利要求2所述的杜娟兰种苗组培快繁方法,其特征是:所述育苗专用基质为腐殖土、锯末面、蛭石和河沙,按体积比2:1:1:1混合而成。6.根据权利要求2所述的杜娟兰种苗组培快繁方法,其特征是:所述自制营养液为:MS基本培养基,其中KH2PO4的量调整为200mg/L+IBA0.5mg/L+阿司匹林10g/L。2CN110786244A说明书1/3页一种杜娟兰种苗组培快繁方法技术领域[0001]本发明涉及植物繁育技术领域,具体为一种杜娟兰种苗组培快繁方法。背景技术[0002]杜鹃兰为兰科植物,是中药材山慈菇的基原植物,以假鳞茎入药,味辛、甘,性寒,有小毒。有清热解毒、润肺止咳、活血止痛、消肿散结等功效,为重要紧缺中药材。杜鹃兰喜冷凉阴湿环境,对生态环境要求较严,目前主要依靠分株繁殖,其繁殖系数极低。[0003]随着中药材市场对中药材山慈菇的需求量增大,致使人们进行地毯式的采挖,杜娟兰野生资源濒临枯竭,导致药材价格节节攀升,杜鹃兰的快速繁殖成了亟待解决的难题。科研工作者研发出了在无菌组织培养条件下培育杜鹃兰苗,但是培育过程繁琐,时间周期长,成本高。[0004]中国专利“公告号CN107873521”公开了一种杜鹃兰种子组培