一种羟基酪醇的提纯方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局*CN102093170A*(12)发明专利申请(10)申请公布号CN102093170A(43)申请公布日2011.06.15(21)申请号201010573775.X(22)申请日2010.12.09(71)申请人天津市尖峰天然产物研究开发有限公司地址300457天津市塘沽区经济技术开发区十二大街南黄海三街5号(72)发明人於洪建孙华庚(74)专利代理机构天津市北洋有限责任专利代理事务所12201代理人陆艺(51)Int.Cl.C07C39/11(2006.01)C07C37/70(2006.01)权利要求书1页说明书5页附图3页(54)发明名称一种羟基酪醇的提纯方法(57)摘要本发明公开了一种羟基酪醇的提纯方法，步骤为：将橄榄苦苷粗品在搅拌下用去离子水溶解；过吸附型大孔树脂层析柱，用去离子水冲洗，用乙醇水溶液洗脱，收集洗脱液；真空浓缩至无醇，得到精制的橄榄苦苷水溶液；加入无机酸反应；加入氢氧化钠使pH＝7，得到含有羟基酪醇的水溶液；真空浓缩，以等量乙酸乙酯萃取，酯层合并浓缩除去乙酸乙酯，得到淡黄色膏状即为纯度≥80％的羟基酪醇。本发明的方法，充分利用了橄榄叶资源中橄榄苦苷和羟基酪醇单向转化的特性，转化率高，改变了目前羟基酪醇提纯过程中对橄榄苦苷成分的盲目分离的现状，而是使其转化成为更具经济价值的羟基酪醇，提高了经济效益，同时，大大降低了制备高含量羟基酪醇的难度。CN102937ACCNN110209317002093176A权利要求书1/1页1.一种羟基酪醇的提纯方法，其特征是包括如下步骤：(1)按质量比为1∶10～40的比例，将橄榄苦苷粗品在搅拌下用去离子水溶解；(2)过中等极性的吸附型大孔树脂层析柱、活性炭层析柱和中性氧化铝层析柱至少一种，用2～5倍于保留体积的去离子水冲洗，随后用2～5倍于保留体积的体积分数为30％～70％的乙醇水溶液洗脱，收集乙醇水溶液的洗脱液；(3)真空浓缩所述乙醇水溶液的洗脱液至无醇，得到精制的橄榄苦苷水溶液；(4)用两种方法之一种进行：第一种方法：在所述的精制的橄榄苦苷水溶液中，加入无机酸使溶液的pH＝1～3，在40～90℃，反应2～12小时；加入氢氧化钠饱和水溶液使pH＝7，得到含有羟基酪醇的水溶液；第二种方法：在所述的精制的橄榄苦苷水溶液中，加入糖苷酶，糖苷酶的添加量为所述橄榄苦苷水溶液质量的0.4％～3.5％，在37～55℃，反应1～8小时，糖苷酶灭活处理，得到含有羟基酪醇的水溶液；(5)将所述含有羟基酪醇的水溶液真空浓缩至糖度2～10度，以等量乙酸乙酯萃取2～5次，酯层合并浓缩除去乙酸乙酯，得到淡黄色膏状即为纯度≥80％的羟基酪醇。2.根据权利要求1所述的一种羟基酪醇的提纯方法，其特征是所述大孔型树脂为AB-8型、D101型、D71型、HPD-100型或X-5型树脂。3.根据权利要求1所述的一种羟基酪醇的提纯方法，其特征是所述步骤(2)去离子水的体积为3～4倍于保留体积。4.根据权利要求1所述的一种羟基酪醇的提纯方法，其特征是所述步骤(2)乙醇水溶液的体积分数为35％～60％，乙醇水溶液的体积为3～4倍于保留体积。5.根据权利要求1所述的一种羟基酪醇的提纯方法，其特征是所述无机酸为盐酸、磷酸或冰乙酸。6.根据权利要求1所述的一种羟基酪醇的提纯方法，其特征是所述步骤(5)所述糖度为3～5度，所述乙酸乙酯的萃取次数为3～4次。2CCNN110209317002093176A说明书1/5页一种羟基酪醇的提纯方法技术领域[0001]本发明涉及一种高含量羟基酪醇的制备方法。背景技术[0002]橄榄(olive)在植物学上属木樨科(Oleaceae)，其最著名的要数油橄榄(OleaeuropaeaL.)，后者又称洋橄榄。油橄榄原产小亚细亚，主要分布于地中海沿岸地区，以西班牙、意大利、葡萄牙以及阿尔巴尼亚为集中产地，现在世界各国都引种栽培，我国也不例外，20世纪70～80年代甘肃省率先引进国外的油橄榄品种，栽培成功，目前已初具规模。[0003]橄榄叶中已知的主要功效成分有三类：简单酚类化合物(如羟基酪醇、酪醇)；裂环烯醚萜(如橄榄苦苷、女贞苷的配基以及它们相应的脱酰二醛衍生物)；木酚素类。此三类化合物都是很好的抗氧化剂。其中，橄榄苦苷在临床上作为药品，能抑制病毒、细菌、微生物及其引起的毒素，对低密度脂蛋白(LDL)具有抗氧化作用，改善高血压、高血脂等心血管疾病，提高T淋巴细胞、NK细胞、吞噬细胞的再生能力，加强细胞对病毒和感染的免疫能力。而作为橄榄苦苷苷元的羟基酪醇，不仅同样对于低密度脂蛋白(LDL)具有有效的抗氧化保护作用和抑制血小板凝集，而且近年来的医学研究发现羟基酪醇对亚硝酸盐决定的DNA碱基修饰和酪氨酸消化反应产生抑制作用，并能在人类细胞系统中接触自由基