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(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN107739360A(43)申请公布日2018.02.27(21)申请号201710959879.6A61P15/14(2006.01)(22)申请日2017.10.16(71)申请人河南中医药大学地址450046河南省郑州市郑东新区金水东路156号(72)发明人张艳丽孙彦君冯卫生罗峰高美玲弓建红关延彬李晓坤付露陈辉郝志友(74)专利代理机构郑州天阳专利事务所(普通合伙)41113代理人聂孟民(51)Int.Cl.C07D311/80(2006.01)A61K31/366(2006.01)A61P35/00(2006.01)权利要求书2页说明书7页附图1页(54)发明名称小叶莲中酚类化合物graphislactoneA的制备方法及其应用(57)摘要本发明涉及小叶莲中酚类化合物graphislactoneA的制备方法及其应用,可有效解决快速从小叶莲中制备酚类化合物graphislactoneA和实现在制备抗乳腺癌和耐药性乳腺癌药物中的应用问题,方法是,将小叶莲粉碎,用乙酸乙酯超声提取,提取液减压浓缩至相当于含生药量1g/mL的浓缩物,所得小叶莲粗提取物上硅胶柱色谱,用石油醚-丙酮进行梯度洗脱,收集石油醚-丙酮体积比为100:20洗脱流份,加丙酮超声溶解,过滤,滤液放置12-24h,产生无色方晶,即酚类化合物graphislactoneA。本发明方法稳定可靠,效率高,并经活性试验表明对乳腺癌细胞MCF-7和耐药性乳腺癌细胞MCF-7/ADR具有细胞毒活性,有效用于制备治疗乳腺癌的药物,开拓了小叶莲的药用价值和商业价值,经济和社会效益显著。CN107739360ACN107739360A权利要求书1/2页1.一种小叶莲中酚类化合物graphislactoneA,其特征在于,所述的酚类化合物graphislactoneA分子结构式为:其制备方法包括以下步骤:(1)粗提取物的制备:将小叶莲粉碎过40目筛,每次用小叶莲重量5–10倍的乙酸乙酯在40–55℃下超声提取3次,每次1小时,合并3次提取液,减压浓缩至相当于含生药量1g/mL的浓缩物,成小叶莲粗提取物;(2)硅胶柱色谱分离:将小叶莲粗提取物上硅胶柱色谱,用体积比为100:10、100:20的石油醚-丙酮进行梯度洗脱,每一梯度用2–3L洗脱液,流速为3–7mLmin-1,收集石油醚-丙酮体积比为100:20洗脱流份;(3)重结晶纯化:取所收集的石油醚-丙酮体积比为100:20洗脱流份,加丙酮超声溶解,过滤,滤液放置12-24h,产生无色方晶,即酚类化合物graphislactoneA。2.根据权利要求1所述的小叶莲中酚类化合物graphislactoneA的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)粗提取物的制备:将小叶莲粉碎过40目筛,每次用小叶莲重量6–9倍的乙酸乙酯在42–54℃下超声提取3次,每次1小时,合并3次提取液,减压浓缩至相当于含生药量1g/mL的浓缩物,成小叶莲粗提取物;(2)硅胶柱色谱分离:将小叶莲粗提取物上硅胶柱色谱,用体积比为100:10、100:20的石油醚-丙酮进行梯度洗脱,每一梯度用2.2–2.9L洗脱液,流速为3.5-6mLmin-1,收集石油醚-丙酮体积比为100:20洗脱流份;(3)重结晶纯化:取所收集的石油醚-丙酮体积比为100:20洗脱流份,加丙酮超声溶解,过滤,滤液放置15-22h,产生无色方晶,即酚类化合物graphislactoneA。3.根据权利要求1所述的小叶莲中酚类化合物graphislactoneA的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)粗提取物的制备:将小叶莲粉碎过40目筛,每次用小叶莲重量5倍的乙酸乙酯在40℃下超声提取3次,每次1小时,合并3次提取液,减压浓缩至相当于含生药量1g/mL的浓缩物,成小叶莲粗提取物;(2)硅胶柱色谱分离:将小叶莲粗提取物上80×8cm硅胶柱色谱,用体积比为100:10、100:20的石油醚-丙酮进行梯度洗脱,每一梯度用3L洗脱液,流速为7mLmin-1,收集石油醚-丙酮体积比为100:20洗脱流份;(3)重结晶纯化:取所收集的石油醚-丙酮体积比为100:20洗脱流份,加丙酮超声溶解,过滤,滤液放置24h,产生无色方晶,即酚类化合物graphislactoneA。2CN107739360A权利要求书2/2页4.根据权利要求1所述的小叶莲中酚类化合物graphislactoneA的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)粗提取物的制备:将小叶莲粉碎过40目筛,每次用小叶莲重量8倍的乙酸乙酯在45℃下超声提取3次,每次1小时,合并3次提取液,减压浓缩至相当于含生药量1g/mL的浓缩物,成小叶莲粗提取物;(2)硅胶柱色谱