一种从小叶莲中提取分离的半日花烷型二萜类化合物及其制备方法与应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN105601516A(43)申请公布日2016.05.25(21)申请号201610199725.7C07C67/56(2006.01)(2006.01)(22)申请日2016.03.31C07C67/48A61P35/00(2006.01)(71)申请人河南中医学院地址450008河南省郑州市金水区金水路1号(72)发明人孙彦君万焱王俊敏沈继朵裴莉昕陈辉郝志友高美玲付露(74)专利代理机构郑州天阳专利事务所(普通合伙)41113代理人聂孟民(51)Int.Cl.C07C69/38(2006.01)C07C69/675(2006.01)权利要求书3页说明书9页(54)发明名称一种从小叶莲中提取分离的半日花烷型二萜类化合物及其制备方法与应用(57)摘要本发明涉及从小叶莲中提取分离的半日花烷型二萜类化合物及其制备方法与应用，可有效解决从小叶莲中提取分离半日花烷型二萜类化合物及在制备抗肝癌、乳腺癌药物中的应用问题，方法是，将小叶莲用乙醇加热回流提取，将乙醇提取物混悬于蒸馏水中，依次以石油醚、二氯甲烷萃取，将二氯甲烷萃取部位上硅胶柱，用石油醚-丙酮洗脱，收集168个流份，合并流份1–50、51–134、135–168，得到组份Fr.1-Fr.3；将组份Fr.3经ODS柱色谱，甲醇-水梯度洗脱，得亚组份Fr.3-1、Fr.3-2、Fr.3-3；将亚组份Fr.3-3上硅胶柱，用石油醚-丙酮洗脱，收集38个流份，硅胶薄层色谱检测，分别合并含有目标物桃儿七萜A和桃儿七萜B的流份，本发明方法稳定可靠，易操作，具有抗乳腺癌和抗肝癌的活性。CN105601516ACN105601516A权利要求书1/3页1.一种从小叶莲中提取分离的半日花烷型二萜类化合物，其特征在于，该半日花烷型二萜类化合物为桃儿七萜A(Ⅰ)和桃儿七萜B(Ⅱ)，分子结构式分别是：2.权利要求1所述的从小叶莲中提取分离的半日花烷型二萜类化合物的制备方法，其特征在于，将小叶莲6–9kg加入小叶莲重量2–5倍、体积浓度为75％–95％的乙醇加热回流提取3次，提取温度为90–95℃，提取时间为1.5–2小时，减压回收乙醇，得浸膏状乙醇提取物，将乙醇提取物混悬于2–3.2L的蒸馏水中，依次以石油醚、二氯甲烷各萃取3次，每次2–3.2L；将二氯甲烷萃取部位上硅胶柱，依次用体积比为100:0、100:5、100:7、100:10的石油醚-丙酮混合溶剂进行梯度洗脱，每一梯度用10–15L洗脱液，流速为10–15mLmin-1，每200–300ml体积为一流份，收集168个流份，各个流份用GF254薄层板，以体积比1︰1的石油醚-丙酮作为展开剂，以体积比10︰90的硫酸-乙醇溶液作为显色剂，105℃加热3–5min，进行硅胶薄层色谱检测分析，根据硅胶薄层色谱检测分析结果，合并流份1–50、51–134、135–168，得到组份Fr.1、组份Fr.2、组份Fr.3；将组份Fr.3经ODS柱色谱，以体积比20-85:15-80的甲醇-水作为洗脱液进行梯度洗脱，分别收集体积比40:60、60:40、85:15的甲醇-水洗脱液，得亚组份Fr.3-1、亚组份Fr.3-2、亚组份Fr.3-3；将亚组份Fr.3-3上硅胶柱，用体积比100:20的石油醚-丙酮洗脱，流速为1–2mLmin-1，每3–7ml为一流份，共收集亚组份Fr.3-3的38个流份，各个流份用GF254薄层板，分别以体积比2-3︰1的石油醚-丙酮作为展开剂，以体积比10︰90的硫酸-乙醇溶液作为显色剂，105℃加热3–5min，由硅胶薄层色谱检测分析，分别合并含有目标物桃儿七萜A和桃儿七萜B的流份，得到桃儿七萜A(I)和桃儿七萜B(II)。3.根据权利要求2所述的从小叶莲中提取分离的半日花烷型二萜类化合物的制备方法，其特征在于，将小叶莲9kg加入小叶莲重量3倍、体积浓度为95％的乙醇加热回流提取3次，提取温度为95℃，提取时间为1.5小时，减压回收乙醇，得浸膏状乙醇提取物，将乙醇提取物混悬于3.2L的蒸馏水中，依次以石油醚、二氯甲烷各萃取3次，每次3.2L；将二氯甲烷萃取部位上硅胶柱，依次用体积比为100:0、100:5、100:7、100:10的石油醚-丙酮混合溶剂进行梯度洗脱，每一梯度用15L洗脱液，流速为15mLmin-1，每300ml体积为一流份，收集168个流份，各个流份用GF254薄层板，以体积比1︰1的石油醚-丙酮作为展开剂，以体积比10︰90的硫酸-乙醇溶液作为显色剂，105℃加热5min，进行硅胶薄层色谱检测分析，根据硅胶薄层色谱检测分析结果，合并流份1–50、51–134、135–168，得到组份Fr.1、组份Fr.2、组份Fr.3；将组份Fr.3经