一种鉴别洋槐蜜真实性的方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN109212086A(43)申请公布日2019.01.15(21)申请号201811228454.9(22)申请日2018.10.22(71)申请人中国农业科学院蜜蜂研究所地址100000北京市海淀区香山北沟1号(72)发明人张红城乔江涛(74)专利代理机构北京高沃律师事务所11569代理人刘奇(51)Int.Cl.G01N30/02(2006.01)G01N30/06(2006.01)G01N30/34(2006.01)G01N30/74(2006.01)G01N30/86(2006.01)权利要求书1页说明书5页附图1页(54)发明名称一种鉴别洋槐蜜真实性的方法(57)摘要本发明提供了一种鉴别洋槐蜜真伪的方法，属于食品检测技术领域，所述方法包括以下步骤：1)将待鉴样品与水混合溶解，调节pH值为6～7，获得样品溶液；2)将所述样品溶液过反相-阴离子交换固相萃取柱，收集洗脱液；3)用高效液相色谱检测所述洗脱液，将检测到的物质与洋槐蜜多酚类成分的指纹图谱比对，检测到物质的种类与洋槐蜜多酚类成分的指纹图谱一致则为真洋槐蜜；所述洋槐蜜多酚类成分的指纹图谱为包括红花菜豆酸、反，反式脱落酸和顺，反式脱落酸的指纹图谱。所述方法检测结果可靠稳定、判断度高、方便操作、成本低廉。CN109212086ACN109212086A权利要求书1/1页1.一种鉴别洋槐蜜真实性的方法，其特征在于，包括以下步骤：1)将待鉴蜂蜜与水混合溶解，调节pH值为6～7，获得样品溶液；2)将所述样品溶液过反相-阴离子交换固相萃取柱，用含10wt％甲酸的甲醇溶液洗脱萃取柱，收集洗脱液；3)用高效液相色谱检测所述洗脱液，将检测到的物质图谱与洋槐蜜多酚类成分的指纹图谱比对，若检测到物质的种类与洋槐蜜多酚类成分的指纹图谱一致则为真洋槐蜜；所述洋槐蜜多酚类成分的指纹图谱为包括红花菜豆酸、反,反式脱落酸和顺,反式脱落酸的指纹图谱。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤3)还包括高效液相色谱分离后，根据高效液相色谱分离结果用外标法计算检测到物质的含量。3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述红花菜豆酸在真洋槐蜜中的含量＞25μg/100g。4.根据权利要求2或3所述的方法，其特征在于，所述反,反式脱落酸在真洋槐蜜中的含量＞15μg/100g。5.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述顺,反式脱落酸在真洋槐蜜中的含量＞50μg/100g。6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤3)中所述的高效液相色谱的流速为0.7ml/min；紫外检测波长为280nm；分离柱为C18柱，所述C18柱的规格为150×4.6mm,5μm；上样体积为20μl；所述的高效液相色谱的流动相A为含质量分数0.2％乙酸的水；流动相B为含质量分数0.2％乙酸的甲醇；洗脱梯度程序为：[0～11)min，[9％～14％)流动相B；[11～14)min，[14％～15％)流动相B；[14～17)min，15％流动相B；[17～24)min，(15％～16％]流动相B；[24～28)min，(16％～17％]流动相B；[28～30)min，(17％～22％]流动相B；[30～38)min，(22％～25％]流动相B；[38～41)min，(25％～30％]流动相B；[41～46)min，(30％～33％]流动相B；[46～55)min，33％流动相B；[55～60)min，(33％～34％]流动相B；[60～70)min，(34％～36％]流动相B；[70～80)min，(36％～40％]流动相B；[80～90)min，(40％～45％]流动相B；[90～100)min，(45～52％]流动相B。7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述洋槐蜜多酚类物质指纹图谱通过以下方法获得：取100～150份真洋槐蜜样品，分别进行高效液相色谱分析，得到每一份样品的多酚类成分色谱图，将所有样品的多酚类成分色谱图导入中药指纹图谱软件，获得洋槐蜜中多酚类成分的指纹图谱。8.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤3)中外标法的标准曲线为y＝4513x+135049，其中x为检测物质的峰面积，y检测物质的含量。9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述待鉴样品与水的质量比为1：(3.5～4.5)。10.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤2)获得洗脱液后，在进行高效液相色谱检测前，将所述洗脱液过滤。2CN109212086A说明书1/5页一种鉴别洋槐蜜真实性的方法技术领域[0001]本发明属于食品检验技术领域，尤其涉及一种鉴别洋槐蜜真实性的方法。背景技术[0002]洋槐蜜作为我国产量最大的单花蜜之一，深受消费者的喜爱。然而