从淫羊藿中同时提取分离淫羊藿苷和淫羊藿次苷II的方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局*CN102824394A*(12)发明专利申请(10)申请公布号CN102824394A(43)申请公布日2012.12.19(21)申请号201210345102.8A61P35/00(2006.01)(22)申请日2012.09.18A61P9/00(2006.01)(71)申请人西南民族大学地址610041四川省成都市武侯区一环路南四段16号(72)发明人曾锐刘海萍瞿燕韦涛(74)专利代理机构成都高远知识产权代理事务所(普通合伙)51222代理人李高峡全学荣(51)Int.Cl.A61K36/296(2006.01)A61K31/7048(2006.01)A61P39/06(2006.01)A61P19/10(2006.01)A61P37/02(2006.01)权利要求书权利要求书2页2页说明书说明书77页页附图附图22页(54)发明名称从淫羊藿中同时提取分离淫羊藿苷和淫羊藿次苷II的方法(57)摘要本发明提供了一种从淫羊藿中同时提取分离淫羊藿苷和淫羊藿次苷II的方法，该方法通过大孔吸附树脂梯度洗脱，分别得到了高纯度的淫羊藿苷和淫羊藿次苷II提取物。本发明还提供了淫羊藿苷或淫羊藿次苷II的提取分离方法。本发明不仅实现了对淫羊藿苷和淫羊藿次苷II的同时提取分离，简化了工艺流程，还得到了纯度较高的药物中间体，显著增加了单体成分的收率，提高了药材的利用率，降低了生产成本；同时，本发明方法未使用毒性较大的有机溶剂，保障了操作人员的安全性，实现了绿色生产，具有良好的工业应用前景。CN1028439ACN102824394A权利要求书1/2页1.从淫羊藿中同时提取分离淫羊藿苷和淫羊藿次苷II的方法，其特征在于：它包括如下操作步骤：（1）取淫羊藿药材，经水提醇沉后，将所得上清液减压浓缩，浓缩液备用；（2）取浓缩液，上非极性或中极性大孔吸附树脂柱，依次用20%-70%V/V乙醇洗脱，分别收集乙醇浓度为40%-45%V/V洗脱液Ⅰ和乙醇浓度为50%-70%V/V的洗脱液Ⅱ；（3）将洗脱液Ⅰ回收乙醇后，以水-乙酸乙酯系统萃取，收集乙酸乙酯层，回收溶剂后，加入50%-70%V/V乙醇溶解，过滤，滤液冷藏静置，析出固形物，即得淫羊藿苷粗品；（4）将洗脱液Ⅱ，回收乙醇后，以水-乙酸乙酯系统萃取，收集乙酸乙酯层，回收溶剂后，加入50%-70%V/V乙醇溶解，过滤，滤液冷藏静置，析出固形物，即得淫羊藿次苷II粗品。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤（1）所述水提醇沉过程中，乙醇浓度在60%V/V以上。3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：步骤（1）所述水提醇沉过程中，乙醇浓度为60%V/V。4.根据权利要求1-3任意一项所述的方法，其特征在于：步骤（1）中，所述水提的具体操作如下：取淫羊藿药材，加水煎煮2次以上，合并水煎液，减压浓缩至60℃下测定的相对密度为1.1-1.2。5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤（2）中，所述非极性大孔吸附树脂为D101型、AB-8型或DM-130型；所述中极性大孔吸附树脂为DM301型。6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于：步骤（2）的具体操作如下：取浓缩液，上DM301、DM-130或AB-8大孔吸附树脂柱，依次用浓度为20%V/V、30%V/V、40%V/V、45%V/V、50%V/V、60%V/V、70%V/V乙醇进行洗脱，并分别收集乙醇浓度为40%-45%V/V的洗脱液Ⅰ和乙醇浓度为50%-70%V/V的洗脱液Ⅱ。7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于：步骤（2）中，20%V/V乙醇用量为4-5倍柱体积；30%V/V乙醇用量为3-5倍柱体积；40%V/V乙醇用量为4-6倍柱体积；45%V/V乙醇用量为3-5倍柱体积；50%V/V乙醇用量为3-5倍柱体积；60%V/V乙醇用量为4-5倍柱体积；70%V/V乙醇用量为3-6倍柱体积。8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤（3）、（4）中所述乙醇浓度为60%V/V，所述冷藏的温度为0~4℃。9.根据权利要求1-8任意一项所述的方法，其特征在于：所述淫羊藿苷粗品中，淫羊藿苷含量为45%-50%W/W；所述淫羊藿次苷II粗品中，淫羊藿次苷II含量为58%-63%W/W。10.根据权利要求1-9任意一项所述的方法，其特征在于：所述淫羊藿选自小檗科植物淫羊藿（EpimediumbrevicornuMaxim.）、朝鲜淫羊藿（EpimediumkoresnumNakai.）、箭叶淫羊藿（Epimediumsagittatum(Sieb.etZucc.)Maxim.）、柔毛淫羊藿（EpimediumpubescensMaxim.）、巫山淫羊藿（EpimediumwushanenseT.(S.Ying)及