从淫羊藿全草中提取淫羊藿苷的方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN113980065A(43)申请公布日2022.01.28(21)申请号202111317176.6(22)申请日2021.11.09(71)申请人陕西理工大学地址723000陕西省汉中市汉台区东关正街505号申请人陕西天谷药业有限公司(72)发明人田光辉刘存芳张必荣张勇陈婷刘洋吴睿刘波张志军(74)专利代理机构西安知诚思迈知识产权代理事务所(普通合伙)61237代理人李思(51)Int.Cl.C07H1/08(2006.01)C07H17/07(2006.01)权利要求书1页说明书4页(54)发明名称从淫羊藿全草中提取淫羊藿苷的方法(57)摘要本发明提出了一种淫羊藿苷的提取方法，将淫羊藿全草粉末用1.4‑1.5倍重量份pH10‑11的碳酸钠水溶液浸泡约半小时，再通入水蒸气搅拌约1小时，热滤；再在固体渣中通入水蒸气约1小时并搅拌，热滤，重复该步骤一次；合并滤液，冰浴冷却，调节滤液pH至3.5‑4.2，静置沉化，过滤收集沉淀物，低温干燥；干燥后的粗提物用C18键合硅胶拌合，进行柱层析，洗脱中用HPLC检测，对照品色谱图的保留时间10.5min，截收相同的组分；蒸馏回收洗脱剂，再进行两次重结晶。可得到高纯度淫羊藿苷以及朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C等其他黄酮类物质，其中淫羊藿苷为0.8重量份，含量超过了98.4%，提取率超过97.5%。CN113980065ACN113980065A权利要求书1/1页1.一种从淫羊藿全草中提取淫羊藿苷的方法，按下述工艺步骤完成，（1）将淫羊藿全草阴干，用粉碎机粉碎，过80目筛；（2）称取淫羊藿全草粉末50重量份在蒸馏罐中，加入pH为10‑11的碳酸钠水溶液的重量份为淫羊藿全草粉末重量份的1.4‑1.5倍，浸泡30min‑40min后，通入水蒸气并搅拌50min‑60min，趁热过滤；（3）固体渣再在蒸馏罐中通入水蒸气50min‑60min并搅拌，过滤；（4）重复步骤（3）一次；（5）合并步骤（2）至步骤（4）滤液，冰浴冷却，用浓盐酸调节滤液的pH至3.5‑4.2，静置沉化，过滤收集沉淀物；（6）母液用乙酸乙酯萃取2次，每次乙酸乙酯的用量为母液体积的0.6~0.7倍，回收乙酸乙酯，乙酸乙酯萃取的固体物和步骤（5）的沉淀物合并即为粗提物，低温干燥；（7）将干燥后的粗提物用C18键合硅胶拌合，按重量比：粗提物∶C18键合硅胶为1∶10~12，湿法装柱，干法上样，以乙醇∶冰乙酸∶水为7∶0.5~0.6∶2.4~2.5的洗脱液进行洗脱，用HPLC检测，结合淫羊藿苷对照品色谱图的保留时间10.5min，截收相同的组分；（8）蒸馏回收洗脱剂，用乙酸乙酯重结晶，再用乙醇进行二次重结晶。2CN113980065A说明书1/4页从淫羊藿全草中提取淫羊藿苷的方法技术领域[0001]本发明属于植物有效成分提取技术领域，涉及一种从淫羊藿全草中提取淫羊藿苷的方法。背景技术[0002]淫羊藿苷（也叫淫羊藿甙）具有通过调节T细胞平衡增强机体免疫力、促进成骨细胞的生成和活化抑制骨质疏松、保护心肌细胞和增加心肌细胞数量改善内皮功能障碍修复心脑血管功能、调节内分泌、抗菌消炎、抗氧化、抗衰老、抗肿瘤、增强学习记忆能力和改善生殖功能等活性，还能治疗阿尔兹海默病、帕金森、脑缺血、动脉粥样硬化、风湿等病症。淫羊藿苷是淫羊藿的主要活性成分，《中国药典》一部2020年版中记载淫羊藿“功能与主治：补肾阳、强筋骨、祛风湿，用于肾阳虚衰、阳痿遗精、筋骨痿软、风湿痹痛、麻木拘挛”，并指出淫羊藿苷为淫羊藿药材质量评价的标志物，也是淫羊藿深加工生产中提取物质量和品质评价的依据。淫羊藿苷在淫羊藿全草中的含量较低，通常为0.2%~3.0%，其含量会因采收季节、品种、产地、用药部位、加工方式等的不同存在差异。[0003]现有淫羊藿苷是以淫羊藿药材为原料，采用不同浓度的乙醇为溶剂通过加热回流、超声、微波、渗漏等方法进行提取后获得淫羊藿的粗提物，再经萃取、分离和精制，从淫羊藿药材中制备较高纯度的淫羊藿苷。淫羊藿药材中含有淫羊藿苷、朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C以及其他黄酮类物质，但含量均都较低，参照《中国药典》一部2020年版中测定淫羊藿药材中淫羊藿苷含量的方法，淫羊藿药材中淫羊藿苷的含量要求“含淫羊藿苷（C33H40O15）不得少于0.40%；含总黄酮以淫羊藿苷（C33H40O15）计不得少于5.0%”。现有的从淫羊藿药材中提取和制备较高纯度淫羊藿苷的工艺中无论用醇溶液回流提取还是辅助提取，要经过提取、萃取和分离，其间各个步骤繁琐、提取不完全、损失较大、含量和提取率不稳定，并且使用有机溶剂量大、种类多，提取工序复杂，整个过程时间长，成本高。现有的从淫羊藿药材中制备淫羊藿苷的工艺不再适合于低含量