一种替西罗莫司的分离纯化方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN109851626A(43)申请公布日2019.06.07(21)申请号201910017298.X(22)申请日2019.01.08(71)申请人扬子江药业集团四川海蓉药业有限公司地址611830四川省成都市都江堰市彩虹大道南段802号(72)发明人曹康平孙建谢义鹏刘艳霞(74)专利代理机构成都高远知识产权代理事务所(普通合伙)51222代理人李高峡张娟(51)Int.Cl.C07D498/18(2006.01)权利要求书1页说明书4页附图1页(54)发明名称一种替西罗莫司的分离纯化方法(57)摘要本发明公开了一种替西罗莫司的分离纯化方法，其特征在于：它包括以下步骤：(1)粗品的合成；(2)分离纯化。本发明通过选择特定的分离纯化方法大大提高了替西罗莫司的纯度和收率，降低了成本，具有广阔的市场应用前景。CN109851626ACN109851626A权利要求书1/1页1.一种替西罗莫司的分离纯化方法，其特征在于，它包括以下步骤：(1)粗品的合成：a.酰氯的制备：将2,2,5-三甲基-5-羧酸-1,3-二氧六烷溶解于正己烷，25±5℃下加入二氯亚砜，搅拌，减压浓缩至干，得酰氯；b.成酯反应：将雷帕霉素、DIPEA与DCM混合，0-5℃下滴入步骤a所得酰氯，25±5℃下搅拌，浓缩蒸干，粗品用硅胶柱层析，洗脱得酯化物2,2,5-三甲基[1,3-二氧六烷]-5-羧酸-42-酯-雷帕霉素；c.将步骤b酯化物溶解于THF，25±5℃下滴入硫酸水溶液，反应，调节pH至7-8，EA萃取，用干燥剂干燥，减压浓缩，得替西罗莫司粗品；(2)分离纯化：将步骤c粗品溶解于乙醇-正庚烷，注入正向制备色谱柱，用流动相乙醇-正庚烷梯度洗脱，分段收集洗脱液，合并替西罗莫司纯度≥98％的洗脱液，减压干燥，得替西罗莫司纯品；所述梯度洗脱程序为：0～25min，100％→50％正庚烷；25～70min，50％→50％正庚烷；70-90min，50％→20％正庚烷。2.根据权利要求1所述分离纯化方法，其特征在于，步骤a所述2,2,5-三甲基-5-羧酸-1,3-二氧六烷、正己烷与二氯亚砜的质量体积比为1g：14ml：1.37g；所述搅拌时间为12～15h；所述酰氯为无色油状液体。3.根据权利要求1所述分离纯化方法，其特征在于，步骤b所述雷帕霉素、DIPEA和DCM的质量体积比为1g：0.72ml：2.83ml；所述滴入酰氯至酰氯浓度为0.75～1g/ml；所述搅拌至雷帕霉素含量小于0.5％时止；所述硅胶柱中硅胶的目数为200-300目；所述层析使用的洗脱剂是石油醚：乙酸乙酯。4.根据权利要求3所述分离纯化方法，其特征在于，所述石油醚：乙酸乙酯体积比为1:1。5.根据权利要求1所述分离纯化方法，其特征在于，步骤c所述酯化物、THF与硫酸水溶液的质量体积比1g：7.95ml：1.88ml；所述硫酸水溶液浓度为2mol/L。6.根据权利要求1所述分离纯化方法，其特征在于，步骤c所述反应时间为14h；所述调pH的试剂是饱和碳酸钠水溶液；所述干燥剂为无水硫酸钠。7.根据权利要求1所述分离纯化方法，其特征在于，步骤(2)所述粗品与乙醇-正庚烷的质量体积比为0.2：1g/ml；所述乙醇-正庚烷体积比：0～8：1～2。8.根据权利要求1所述分离纯化方法，其特征在于，步骤(2)所述正向制备色谱柱为：X2(4.6×250mm，10μm，14011407Y)。9.根据权利要求1所述分离纯化方法，其特征在于，步骤(2)所述正向制备色谱柱中流动相流速为1mL/min，柱温为30℃，波长为277nm。10.根据权利要求1所述分离纯化方法，其特征在于，步骤(2)所述分段收集是从45min开始，每1min收集1次。2CN109851626A说明书1/4页一种替西罗莫司的分离纯化方法技术领域[0001]本发明属于仿制药分离纯化领域，具体为一种替西罗莫司的分离纯化方法。背景技术[0002]替西罗莫司(坦西莫司)(Temsirolimus)是一种静脉注射的mTOR抑制剂，获批用来治疗晚期肾细胞癌，是西罗莫司的衍生物和前药。替西罗莫司以雷帕霉素(西罗莫司)为原料，通过酯化，脱保护等合成工艺生成替西罗莫司成品纯度低，异构体含量较高。目前研究报道的多为雷帕霉素(西罗莫司)的分离纯化方法(CN104844620A、CN107619413A等)。经reaxys检索发现替西罗莫司的分离纯化报道较少。郑从燊等在“第十三届全国抗生素学术会议(196页-201页)”公布了一种替西罗莫司的精制研究：将由半合成获得的替西罗莫司粗品经硅胶柱纯化、反相HPLC纯化，再采用乙醚溶清，20℃下搅拌析晶，对替西罗莫司粗品进行精制，收率70％，替西罗莫司成品中异构