溶菌酶结合SDS下利用超声提取聚羟基脂肪酸酯的方法和系统.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN111393625A(43)申请公布日2020.07.10(21)申请号202010492506.4(51)Int.Cl.(22)申请日2020.06.03C08G63/90(2006.01)C08G63/08(2006.01)(71)申请人中粮营养健康研究院有限公司地址102209北京市昌平区北七家镇未来科技城南区四路申请人吉林中粮生化有限公司中粮生物科技股份有限公司清华大学(72)发明人佟毅李义刘安妮彭超陈国强陈博杨凯王小艳吴琼(74)专利代理机构北京润平知识产权代理有限公司11283代理人乔雪微刘依云权利要求书2页说明书13页附图1页(54)发明名称溶菌酶结合SDS下利用超声提取聚羟基脂肪酸酯的方法和系统(57)摘要本发明涉及PHA提取分离技术领域，公开了一种溶菌酶结合SDS下利用超声提取聚羟基脂肪酸酯的方法和系统，该方法包括以下步骤：（1）在溶菌酶存在下，将含聚羟基脂肪酸酯的菌体细胞进行一次超声破碎，得到含聚羟基脂肪酸酯的第一浆液；（2）将所得含聚羟基脂肪酸酯的第一浆液进行第一固液分离，得到含有聚羟基脂肪酸酯的沉淀；（3）在SDS的存在下，将所得含有聚羟基脂肪酸酯的沉淀进行二次超声破碎，得到含聚羟基脂肪酸酯的第二浆液；（4）将得到的含聚羟基脂肪酸酯的第二浆液进行第二固液分离，得到所述聚羟基脂肪酸酯。采用本发明的方法能够有效提高PHA的收率和纯度，得到的PHA的聚合度和分子量较高，并降低了成本。CN111393625ACN111393625A权利要求书1/2页1.一种提取聚羟基脂肪酸酯的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：（1）在溶菌酶的存在下，将含聚羟基脂肪酸酯的菌体细胞进行一次超声破碎，得到含聚羟基脂肪酸酯的第一浆液；（2）将所得含聚羟基脂肪酸酯的第一浆液进行第一固液分离，得到含有聚羟基脂肪酸酯的沉淀；（3）在SDS的存在下，将所得含有聚羟基脂肪酸酯的沉淀进行二次超声破碎，得到含聚羟基脂肪酸酯的第二浆液；（4）将得到的含聚羟基脂肪酸酯的第二浆液进行第二固液分离，得到所述聚羟基脂肪酸酯。2.根据权利要求1所述的方法，其中，在步骤（1）中，所述含聚羟基脂肪酸酯的菌体细胞以菌悬液形式存在，其中，所述菌悬液中溶菌酶的含量为0.05-1g/L。3.根据权利要求1或2所述的方法，其中，在pH值为4-7的条件下进行所述一次超声破碎；所述一次超声破碎的条件包括：一次超声的功率为200-2000W/m3菌悬液；一次超声的温度为20-50℃；一次超声的时间为60-240min；搅拌转速为50-350rpm。4.根据权利要求3所述的方法，其中，所述一次超声的控制方式包括：先进行60-90min的第一超声，然后再进行第二超声，其中，所述第二超声的功率比所述第一超声的功率高100-200W/m3菌悬液；所述第一超声的功率为300-800W/m3菌悬液。5.根据权利要求1或2所述的方法，其中，进行步骤（3）之前，该方法还包括先将所得的含有聚羟基脂肪酸酯的沉淀与水混合得到悬浊液；和/或在步骤（3）中，所述SDS与所述含有聚羟基脂肪酸酯的沉淀的重量比为0.05-0.3:1000。6.根据权利要求1或2所述的方法，其中，在pH值为8-11.5的条件下进行二次超声；所述二次超声破碎的条件包括：二次超声的功率为200-2000W/m3悬浊液；二次超声的温度为60-90℃；二次超声的时间为20-180min；搅拌转速为50-350rpm。7.根据权利要求1或2所述的方法，其中，步骤（1）中，所述含聚羟基脂肪酸酯的菌体细胞由以下方法得到：将聚羟基脂肪酸酯的发酵液进行第三固液分离，得到所述含聚羟基脂肪酸酯的菌体细胞和发酵残液；所述第三固液分离的条件使得所得菌体细胞的水含量为70-90重量%。8.根据权利要求1或2所述的方法，其中，步骤（2）中，所述第一固液分离的方法包括第一离心分离；所述第一离心分离的条件使得所述第一浆液中杂质在上层，聚羟基脂肪酸酯在下层。9.根据权利要求1或2所述的方法，其中，步骤（4）中，所述第二固液分离的方法包括板框过滤分离；所述板框过滤的条件包括：温度为0-40℃，压力为0.1-0.6MPa，时间为0.5-5小时。10.根据权利要求9所述的方法，其中，步骤（4）中，所述板框过滤分离使用的滤布的表面预涂覆有聚羟基脂肪酸酯层。11.根据权利要求10所述的方法，其中，所述板框过滤分离使用的滤布表面涂覆的聚羟基脂肪酸酯的粒径大于所述第二浆液中的聚羟基脂肪酸酯；所述板框过滤分离使用的滤布表面涂覆的聚羟基脂肪酸酯的粒径为1-200µm；和/或2CN111393625A权利要求书2/2页所述板框过滤分离使用的滤布表面涂覆的聚羟基脂肪酸酯的厚度为1-20mm；和/或预涂覆有