一种制备高纯度乳铁蛋白的方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN112979785A(43)申请公布日2021.06.18(21)申请号202110446085.6(22)申请日2021.04.25(71)申请人黑龙江默赛东科技有限公司地址150036黑龙江省哈尔滨市香坊区木材街59号孵化场地内B212房间(72)发明人屈明哲(74)专利代理机构北京坦路来专利代理有限公司11652代理人林乐飞(51)Int.Cl.C07K14/79(2006.01)C07K1/18(2006.01)C07K1/34(2006.01)C07K1/36(2006.01)权利要求书1页说明书14页附图2页(54)发明名称一种制备高纯度乳铁蛋白的方法(57)摘要本发明涉及一种制备高纯度乳铁蛋白的方法，其包括以下步骤：(1)将脱脂液体乳进行预处理；(2)将经过预处理的脱脂液体乳进行第一阳离子交换层析，其中上样流速为500～1000cm/h，洗杂盐溶液为浓度0.3～0.45M的金属卤化物水溶液，得到乳铁蛋白溶液；(3)将乳铁蛋白溶液进行超滤脱盐或稀释；(4)然后将经过超滤脱盐或稀释的乳铁蛋白溶液进行第二阳离子交换层析，其中上样流速为50～400cm/h，洗杂盐溶液为浓度0.35～0.55M的金属卤化物水溶液，得到乳铁蛋白纯度不低于95％的乳铁蛋白溶液；(5)将高纯度乳铁蛋白溶液进行超滤浓缩和脱盐，得到乳铁蛋白原液。根据本发明，实现了规模化、低成本制备符合食品安全国家标准GB1903.17‑2016，同时乳铁蛋白回收率不低于62.5％的高纯度乳铁蛋白的方法。CN112979785ACN112979785A权利要求书1/1页1.一种制备高纯度乳铁蛋白的方法，其包括以下步骤：(1)将脱脂液体乳进行预处理；(2)将经过预处理的脱脂液体乳进行第一阳离子交换层析，所述第一阳离子交换层析中，上样流速为500～1000cm/h，洗杂盐溶液为浓度0.3～0.45M的金属卤化物水溶液，得到乳铁蛋白溶液；(3)将所述乳铁蛋白溶液进行超滤脱盐或稀释；(4)然后将经过超滤脱盐或稀释的乳铁蛋白溶液进行第二阳离子交换层析，所述第二阳离子交换层析中，上样流速为50～400cm/h，洗杂盐溶液为浓度0.35～0.55M的所述金属卤化物水溶液，得到乳铁蛋白纯度不低于95％的乳铁蛋白溶液，所述纯度符合食品安全国家标准GB1903.17‑2016；(5)将所述乳铁蛋白纯度不低于95％的乳铁蛋白溶液进行超滤浓缩和脱盐，得到乳铁蛋白原液。2.如权利要求1所述的方法，其中所述第一阳离子交换层析中的上样流速为500～1000cm/h、优选600～950cm/h、更优选700～900cm/h。3.如权利要求1或2所述的方法，其中所述第一阳离子交换层析中的洗杂盐溶液为浓度0.35～0.40M的金属卤化物水溶液。4.如权利要求1至3中任一项所述的方法，其中所述第一阳离子交换层析采用平均粒径在100～300微米、优选150～275微米、更优选200～250微米的层析介质。5.如权利要求1至4中任一项所述的方法，其中所述第二阳离子交换层析中的上样流速为75～380cm/h、优选100～350cm/h、更优选150～300cm/h。6.如权利要求1至5中任一项所述的方法，其中所述第二阳离子交换层析中的洗杂盐溶液为浓度0.40～0.50M的金属卤化物水溶液。7.如权利要求1至6中任一项所述的方法，其中所述第二阳离子交换层析采用平均粒径在60～200微米、优选75～175微米、更优选90～150微米的层析介质。8.如权利要求1至7中任一项所述的方法，其中所述经过预处理的脱脂液体乳在第一阳离子交换层析柱上的保留时间为1.5～3.6分钟、优选2.0～3.0分钟。9.如权利要求1至8中任一项所述的方法，其中所述经过超滤浓缩和脱盐的乳铁蛋白溶液在第二阳离子交换层析柱上的保留时间为3.6～30分钟、优选4.8～24分钟、更优选6.0～18分钟。10.如权利要求1至9中任一项所述的方法，其中所述金属卤化物中的所述金属为碱金属或碱土金属，所述卤化物中的卤素为F、Cl、Br或I。2CN112979785A说明书1/14页一种制备高纯度乳铁蛋白的方法技术领域[0001]本发明属于乳制品加工技术领域，其涉及一种高纯度乳铁蛋白的规模化生产技术，特别是以牛/羊乳、初乳或乳清为原材料，每批次制备公斤级以上符合国家标准GB1903.17‑2016质量要求的高纯度乳铁蛋白产品的方法。背景技术[0002]乳铁蛋白(Lactoferrin)是动物乳中的天然蛋白质，具有广谱抗菌、抗病毒感染、调节体内铁的平衡、调节机体免疫功能、抑制人体肿瘤细胞生长的作用。婴幼儿配方奶粉主要采用牛乳作为配方的基础，但人乳中乳铁蛋白浓度约为1.0～3.0mg/