高效液相色谱测定反应液中甘氨酸和二酮哌嗪含量的方法.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN115754071A(43)申请公布日2023.03.07(21)申请号202211482068.9(22)申请日2022.11.24(71)申请人湖北三峡实验室地址443007湖北省宜昌市猇亭区马鬓岭路1号三峡实验室(72)发明人荣沙沙杜建侠李红肖清燕卢会珍余晓英巢宇晖曹红艳徐玮(74)专利代理机构宜昌市三峡专利事务所42103专利代理师成钢(51)Int.Cl.G01N30/02(2006.01)G01N30/28(2006.01)G01N30/34(2006.01)权利要求书1页说明书5页附图5页(54)发明名称高效液相色谱测定反应液中甘氨酸和二酮哌嗪含量的方法(57)摘要本发明属于化工检测分析领域，具体涉及一种应用高效液相色谱测定甘氨酸合成二酮哌嗪反应过程中合成产物二酮哌嗪收率的方法。流动相为700mL甲醇与300mL水混合，加入离子对试剂四丁基溴化铵为稳定剂，以磷酸二氢钾为缓冲盐调节PH约为5.0，使用WatersAnionicPolarPesticide色谱柱分离并测定甘氨酸和二酮哌嗪含量。本发明中，由于反应过程中反应原料甘氨酸在同波长下有较弱地紫外吸收，且其和产物二酮哌嗪极性相近，出现保留时间相近，出峰重叠且随着反应产物的增加检测稳定性不好的现象。通过调节液相色谱条件，采用本方法可快速、准确的测出甘氨酸和二酮哌嗪含量，为甘氨酸合成二酮哌嗪生产工艺参数的调整提供及时准确的数据指导。CN115754071ACN115754071A权利要求书1/1页1.一种高效液相色谱测定反应液中甘氨酸和二酮哌嗪含量的方法，其特征在于，包含以下步骤：（1）以流动相为溶剂，配制甘氨酸和二酮哌嗪标准溶液；（2）将步骤(1)配制的标准溶液依次进样，进行液相分析，以标准溶液的浓度与对应的峰面积建立标准曲线；（3）以流动相为溶剂，配制待测样品溶液，再将待测样品溶液进样，根据标准曲线计算各被测元素含量。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤（1）流动相中甲醇体积分数为70‑80%，水的体积分数为20‑30%，且甲醇与水的体积分数之和为1，以磷酸二氢钾缓冲盐调节pH至4.5‑5.0。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，流动相中添加有四丁基溴化铵，且四丁基溴化铵添加后形成的质量浓度为0.5‑2.0g/L。4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述步骤（1）中甘氨酸的浓度为500～2500ug/mL，二酮哌嗪标准溶液的浓度为20～100ug/mL。5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤（3）待测样品为甘氨酸合成二酮哌嗪反应过程中不同反应时间的反应液。6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，待测样品检测前稀释50～2000倍。7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤（2）、步骤（3）中液相色谱的参数为：色谱柱：WatersAnionicPolarPesticide，5um，2.1×100mm；柱温：25‑40℃；流速：0.5‑1.0mL/min；进样体积：20uL；紫外检测波长：195nm。8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤（2）、步骤（3）中液相色谱检查过程的流动相中甲醇升温体积分数为70‑80%，水的体积分数为20‑30%，且甲醇与水的体积分数之和为1，以磷酸二氢钾缓冲盐调节pH至4.5‑5.0。9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，流动相中添加有四丁基溴化铵，且四丁基溴化铵添加后形成的质量浓度为0.5‑2.0g/L。2CN115754071A说明书1/5页高效液相色谱测定反应液中甘氨酸和二酮哌嗪含量的方法技术领域[0001]本发明涉及化工及食品检测分析领域，特别涉及一种高效液相色谱测定反应液中甘氨酸和二酮哌嗪含量的方法。背景技术[0002]二酮哌嗪是一种非常重要的化工原料，是由甘氨酸缩合而得的化学物，其结构式如下：由于其特殊的六元环状结构，在药物化学中是重要的药效团，表现出多种生物活性与药理活性，日益引起人们的极大关注。同时，二酮哌嗪类衍生物的应用也越来越广泛，二酮哌嗪作为合成其衍生物的重要中间体，快速准确地测定反应过程中甘氨酸和二酮哌嗪的含量是一个亟待解决的问题。[0003]目前，甘氨酸和二酮哌嗪的检测多采用液相法，但没有甘氨酸和二酮哌嗪的分离方法。由于反应过程中甘氨酸和二酮哌嗪极性相近，出现保留时间相近，出峰重叠且随着反应产物的增加检测稳定性不好的现象。本发明通过加入缓冲盐磷酸氢二钾和离子对试剂四丁基溴化铵分离并稳定甘氨酸和二酮哌嗪，可快速准确地分离并测出甘氨酸和二酮哌嗪含量，为二酮哌嗪生产工艺参数的调整提供及时准确的数据指导。发明内容[0004]本发明提供一种高效液相色谱测定反应液中甘氨酸和二酮哌嗪含量的方法。可以快速准确地检