一种头孢氨苄的酶法制备方法.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN115896222A(43)申请公布日2023.04.04(21)申请号202211293251.4(22)申请日2022.10.21(71)申请人河南康达制药有限公司地址466200河南省周口市项城市经五路66号(72)发明人李文杰冀豫陈平罗礼帅陈瑞杰郭琦周从旭(74)专利代理机构郑州立格知识产权代理有限公司41126专利代理师田磊(51)Int.Cl.C12P35/04(2006.01)C07D501/22(2006.01)C07D501/12(2006.01)权利要求书1页说明书4页(54)发明名称一种头孢氨苄的酶法制备方法(57)摘要本发明公开了一种头孢氨苄的酶法制备方法，包括在水中加入7‑ADCA、催化霉、消泡剂、搅拌滴加苯甘氨酸的衍生物，保温反应；在反应液中加入复合剂，继续反应；将悬浮液过滤，并用溶剂洗涤；向滤液中滴加酸，用碱液调pH值，结晶，离心，干燥，制得头孢氨苄；本发明的酶法制备方法稳定、易于操作、霉的半数失活率低，大幅减少溶媒使用量，大幅降低VOC排放，有机化学原料不再使用，降低废母液中COD排放，产品的质量指标、收率指标达到目前国内领先的水平，大幅降低生产成本，并且大幅降低环保运行成本。CN115896222ACN115896222A权利要求书1/1页1.一种头孢氨苄的酶法制备方法，其特征在于：包括以下步骤：在水中加入7‑ADCA、催化酶、消泡剂，于搅拌下滴加苯甘氨酸的衍生物，于5～35℃反应至7‑ADCA残留量低于3.0mg/L；在步骤（1）所得的反应液中加入复合剂，复合剂的加入量与7‑ADCA的质量比为1:0.2～0.9，继续保温反应30‑60min；将步骤（2）的悬浮液过滤，并用溶剂洗涤，其中7‑ADCA与溶剂的质量比为1:1‑8；（4）向步骤（3）中的滤液中滴加酸，7‑ADCA与酸的质量比为1:0.6‑1.2，用碱液调pH值至多少，结晶，离心，干燥，制得头孢氨苄。2.根据权利要求1所述的头孢氨苄的酶法制备方法，其特征在于：所述步骤（1）中催化霉为青霉素酰基转移酶、青霉素酰胺酶、青霉素乙酰化酶中的至少一种；消泡剂为聚醚消泡剂、GPE聚醚消泡剂、PPE聚醚消泡剂、高碳醇脂肪酸酯复合物中的至少一种；苯甘氨酸的衍生物为苯甘氨酸、苯甘氨酸酯/甲酯/乙酯及其盐、苯甘氨酰胺及其硫酸盐/盐酸盐中的至少一种；其中，7‑ADCA与催化酶、消泡剂、苯甘氨酸衍生物的质量比为1：0.5～1.0：0.001～0.1：1.05～2.0。3.根据权利要求1所述的头孢氨苄的酶法制备方法，其特征在于：所述步骤（2）中复合剂为2‑萘酚，1、5‑二羟基萘、2‑羟基萘，2‑羟基‑3‑苯基氨羰基萘，2‑羟基‑6‑苯基氨羰基萘中的至少一种。4.根据权利要求1所述的头孢氨苄的酶法制备方法，其特征在于：所述步骤（3）中的溶剂为水、丙酮、二氯甲烷中一种或几种。5.根据权利要求1所述的头孢氨苄的酶法制备方法，其特征在于：所述步骤（4）中的酸为盐酸、硫酸、磷酸、硝酸中的一种或几种。2CN115896222A说明书1/4页一种头孢氨苄的酶法制备方法技术领域[0001]本发明属于头孢氨苄合成技术领域，尤其涉及一种头孢氨苄的酶法制备方法。背景技术[0002]头孢氨苄：(6R,7R)‑3‑甲基‑7‑[(R)‑2‑氨基‑2‑苯乙酰氨基]‑8‑氧‑5‑硫杂‑1‑双环[4.2.0]辛‑2‑烯‑2‑甲酸，为白色至微黄色结晶性粉末；微臭。在水中微溶，在乙醇、三氯甲烷或乙醚中不溶。本品能耐葡萄球菌所产生的青霉素酶，故对青霉素敏感或耐药的金葡菌均有良好的抗菌作用。对溶血性链球菌、肺炎球菌、淋病双球菌高度敏感，对大肠杆菌、肺炎杆菌、流感杆菌、奇异变形杆菌、痢疾杆菌等亦有较好的抗菌作用，但对绿脓杆菌，结核杆菌等则不敏感。本品具有口服吸收完全、毒性低，过敏及反应率低，不易产生耐药性等优点。本品可为治疗呼吸道感染的选用药物。对少数由革兰阳性球菌所致败血症和心内膜炎也有效，但不宜用于严重感染。[0003]我国从上世纪80年代开始进行生物转化β‑内酰胺类抗生素方面的研究，并取得了一些成果。但由于在酰化酶的提取、分离和固定化技术及产物、原料的分离回收技术等方面没有取得实质性的突破，难以形成技术及经济优势，因此也难以在生产中实际应用。[0004]近年来，随着生物工程技术和固定化酶技术的快速发展，酶法制备头孢氨苄的技术水平也不断得到提高。目前，不仅在青霉素酰化酶的固定化技术方面取得了突破性进展，已经有性能稳定的工业用固定化酶制品在生产中得到广泛的应用[如德国BoehringerMannheim公司生产的商品名为En－Zygel及名称为pGA－150和pGA－450的固定化酶；意大利米兰Recordati公司生产的固定化酶；德国R