一种检测SARS-CoV-2病毒中和抗体的试剂盒.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN116008538A(43)申请公布日2023.04.25(21)申请号202210857354.2C12N15/867(2006.01)(22)申请日2022.07.20C12N5/10(2006.01)(71)申请人广州医科大学地址510180广东省广州市荔湾区东风西路195号申请人广东省华微检测股份有限公司(72)发明人王忠芳杨小云宋涛赵培静杨础华蒋丽婷李小凤黄东浪(74)专利代理机构广州粤高专利商标代理有限公司44102专利代理师段卉(51)Int.Cl.G01N33/569(2006.01)C12N15/50(2006.01)C07K14/165(2006.01)权利要求书1页说明书17页序列表（电子公布）附图7页(54)发明名称一种检测SARS-CoV-2病毒中和抗体的试剂盒(57)摘要本发明公开了一种检测SARS‑CoV‑2病毒中和抗体的试剂盒。本发明用表达氨基酸序列如SEQIDNO：2所示的SARS‑CoV‑2病毒重组刺突蛋白的Lenti慢病毒感染A549细胞，待A549细胞表达重组刺突蛋白后，进行酶联免疫反应，所表达的重组刺突蛋白很好地模拟了SARS‑CoV‑2病毒刺突蛋白，保持受体结合域的天然构象。本发明试剂盒中还含有与SARS‑CoV‑2病毒中和的中和抗体作为检测抗体，与待测样品的中和抗体共同和SARS‑CoV‑2病毒重组刺突蛋白竞争结合，从而得到待测样品中的中和抗体水平。本发明方法更真实反应样品中和抗体水平，方便质控，不涉及蛋白纯化，工序简单，成本低，快速。CN116008538ACN116008538A权利要求书1/1页1.核苷酸序列如SEQIDNO：1所示的SARS‑CoV‑2病毒重组刺突蛋白基因在制备检测SARS‑CoV‑2病毒中和抗体产品中的应用。2.氨基酸序列如SEQIDNO：2所示的SARS‑CoV‑2病毒重组刺突蛋白在制备检测SARS‑CoV‑2病毒中和抗体产品中的应用。3.一种含有权利要求1中所述的SARS‑CoV‑2病毒重组刺突蛋白基因的重组载体在制备检测SARS‑CoV‑2病毒中和抗体产品中的应用。4.一种含有权利要求1中所述的SARS‑CoV‑2病毒重组刺突蛋白基因的重组细胞在制备检测SARS‑CoV‑2病毒中和抗体产品中的应用。5.一种表达权利要求2中所述的SARS‑CoV‑2病毒重组刺突蛋白的重组细胞在制备检测SARS‑CoV‑2病毒中和抗体产品中的应用。6.根据权利要求4或5中所述的应用，其特征在于，所述重组细胞制备方法为：将权利要求3中所述的重组载体与Lenti慢病毒包装质粒结合，再转染到293T细胞中，孵育，收集培养基，得到含有权利要求1中所述的SARS‑CoV‑2病毒重组刺突蛋白基因的重组Lenti慢病毒；将所述的重组Lenti慢病毒感染A549细胞，孵育，得到权利要求4或5中所述的重组细胞。7.一种检测SARS‑CoV‑2病毒中和抗体的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒中含有权利要求4或5中所述的重组细胞，作为抗原携带者。8.根据权利要求7所述的检测SARS‑CoV‑2病毒中和抗体的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒中还含有与SARS‑CoV‑2病毒中和的中和抗体作为检测抗体。9.根据权利要求7所述的检测SARS‑CoV‑2病毒中和抗体的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒中的重组细胞制备方法为：将权利要求3中所述的重组载体与Lenti慢病毒包装质粒结合，再转染到293T细胞中，孵育，收集培养基，得到含有权利要求1中所述的SARS‑CoV‑2病毒重组刺突蛋白基因的重组Lenti慢病毒；将所述的重组Lenti慢病毒感染A549细胞，孵育，得到权利要求4或5中所述的重组细胞。10.根据权利要求8所述的检测SARS‑CoV‑2病毒中和抗体的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒中还含有多聚甲醛固定液、PBS洗涤液、BSA和PBS混合的封闭液、四甲基联苯胺底物和终止酶反应的终止底物。2CN116008538A说明书1/17页一种检测SARS‑CoV‑2病毒中和抗体的试剂盒技术领域[0001]本发明涉及抗体检测技术领域，具体地，涉及一种检测SARS‑CoV‑2病毒中和抗体的试剂盒。背景技术[0002]防止COVID‑19对人类的危害一直是科学家和疫苗企业努力的方向。冠状病毒在自然界中广泛存在，可以感染许多不同的动物，包括蝙蝠、猪、小鼠和人类。在2019年之前，已确认6种冠状病毒可引起人类呼吸道疾病，它们分别是HCoV‑229E、HCoV‑OC43、HCoV‑NL63、HCoV‑HKU1、SARS‑CoV和MERS‑CoV。前4种病毒通常会引起轻微的疾病，例如普通感冒，而SARS‑CoV和MERS‑CoV会引起严重的危及生命的症状。到目前