检测新型冠状病毒中和抗体的试剂盒及其应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN112986583A(43)申请公布日2021.06.18(21)申请号202110514035.7(22)申请日2021.05.12(71)申请人珠海丽珠试剂股份有限公司地址519000广东省珠海市香洲区同昌路266号1栋、2栋、3栋、4栋(72)发明人张建锋徐亮曾敏霞刘秀贵储迅涛(74)专利代理机构北京超成律师事务所11646代理人高荣英(51)Int.Cl.G01N33/68(2006.01)G01N33/569(2006.01)G01N33/58(2006.01)G01N33/543(2006.01)权利要求书1页说明书16页(54)发明名称检测新型冠状病毒中和抗体的试剂盒及其应用(57)摘要本发明涉及生物技术领域，具体而言，提供了一种检测新型冠状病毒中和抗体的试剂盒及其应用。本发明提供的检测新型冠状病毒中和抗体试剂盒，具体包括（a）或（b）两种方案：（a）示踪物标记的RBD三聚体抗原，包被在固体支持物上的ACE2，以及，含有0.2‑10mg/mL十二烷基二甲基甜菜碱的工作液；（b）示踪物标记的ACE2，包被在固体支持物上的RBD三聚体抗原，以及，含有0.2‑10mg/mL十二烷基二甲基甜菜碱的工作液；其中，RBD三聚体抗原利用二硫键将刺突蛋白的RBD与S2亚基完全交联得到。十二烷基二甲基甜菜碱会显著提高RBD三聚体抗原与新冠中和性抗体结合速度，提升阳性样本平均发光强度，缩短检测时间。CN112986583ACN112986583A权利要求书1/1页1.一种检测新型冠状病毒中和抗体的试剂盒，其特征在于，包括（a）或（b）：（a）示踪物标记的RBD三聚体抗原，包被在固体支持物上的ACE2，以及，含有0.2‑10mg/mL十二烷基二甲基甜菜碱的工作液；（b）示踪物标记的ACE2，包被在固体支持物上的RBD三聚体抗原，以及，含有0.2‑10mg/mL十二烷基二甲基甜菜碱的工作液；其中，所述RBD三聚体抗原是利用二硫键将刺突蛋白的RBD与S2亚基完全交联得到。2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述工作液包括：0.01mol/L‑0.2mol/L磷酸盐缓冲液，0.1‑50mg/mL牛血清白蛋白，5‑50mg/mL氯化钠，10‑50mg/mL蔗糖，0.2‑10mg/mL十二烷基二甲基甜菜碱和0.5‑5mL/Lproclin300，pH为6.0‑7.6。3.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述工作液包括：浓度为0.05mol/L的磷酸盐缓冲液，10mg/mL的牛血清白蛋白，8mg/mL的氯化钠，10mg/mL的蔗糖，0.2‑10mg/mL的十二烷基二甲基甜菜碱和0.5mL/L的proclin300，pH为7.4。4.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述工作液中十二烷基二甲基甜菜碱的浓度为5mg/mL。5.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，示踪物包括吖啶酯及其衍生物、辣根过氧化物酶、碱性磷酸酶或三联吡啶钌；固体支持物包括磁性微粒、微孔滴定板、硝酸纤维素膜或聚苯乙烯胶乳，磁性微粒包括羧基磁珠、氨基磁珠、NHS磁珠、羟基磁珠、甲苯磺酰基磁珠或环氧基磁珠。6.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，（a）中ACE2或（b）中RBD三聚体抗原均独立地通过生物素‑亲和素系统包被在固体支持物上。7.根据权利要求1‑6任一项所述的试剂盒，其特征在于，还包括新型冠状病毒中和抗体的校准品和质控品。8.根据权利要求7所述的试剂盒，其特征在于，校准品和质控品的保存液均独立地包括0.01mol/L‑0.2mol/L磷酸盐缓冲液，100‑500mL/L小牛血清，5‑100mL/L乙二醇，0.2‑10mL/LTween20和0.5‑5mL/Lproclin300，pH为6.0‑7.6。9.根据权利要求8所述的试剂盒，其特征在于，校准品和质控品的保存液均独立地包括0.05mol/L磷酸盐缓冲液，100mL/L小牛血清，5mL/L乙二醇，1mL/LTween20和0.5mL/Lproclin300，pH为7.4。10.权利要求1‑9任一项所述的试剂盒在新型冠状病毒中和抗体检测或新型冠状病毒疫苗评价中的应用。2CN112986583A说明书1/16页检测新型冠状病毒中和抗体的试剂盒及其应用技术领域[0001]本发明涉及生物技术领域，具体而言，涉及一种检测新型冠状病毒中和抗体的试剂盒及其应用。背景技术[0002]新型冠状病毒SARS‑CoV‑2(即2019‑nCoV)是2019年新发现的一种病毒，可导致人类病毒性肺炎或肺部感染。冠状病毒基因组依次编码为刺突蛋白、包膜蛋白、膜蛋白和核衣壳蛋白。其中刺突蛋白是冠状病毒最重要的表面膜蛋白，含有两个亚基，S1亚基与S2亚