一种新型冠状病毒中和抗体检测试剂盒.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN115877000A(43)申请公布日2023.03.31(21)申请号202111162975.0(22)申请日2021.09.30(71)申请人迈克生物股份有限公司地址610000四川省成都市高新区百川路16号(72)发明人梁向红吴瀚李丹(74)专利代理机构成都高远知识产权代理事务所(普通合伙)51222专利代理师张娟肖柯岑(51)Int.Cl.G01N33/569(2006.01)G01N33/58(2006.01)G01N33/558(2006.01)G01N33/543(2006.01)权利要求书2页说明书11页(54)发明名称一种新型冠状病毒中和抗体检测试剂盒(57)摘要本发明提供了一种检测新型冠状病毒中和抗体的试剂盒，包括免疫层析试纸，所述免疫层析试纸包括衬板以及设置在衬板上并依次连接的样品垫、结合垫、检测垫和吸水垫；所述检测垫上设置有检测线和质控线；所述样品垫上包被有重组抗原，所述重组抗原是SARS‑CoV‑2S‑RBD与IgG抗体的Fc片段融合形成的融合蛋白SARS‑CoV‑2S‑RBD‑Fc；所述结合垫上包被有纳米颗粒标记的SARS‑CoV‑2ACE2；所述检测线上包被有抗IgG抗体的多抗。本发明检测试剂盒利用竞争法和夹心法结合检测的原理，可快速、简便地实现新型冠状病毒中和抗体的有效检测，成本低、灵敏度和特异性高，具有很好的推广应用前景。CN115877000ACN115877000A权利要求书1/2页1.一种检测新型冠状病毒中和抗体的试剂盒，其特征在于，它包括免疫层析试纸，所述免疫层析试纸包括衬板以及设置在衬板上并依次连接的样品垫、结合垫、检测垫和吸水垫；所述检测垫上设置有检测线和质控线；所述样品垫上包被有重组抗原，所述重组抗原是SARS‑CoV‑2S‑RBD与IgG抗体的Fc片段融合形成的融合蛋白SARS‑CoV‑2S‑RBD‑Fc；所述结合垫上包被有纳米颗粒标记的SARS‑CoV‑2ACE2；所述检测线上包被有抗IgG抗体的多抗。2.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述SARS‑CoV‑2S‑RBD‑Fc的包被浓度为0.1～100μg/mL。3.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述纳米颗粒标记的SARS‑CoV‑2ACE2是胶体金标记的SARS‑CoV‑2ACE2，包被浓度为O.D.值＝1～30。4.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述抗IgG抗体的多抗的包被浓度为0.1～2mg/mL。5.如权利要求1或4所述的试剂盒，其特征在于，所述IgG抗体为人IgG抗体，所述抗IgG抗体的多抗为鼠抗人IgG多抗；或，所述IgG抗体为鼠IgG抗体，所述抗IgG抗体的多抗为羊抗鼠IgG多抗。6.如权利要求1～4任一项所述的试剂盒，其特征在于，所述结合垫上还包被有纳米颗粒标记的IgG抗体，所述质控线上包被有与所述纳米颗粒标记的IgG抗体特异性结合的多抗；所述纳米颗粒标记的IgG抗体不与SARS‑CoV‑2S‑RBD‑Fc结合；优选地，所述纳米颗粒标记的IgG抗体是胶体金标记的IgG抗体。7.如权利要求6所述的试剂盒，其特征在于，所述纳米颗粒标记的IgG抗体是纳米颗粒标记的兔IgG抗体，与所述纳米颗粒标记的IgG抗体特异性结合的多抗是羊抗兔IgG多克隆抗体。8.权利要求1～7任一项所述的试剂盒的制备方法，其特征在于，包括如下制备免疫层析试纸的步骤：(1)样品垫预处理：将样品垫浸泡在含鼠抗人红细胞单克隆抗体的处理液中孵育后干燥备用；(2)抗原、抗体包被：将SARS‑CoV‑2S‑RBD‑Fc固定在预处理后的样品垫上，将纳米颗粒标记的SARS‑CoV‑2ACE2和纳米颗粒标记的IgG抗体固定在结合垫上，将抗IgG抗体的多抗固定在检测垫上形成检测线，将与所述米颗粒标记的IgG抗体特异性结合的多抗固定在检测垫上形成质控线；干燥备用；(3)免疫层系试纸组装：将样品垫、结合垫、检测垫、吸水垫在衬板上依次连接，即得免疫层系试纸；优选地，所述样品垫、结合垫为玻璃纤维素膜，所述检测垫为硝酸纤维素膜，所述吸水垫为滤纸。9.一种新型冠状病毒中和抗体的检测方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)先将待测样品滴加在权利要求1～7任一项所述试剂盒的免疫层析试纸的样品垫上，再将待测样品稀释液滴加在样品垫上；(2)室温放置15～30min，观察免疫层析试纸的显色结果。2CN115877000A权利要求书2/2页10.如权利要求9所述的检测方法，其特征在于，所述待测样品为血清、血浆或全血；所述血浆或全血为加入抗凝剂处理的血浆或全血。3CN115877000A说明书1/11页一种新型冠状病毒中和抗体检测试剂盒技术领域[0001]本发明属于生物医学检测领域，具体涉及一种新型冠状