SIRT1融合蛋白及其用途.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN116003624A(43)申请公布日2023.04.25(21)申请号202210984056.X(22)申请日2022.08.17(71)申请人南京紫珑生物科技有限公司地址211112江苏省南京市江宁区芝兰路18号6幢108-34(72)发明人凌有国吴昊天沈文华(74)专利代理机构上海上谷知识产权代理有限公司31342专利代理师蔡继清(51)Int.Cl.C07K19/00(2006.01)C12N15/62(2006.01)C12N15/867(2006.01)C12N7/00(2006.01)权利要求书2页说明书27页序列表（电子公布）附图1页(54)发明名称SIRT1融合蛋白及其用途(57)摘要本申请公开了一种SIRT1融合蛋白及其用途。本申请中，所述融合蛋白具有如式I所示的结构，A‑S，式I；式I中，A为目的蛋白元件，S为SIRT蛋白或其衍生蛋白；“‑”为连接元件，所述连接元件为键或连接序列；所述目的蛋白选自抗体、抗原片段、荧光蛋白和多肽中至少一种。本申请提供的融合蛋白，由于其将目的蛋白和SIRT1蛋白或其衍生蛋白相互融合，SIRT1蛋白或其衍生蛋白作为促表达元件可促进目的蛋白的表达，提升表达效率；本申请的优选的实施方式中提供的重组慢病毒载体表达载体，应用于慢病毒生产可显著提高慢病毒滴度。CN116003624ACN116003624A权利要求书1/2页1.一种融合蛋白，其特征在于，所述融合蛋白具有如式I所示的结构，A‑S，式I式I中，A为目的蛋白元件，S为SIRT蛋白或其衍生蛋白；“‑”为连接元件，所述连接元件为键或连接序列；所述目的蛋白选自抗体、抗原片段、荧光蛋白和多肽中至少一种。2.根据权利要求1所述的融合蛋白，其特征在于，所述SIRT蛋白的衍生蛋白选自下组中任一种：所述SIRT蛋白的衍生蛋白选自下组中任一种：(i)具有与SEQIDNO:1所示氨基酸序列≥90％同源性的氨基酸序列，且保持有与SEQIDNO:1所示的氨基酸序列的活性；(ii)SIRT1蛋白的截短体；(iii)SIRT1蛋白的截短体拼接物，所述SIRT1蛋白的截短体拼接物为两个或两个以上所述SIRT1蛋白的截短体依次拼接的产物；和(iv)SIRT1蛋白的功能突变体，所述功能突变体由SIRT1蛋白、SIRT1蛋白的截短体或SIRT1蛋白的截短体拼接物进行突变获得。3.根据权利要求1所述的融合蛋白，其特征在于，所述目的蛋白元件的氨基酸序列选自下组中任一种：(a)如SEQIDNO.45所示的氨基酸序列；(b)具有与SEQIDNO.45所示氨基酸序列≥90％同源性的氨基酸序列，且保持有与SEQIDNO.45所示的氨基酸序列的活性；(c)如SEQIDNO.47所示的氨基酸序列；和(d)具有与SEQIDNO.47所示氨基酸序列≥90％同源性的氨基酸序列，且保持有与SEQIDNO.47所示的氨基酸序列的活性。4.一种分离的多核苷酸，其特征在于，所述多核苷酸编码所述融合蛋白。5.根据权利要求4所述的多核苷酸，其特征在于，所述多核苷酸选自下组中任一种：(A1)序列如SEQIDNO:2所示的多核苷酸序列；(A2)序列如SEQIDNO:4所示的多核苷酸序列；(A3)序列如SEQIDNO:6所示的多核苷酸序列；(A4)序列如SEQIDNO:8所示的多核苷酸序列；(A5)序列如SEQIDNO:10所示的多核苷酸序列；(A6)序列如SEQIDNO:12所示的多核苷酸序列；(A7)序列如SEQIDNO:14所示的多核苷酸序列；(A8)序列如SEQIDNO:16所示的多核苷酸序列；(A9)序列如SEQIDNO:18所示的多核苷酸序列；(A10)序列如SEQIDNO:20所示的多核苷酸序列；(A11)序列如SEQIDNO:22所示的多核苷酸序列；(A12)序列如SEQIDNO:24所示的多核苷酸序列；(B)与(A)至(A12)中任一项所述多核苷酸序列的同源性≥95％(较佳地≥98％)的多核苷酸序列；和2CN116003624A权利要求书2/2页(C)与(A)至(A11)和(B)中任一项所述多核苷酸序列的同源性≥95％(较佳地≥98％)的多核苷酸序列。6.一种表达载体，其特征在于，所述表达载体含有权利要求4或5所述的多核苷酸。7.根据权利要求6所述的表达载体，其特征在于，所述表达载体为重组慢病毒表达载体。8.一种细胞，其特征在于，所述的细胞含有权利要求6或7所述的表达载体，或者在基因组中整合有权利要求4或5所述的多核苷酸。9.一种试剂盒，其特征在于，所述的试剂盒含有权利要求1所述的融合蛋白、权利要求4或5所述的多核苷酸、权利要求6或7所述的表达载体或者权利要求7所述的细胞。10.一种提高慢病毒滴度的方法，其特征在于，所