GDF15融合蛋白及其用途.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN115925982A(43)申请公布日2023.04.07(21)申请号202211012820.3(51)Int.Cl.(22)申请日2022.08.23C07K19/00(2006.01)C12N15/62(2006.01)(66)本国优先权数据C12N15/85(2006.01)202110977378.72021.08.24CNC12N5/10(2006.01)(71)申请人广东东阳光药业有限公司A61K38/18(2006.01)地址523808广东省东莞市松山湖园区工A61K47/68(2017.01)业北路1号A61P1/16(2006.01)(72)发明人燕江雨操蓉波肖琳曾君南A61P3/04(2006.01)黄丽玫危喜玲李钊锋龚庆伟A61P3/06(2006.01)闫兴国李静黄丹霞陈小锋A61P3/10(2006.01)李文佳A61P13/12(2006.01)(74)专利代理机构北京辰权知识产权代理有限公司11619专利代理师侯君然权利要求书3页说明书34页序列表（电子公布）附图10页(54)发明名称GDF15融合蛋白及其用途(57)摘要本发明涉及一种GDF15融合蛋白及其用途，该融合蛋白包括Fc变体和GDF15活性结构域，所述Fc变体依照EU编号在IgGFc的第356位和/或第439位处具有氨基酸取代并且仍具有形成同源二聚体的能力。本发明通过将该Fc变体与GDF15活性结构域融合，使得Fc‑GDF15融合蛋白具有显著提高的理化性质和重组表达量，具有与天然GDF15分子相当或更优的体外活性，并且具有显著延长的体内循环半衰期，可以支持两周一次甚至一个月一次的给药频率。CN115925982ACN115925982A权利要求书1/3页1.一种融合蛋白，其特征在于，所述融合蛋白包括GDF15活性结构域和Fc变体；所述Fc变体的C末端直接或者通过肽接头连接至所述GDF15活性结构域的N末端；所述Fc变体依照EU编号在IgGFc的第356位和/或第439位处具有氨基酸取代。2.如权利要求1所述的融合蛋白，其特征在于，所述Fc变体具有形成同源二聚体的能力。3.如权利要求1‑2任一项所述的融合蛋白，其特征在于，所述Fc变体依照EU编号将IgGFc的第356位的氨基酸取代为：除天冬氨酸(D)、谷氨酸(E)和半胱氨酸(C)以外的氨基酸；和/或所述Fc变体依照EU编号将IgGFc的第439位的氨基酸取代为：除精氨酸(R)、组氨酸(H)、赖氨酸(K)和半胱氨酸(C)以外的氨基酸；优选地，所述Fc变体依照EU编号将IgGFc的第356位的氨基酸取代为：甘氨酸(G)、丝氨酸(S)、丙氨酸(A)、苏氨酸(T)、缬氨酸(V)、天冬酰胺(N)、亮氨酸(L)、异亮氨酸(I)、谷氨酰胺(Q)、酪氨酸(Y)、苯丙氨酸(F)、组氨酸(H)、脯氨酸(P)、甲硫氨酸(M)、赖氨酸(K)、精氨酸(R)中的一种，和/或所述Fc变体依照EU编号将IgGFc的第439位的氨基酸取代为：甘氨酸(G)、丝氨酸(S)、丙氨酸(A)、苏氨酸(T)、缬氨酸(V)、天冬氨酸(D)、天冬酰胺(N)、亮氨酸(L)、异亮氨酸(I)、谷氨酸(E)、谷氨酰胺(Q)、酪氨酸(Y)、苯丙氨酸(F)、脯氨酸(P)、甲硫氨酸(M)中的一种；更优选地，所述Fc变体含有以下突变：E356R、E356Q、E356A、E356N中的一种，和/或K439D、K439E、K439Q、K439A、K439N中的一种。4.如权利要求1‑3任一项所述的融合蛋白，其特征在于，所述Fc变体含有以下突变中的一种：K439D、K439E、K439Q、K439A、K439N；优选地，所述Fc变体含有以下突变中的一种：K439D、K439E、K439Q。5.如权利要求1‑3任一项所述的融合蛋白，其特征在于，所述Fc变体含有以下突变中的一种：E356R、E356Q、E356A、E356N；优选地，所述Fc变体含有E356R突变。6.如权利要求1‑5任一项所述的融合蛋白，其特征在于，所述Fc变体还含有以下突变：依照EU编号将IgGFc的第234位和第235位的氨基酸取代为丙氨酸(AA)，和/或第447位的氨基酸删除。7.如权利要求1‑6任一项所述的融合蛋白，其特征在于，所述Fc变体包含下组之一的氨基酸序列，或者与下组之一具有至少85％、90％、95％或99％序列同一性的氨基酸序列：SEQIDNO：1‑22，SEQIDNO：27，SEQIDNO：29‑45。8.如权利要求1‑2任一项所述的融合蛋白，其特征在于，所述GDF15活性结构域为全长成熟GDF15蛋白、N端截短的GDF15蛋白、或保留GDF15生物学活性的任意变体。9.如权利要求1‑2任一项所述的融合蛋