一种利培酮人工半抗原、人工抗原及其制备方法和应用.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN116003404A(43)申请公布日2023.04.25(21)申请号202211605955.0(22)申请日2022.12.14(71)申请人杭州同舟生物技术有限公司地址310018浙江省杭州市江干区经济技术开发区白杨街道银海街550号2幢第二层B区(72)发明人王镇王凌志饶颖(74)专利代理机构浙江千克知识产权代理有限公司33246专利代理师黎双华(51)Int.Cl.C07D471/04(2006.01)C07K14/765(2006.01)C07K16/44(2006.01)G01N33/53(2006.01)权利要求书2页说明书9页附图4页(54)发明名称一种利培酮人工半抗原、人工抗原及其制备方法和应用(57)摘要本发明公开了一种新型的利培酮人工半抗原和人工抗原及其制备方法。利培酮人工半抗原的分子结构式如式Ⅰ，利培酮人工抗原的分子结构式如式Ⅱ。本发明还公开了利培酮人工抗原在制备抗利培酮抗体中的应用。本发明的利培酮人工半抗原最大程度地保留了利培酮的特征结构，且经过化学修饰具有可以与载体蛋白发生偶联的活性基团，可获得利培酮人工抗原；进一步制备获得的利培酮人工抗原可免疫获得亲和力高、灵敏度高、特异性强、效价高的抗利培酮抗体；该抗原抗体可用于免疫层析技术，具有灵敏度高、特异性强、易于操作、经济快速等优点，可用于利培酮的定量或半定量检测。CN116003404ACN116003404A权利要求书1/2页1.一种利培酮人工半抗原，其特征在于，其分子结构式如Ⅰ所示：2.如权利要求1所述的利培酮人工半抗原的制备方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：(1)7‑羟基利培酮和碳酸钾、对溴甲基苯甲酸甲酯进行取代反应，制得式A所示化合物；(2)式A所示化合物和碱溶液进行水解反应，再调节pH值至酸性，制得式I所示的利培酮半抗原；所述方法的反应式如下所示：3.如权利要求2所述的方法，其特征在于所述步骤(1)中，7‑羟基利培酮、碳酸钾、对溴甲基苯甲酸甲酯的物质的量之比为1:2～3:2～2.5；反应温度为60～70℃，反应时间为15～20小时；所述步骤(2)中，碱溶液为NaOH水溶液。4.一种利培酮人工抗原，其特征在于，其分子结构式如II所示：式II中，BSA为牛血清白蛋白。5.权利要求4所述的利培酮人工抗原的制备方法，其特征在于，所述方法为：将式I所示的利培酮人工半抗原与牛血清白蛋白通过活泼酯法结合，制得式II所示的利培酮人工抗2CN116003404A权利要求书2/2页原。6.如权利要求5所述的利培酮人工抗原的制备方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：(a)将式I所示的利培酮人工半抗原与N‑羟基琥珀酰亚胺、N,N'‑二环己基碳二亚胺按物质的量之比为1∶(1.2～1.5)∶(1.2～1.5)溶解于N,N‑二甲基甲酰胺溶剂中，室温搅拌反应18～20小时，反应结束后离心取上清液；(b)将步骤(a)的上清液滴加到牛血清白蛋白溶液中，混匀后将所得混合液置于4℃下静置过夜，经透析、离心取上清液，制得所述式II所示的利培酮人工抗原。7.如权利要求6所述的利培酮人工抗原的制备方法，其特征在于，所述步骤(b)中，所述牛血清白蛋白溶液的浓度为10mg/mL，步骤(a)的上清液与牛血清白蛋白溶液的体积比为1∶10。8.如权利要求1所述的利培酮半抗原或者权利要求4所述的利培酮人工抗原在制备抗利培酮抗体中的应用。9.一种抗利培酮抗体，其特征在于，所述抗利培酮抗体是由权利要求4所述的利培酮人工抗原经动物免疫得到的、可与利培酮发生特异性免疫反应的球蛋白。10.如权利要求9所述的抗利培酮抗体在检测利培酮中的应用。3CN116003404A说明书1/9页一种利培酮人工半抗原、人工抗原及其制备方法和应用技术领域[0001]本发明属于生物化工技术领域，具体涉及一种利培酮人工半抗原、人工抗原及其制备方法和应用。背景技术[0002]利培酮(Risperidone)，为苯并异恶唑衍生物，是新一代的抗精神病药，因其治疗窗宽且可以与其他药物合并用药，受到市场的广泛认可，成为治疗精神分裂症的常规药物之一。但是随着该药的推广，它的毒副作用也引起了人们的关注。常见不良反应有：失眠、焦虑、头痛、头晕、口干。较少见的不良反应有：嗜睡、疲劳、注意力下降、便秘、消化不良、恶心、呕吐、腹痛、视物模糊、阴茎异常勃起、勃起困难、射精无力、性淡漠、尿失禁、鼻炎、皮疹以及其它过敏反应。[0003]从该药上市以来，随着该药的推广，对于利培酮所致不良反应的报导也层出不穷，因此对该药的检测也越来越多。所以开发一种快速、简便、经济的检测方法也显得尤为重要。[0004]目前，对利培酮的检测主要依靠气相色谱‑质谱联用法(GC‑MS)、液相色谱四级杆飞行时间质