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(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN114790203A(43)申请公布日2022.07.26(21)申请号202210436731.5C07K1/107(2006.01)(22)申请日2022.04.25G01N33/94(2006.01)G01N33/577(2006.01)(71)申请人杭州同舟生物技术有限公司G01N33/531(2006.01)地址310018浙江省杭州市江干区经济技术开发区白杨街道银海街550号2幢第二层B区(72)发明人王镇邵越水丁枭科(74)专利代理机构浙江千克知识产权代理有限公司33246专利代理师黎双华(51)Int.Cl.C07D451/10(2006.01)C07K14/765(2006.01)C07K16/44(2006.01)C07K1/02(2006.01)权利要求书2页说明书11页附图8页(54)发明名称一种东莨菪碱人工半抗原、人工抗原及其制备方法和应用(57)摘要本发明公开了一种东莨菪碱人工半抗原、人工抗原及其制备方法和应用。东莨菪碱人工半抗原的分子结构如式(Ⅰ),东莨菪碱人工抗原的分子结构如式(Ⅱ)。本发明的东莨菪碱人工半抗原最大程度的保留了东莨菪碱的特征结构,且在远离这些主要特征结构的端位上引入了能与载体蛋白发生偶联的活性基团,可作为抗原决定簇;进一步制备获得的东莨菪碱人工抗原可进行小鼠免疫获得高亲和力、高灵敏度、强特异性的抗东莨菪碱单克隆抗体,可用于对东莨菪碱进行快速、准确的免疫检测和免疫分析。CN114790203ACN114790203A权利要求书1/2页1.一种东莨菪碱人工半抗原,其特征在于,其分子结构如(Ⅰ)所示:(Ⅰ);其中,n的范围为1~3。2.如权利要求1所述的东莨菪碱人工半抗原的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:以氢溴酸三水东莨菪碱以及丁二酸酐为原料,进行反应,得到东莨菪碱人工半抗原。3.根据权利要求2所述的东莨菪碱人工半抗原的制备方法,其特征在于,具体包括以下步骤:(1)将氢溴酸三水东莨菪碱溶于纯化水中,用氨水调节溶液的pH,经过萃取、干燥、过滤、减压蒸干得微白色油状物A;(2)将微白色油状物A溶于吡啶中,再加入二酸酐和4‑二甲氨基吡啶,回流搅拌反应,自然冷却至室温,减压蒸干溶剂,经萃取、纯化水洗涤、干燥、过滤、减压蒸干得东莨菪碱人工半抗原。4.根据权利要求3所述的东莨菪碱人工半抗原的制备方法,其特征在于,所述步骤(2)中回流搅拌反应温度为90~110℃,反应时间15~24h。5.一种东莨菪碱人工抗原,其特征在于,其分子结构如(Ⅱ)所示:(Ⅱ);其中,n的范围为1~3。6.如权利要求5所述的东莨菪碱人工抗原的制备方法,其特征在于,所述东莨菪碱人工抗原通过活泼酯法使权利要求1中的东莨菪碱人工半抗原与牛血清蛋白结合获得。7.权利要求6所述的东莨菪碱人工抗原的制备方法,其特征在于,具体包括以下步骤:(a)将东莨菪碱人工半抗原(Ⅰ)、N‑羟基琥珀酰亚胺以及二环己基碳二亚胺溶于有机溶剂中,发生反应,取上清液得到含有活化的东莨菪碱人工半抗原的反应液;(b)将含有活化的东莨菪碱人工半抗原的反应液滴加到牛血清蛋白溶液中,发生偶联反应,得到东莨菪碱人工抗原。8.权利要求7所述的东莨菪碱人工抗原的制备方法,其特征在于,所述步骤(a)中:东莨菪碱人工半抗原(Ⅰ)、N‑羟基琥珀酰亚胺以及二环己基碳二亚胺2CN114790203A权利要求书2/2页三者的摩尔比为1∶(1.2~1.5)∶(1.2~1.5);室温搅拌反应12~24h;所述步骤(b)中:反应温度为3~6℃,反应时间10~18h。9.如权利要求1所述东莨菪碱人工半抗原或者如权利要求5所述的东莨菪碱人工抗原在制备抗东莨菪碱抗体中的应用。10.一种抗东莨菪碱抗体,其为由权利要求5所述的东莨菪碱人工抗原经动物免疫得到的、可与东莨菪碱发生特异性免疫反应的球蛋白。3CN114790203A说明书1/11页一种东莨菪碱人工半抗原、人工抗原及其制备方法和应用技术领域[0001]本发明属于生物化工技术领域,具体涉及一种东莨菪碱人工半抗原、人工抗原及其制备方法和应用。背景技术[0002]东莨菪碱(Scopolamine)是一种莨菪烷型生物碱,主要存在于茄科植物颠茄类和曼陀罗类中,是洋金花、赛莨菪和天仙子中主要的生物碱。临床上,东莨菪碱主要用于镇痛、麻醉、抗晕动症、帕金森症、改善微循环、戒毒脱瘾、农药中毒等,市场需求巨大。[0003]自上世纪50年代末被用于治疗某些危重症获得成功后,该药被广泛的关注,尤其是近年来在临床医疗上应用范围日趋广泛,取得了令人注目的疗效。比如在治疗呼吸系统疾病、感染性休克、心血管疾病、消化系统疾病、神经系统疾病等疾病中都有重要用途。它的不良反应一般有口干、分泌物变稠、面色潮红、躁动不安