一种新型冠状病毒全基因组序列的扩增引物及扩增方法.pdf
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一种新型冠状病毒全基因组序列的扩增引物及扩增方法.pdf
本发明属于生物技术领域,具体涉及一种新型冠状病毒全基因组序列的扩增引物及扩增方法。为解决现有扩增方法成本高、耗时长、难度高等问题,本发明设计36对引物,并利用所述36对扩增引物进行PCR扩增,使用质量浓度为1%琼脂糖凝胶电泳检测PCR扩增产物,使用PCR扩增引物进行双端测序,测序序列使用DNASTAR软件包的SeqMan进行拼接。
一种广谱型的新城疫病毒全基因组扩增引物和扩增方法.pdf
本发明属于NDV的疫苗开发和以重组NDV为基础的其他生物制品制剂技术领域,具体涉及一种广谱型的新城疫病毒全基因组扩增引物和扩增方法。本发明以新城疫病毒的总RNA为模板反转录合成cDNA,通过引物Part1up/Part1down和Part2up/Part2down对cDNA进行RT‑PCR扩增得到Part1和Part2基因片段,经连接、转化,挑取阳性克隆得到新城疫病毒全基因组序列。本发明通过独特基因分段扩增方案,大大缩短建立重组NDV反向遗传系统的时间,该方案可用于所有新城疫病毒基因型,所需时间
一种蜜蜂西奈湖病毒基因组扩增引物和扩增方法及其应用.pdf
本发明公开了一种蜜蜂西奈湖病毒基因组扩增引物和扩增方法及其应用。本发明分别以六对引物作为扩增引物的上下游引物,以蜜蜂西奈湖病毒的RNA为模板进行RT‑PCR扩增,分别得到扩增产物,然后对扩增产物进行核酸序列测序,然后再拼接比对,得到蜜蜂西奈湖病毒基因组全长序列。本发明针对蜜蜂西奈湖病毒主要致病基因型,根据基因组所包含的三个开放阅读框设计了的分段扩增策略,并根据保守区域设计相应的扩增引物;其能有效的扩增出蜜蜂西奈湖病毒的全基因组序列。本发明可广泛应用于蜜蜂及蜂产品、检验检疫等具有蜜蜂西奈湖病毒检测需求及相应
一种扩增犬冠状病毒S基因全序列的引物、方法和应用.pdf
本发明公开了一种扩增犬冠状病毒S基因全序列的引物、方法和应用,引物序列如SEQIDNO.1~SEQIDNO.2所示;方法包括以下步骤:步骤一、提取病毒RNA;步骤二、cDNA合成;步骤三、PCR扩增;步骤四、基因片段检测及测序。本发明还提供了一种犬冠状病毒S基因全序列扩增方法的应用,用于对犬冠状病毒S基因全序列的检测与分析。本公开的扩增方法,无需采用常规多对引物进行拼接的方案,通过设计1对引物即实现了犬冠状病毒S基因S基因全序列的扩增,不仅操作便捷,还可以避免在高变区域无法扩增获得目的片段的风险。
蝙蝠源轮状病毒基因组及筛选引物、扩增引物和扩增方法.pdf
本发明公开了一种蝙蝠源轮状病毒基因组扩增和扩增方法及其应用,并公开了用于快速筛查蝙蝠源轮状病毒的引物对。本发明分别以4对引物作为扩增引物的上下游引物,以蝙蝠样本提取的轮状病毒RNA模板进行RT‑PCR扩增,分别得到扩增产物,然后对扩增产物进行核酸序列测序,然后在拼接比对得到蝙蝠源轮状病毒基因组部分节段序列。本发明针对蝙蝠源轮状病毒基因组特征和参考已知其他轮状病毒基因组序列,根据其基因组所包括的开放阅读框设计了分段扩增策略,并根据保守区域设计相应的扩增引物,能有效的扩增蝙蝠源轮状病毒全基因组序列。本发明可以