细胞上清的总蛋白定量检测试剂盒及其制备方法与应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN109239352A(43)申请公布日2019.01.18(21)申请号201810914869.5(22)申请日2018.08.13(71)申请人北京弘润天源基因生物技术有限公司地址100085北京市海淀区上地开拓路5号2层B222室(72)发明人王培培沈丽邓钺黄庆雷(74)专利代理机构北京纪凯知识产权代理有限公司11245代理人关畅任凤华(51)Int.Cl.G01N33/68(2006.01)G01N33/543(2006.01)G01N33/531(2006.01)G01N21/78(2006.01)权利要求书1页说明书12页附图5页(54)发明名称细胞上清的总蛋白定量检测试剂盒及其制备方法与应用(57)摘要本发明公开了细胞上清的总蛋白定量检测试剂盒及其制备方法与应用。该用于测定细胞培养上清液中的蛋白质含量的试剂盒,包括标准品包被的酶标板和考马斯亮蓝G250染色液，所述标准品包被的酶标板按照包括下述步骤的方法制备：将牛血清白蛋白用溶剂配制成牛血清白蛋白浓度不同的N种溶液，将所述N种溶液均分别加入酶标板的不同孔内，包被所述酶标板，得到标准品包被的酶标板；所述N为大于等于8的自然数；所述溶剂为pH值为7.4的磷酸缓冲盐溶液。本发明实现了快速、灵敏和准确地检测液体中的总蛋白含量，可用于生物化妆品制备，抗体制备，中药刺激细胞产生分泌物领域中的细胞培养上清液中的蛋白质含量的检测。CN109239352ACN109239352A权利要求书1/1页1.用于测定细胞培养上清液中的蛋白质含量的试剂盒,包括标准品包被的酶标板和考马斯亮蓝G250染色液，所述标准品包被的酶标板按照包括下述步骤的方法制备：将牛血清白蛋白用溶剂配制成牛血清白蛋白浓度不同的N种溶液，将所述N种溶液均分别加入酶标板的不同孔内，包被所述酶标板，得到标准品包被的酶标板；所述N为大于等于8的自然数；所述溶剂为pH值为7.4的磷酸缓冲盐溶液。2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于：所述pH值为7.4的磷酸缓冲盐溶液是将磷酸二氢钾、磷酸氢二钠、氯化钠和氯化钾溶于水中得到的磷酸二氢钾浓度为1.76mmol/L、磷酸氢二钠浓度为25.5mmol/L、氯化钠浓度为137mmol/L和氯化钾浓度为2.7mmol/L的溶液。3.根据权利要求1或2所述的试剂盒，其特征在于：所述N种溶液为牛血清白蛋白浓度分别为0mg/ml、0.1mg/ml、0.2mg/ml、0.4mg/ml、0.8mg/ml、1.0mg/ml、2.0mg/ml和4.0mg/ml的溶液。4.制备权利要求1-3中任一所述的试剂盒的方法，包括如下制备标准品包被的酶标板的步骤：将牛血清白蛋白用溶剂配置成牛血清白蛋白浓度不同的N种溶液，将所述N种溶液均分别加入酶标板的不同孔内，包被所述酶标板，得到标准品包被的酶标板；所述N为大于等于8的自然数；所述溶剂为pH值为7.4的磷酸缓冲盐溶液。5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于：所述pH值为7.4的磷酸缓冲盐溶液是将磷酸二氢钾、磷酸氢二钠、氯化钠和氯化钾溶于水中得到的磷酸二氢钾浓度为1.76mmol/L、磷酸氢二钠浓度为25.5mmol/L、氯化钠浓度为137mmol/L和氯化钾浓度为2.7mmol/L的溶液。6.根据权利要求4或5所述的方法，其特征在于：所述N种溶液为牛血清白蛋白浓度分别为0mg/ml、0.1mg/ml、0.2mg/ml、0.4mg/ml、0.8mg/ml、1.0mg/ml、2.0mg/ml和4.0mg/ml的溶液。7.根据权利要求4或5或6所述的方法，其特征在于：所述方法还包括将考马斯亮蓝G250染色液和所述标准品包被的酶标板单独包装后装入试剂盒得到用于测定细胞培养上清液中的蛋白质含量的试剂盒的步骤。8.权利要求1-3中任一权利要求所述的试剂盒在检测细胞培养上清液中的蛋白质含量中的应用。9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于：所述检测细胞培养上清液中的蛋白质含量为检测细胞培养上清液中的总蛋白质含量。10.根据权利要求8或9所述的应用，其特征在于：所述细胞为动物细胞、植物细胞或微生物细胞。2CN109239352A说明书1/12页细胞上清的总蛋白定量检测试剂盒及其制备方法与应用技术领域[0001]本发明涉及蛋白质含量检测领域中一种细胞上清的总蛋白定量检测试剂盒及其制备方法与应用。背景技术[0002]蛋白质是生命的物质基础，是有机大分子，是构成细胞的基本有机物，是生命活动的主要承担者。没有蛋白质就没有生命。氨基酸是蛋白质的基本组成单位，氨基酸通过脱水缩合形成肽链。蛋白质是由一条或多条多肽链组成的生物大分子，每一条多肽链有二十至数百个氨基酸残基不等；各种氨基酸残基按一定的顺序排列。蛋白质