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本发明公开了猪圆环病毒2型和3型检测用引物、探针及检测试剂盒。所述引物和探针如SEQIDNO:1至SEQIDNO:6所示。本发明还公开了含有上述引物和探针的荧光定量PCR检测试剂盒。使用本发明的检测试剂盒可同时检测和区分2种重要的引起猪繁殖障碍病的病毒,实现一次采样,一次分析,大大提高检测效率。