盐酸左氧氟沙星片的含量测定方案.pdf

设计作品名称盐酸左氧氟沙星片的含量测定方案盐酸左氧氟沙星片的含量测定方案一、设计背景盐酸左氧氟沙星（化学结构式见图1）是临床上常用的一种喹诺酮类合成抗菌药，是左氧氟沙星的左旋体，抗菌活性大概是氧氟沙星的两倍。盐酸左氧氟沙星抗菌谱较广、抗菌作用力强，它主要通过抑制细菌DNA旋转酶（细菌拓扑异构酶Ⅱ）的活性，阻碍细菌DNA复制来达到抗菌的目的。本品临床上主要用于呼吸系统疾病（如肺炎）的治疗，应用的主要剂型是片剂，盐酸左氧氟沙星片主要用于治疗呼吸系统感染、泌尿系统感染、肠道感染等由敏感细菌引起的中、轻度感染。盐酸左氧氟沙星片是本人所在实习单位的主要产品之一，为保证其药品的质量，适应工业化生产检测需要，为盐酸左氧氟沙星片设计一种科学、方便、易懂、可行的含量测定方案十分必要。本设计拟采用高效液相色谱法测定盐酸左氧氟沙星片的含量，制定盐酸左氧氟沙星片的含量测定预试验方案，以期为盐酸左氧氟沙星片的质量标准提高提供一定的参考依据。图1盐酸左氧氟沙星二、设计依据经查阅《中国药典》（2020年版）及中国知网相关期刊文献资料可知，测定盐酸左氧氟沙星片的含量多采用高效液色谱法（HPLC）。高效液相色谱法操作简单、样品分析速度快、结果准确度高、精密度高、重复性好、仪器自动化程度高、适应范围广，是《中国药典》（2020年版）（第二部）中有关含量测定项下，收载最多的方法。本设计主要参照《中国药典》（2020年版）（二部）盐酸左氧氟沙星片项下的内容和《中国药典》（2020年版）（四部）高效液相色谱色谱仪操作一般流程，以及企业内控有关盐酸左氧氟沙星片的质量标准共同制定，主要为企业生产的盐酸左氧氟沙星片的研究提供相关研究资料。三、设计方案1.仪器和材料（1）仪器十万分之一电子分析天平（岛津AUY120，岛津科技有限公司），高效液相色谱仪（安捷伦1260，安捷伦科技有限公司），无油真空泵（普瑞奇AP-01P，普瑞奇科技股份有限公司）。（2）材料盐酸左氧氟沙星片（规格0.5g/片），由实习单位提供，左氧氟沙星对照品（中国食品药品检定研究院，含左氧氟沙星96.0%），甲醇（色谱纯，国药集团化学试剂有限公司）、乙腈（色谱纯，天津市彪仕奇科技发展有限公司），醋酸铵（分析纯，天津金汇太亚化学试剂有限公司）、高氯酸钠（分析纯，佛山予华仪器科技有限公司）、磷酸（分析纯，济宁铭优化工有限公司）、盐酸（分析纯，佛山市华希盛化工有限公司），水为纯化水。2.溶液的配制方法（1）供试品溶液的制备取同一批次的盐酸左氧氟沙星片10片，精密称定，置于研钵中研细，取适量粉末药品（约相当于左氧氟沙星的量为0.1g），精密称定，置于100ml棕色容量瓶中，加适量0.1mol/L盐酸溶液使其溶解完全后，继续加0.1mol/L盐酸溶液稀释至刻度线，摇匀，经滤纸过滤，取续滤液。精密量取续滤液5ml，置于50ml棕色容量瓶中，用0.1mol/L盐酸溶液稀释至刻度线，摇匀，即得供试品溶液，备用。（2）对照品溶液的制备取左氧氟沙星对照品约5mg，精密称定，置于50ml棕色容量瓶中，加0.1mol/L盐酸溶液溶解并定量稀释至刻度线，摇匀，制成每1ml溶液中含有左氧氟沙星约0.1mg的对照品溶液，备用。（3）空白溶液的制备按左氧氟沙星片的处方组成，取不含左氧氟沙星的空白辅料适量，研细，取空白辅料的粉末适量（约相当于平均片重），精密称定，置于100ml棕色容量瓶中，加适量0.1mol/L盐酸溶液初步溶解后，继续加0.1mol/L盐酸溶液稀释至刻度线，摇匀，经滤纸过滤，取续滤液。精密量取续滤液5ml，置于50ml棕色容量瓶中，用0.1mol/L盐酸溶液稀释至刻度线，摇匀，即得空白溶液，备用。3.色谱条件色谱柱为安捷伦品牌的ODS柱（4.6mm×250mm，5μm），流动相为醋酸铵高氯酸钠溶液（取醋酸铵4.0g与高氯酸钠7.0g，加水1300ml使溶解，用磷酸调节pH值至2.5）-乙腈（80∶20），流速为1.0ml/min，检测波长选择在295nm处（测量波长可根据最大吸收波长和试验结果综合考虑选择），色谱柱的柱温为35℃，进样体积10µl。醋酸铵高氯酸钠溶液配制出来经0.45μm水相微孔滤膜抽滤，乙腈经0.45μm有机相微孔滤膜抽滤，超声仪脱气10min后分别放置于相应的贮液瓶中。4.仪器操作步骤①开启高效液相色谱仪和电脑，并联机。②按要求装好流动相，设置流动相体积；拧开Purge阀，以1.0mL/min流速分别对A、B管路排液，排液结束后关闭Purge阀；按色谱条件的要求设置流动相比例，设置色谱柱柱温为40℃、检测器波长为294nm。③用流动相平衡色谱柱约30min左右，监视基线，待压力线和信号线平整，准备实验。④将配制好的供试品溶液、对照品溶液和空白溶液依序放置于样品架；新建分析序列，选择其对应的采集方法和图谱处