用HPLC法测定补肾强身胶囊中淫羊藿苷含量.docx

用HPLC法测定补肾强身胶囊中淫羊藿苷含量【摘要】建立补肾强身胶囊的含量测定方法。方法采用HPLC法测定补肾强身胶囊中淫羊藿苷的含量。结果淫羊藿苷在～μg范围内线性关系良好，平均回收率%,RSD为%。结论该方法专属性强，灵敏度高，重现性好，可用于补肾强身胶囊的含量控制。【关键词】补肾强身胶囊淫羊藿苷HPLC【Abstract】ObjectiveToesta～μ%,%(n=9）.ConclusionThemethodissensitive,withstrongspecificityandreproducibility,andcanbeusedforqualitycontrolofBushenqiangshenCapsule.【Keywords】bushenqiangshencapsule;icariin;HPLC补肾强身胶囊由淫羊藿、金樱子、菟丝子、女贞子、狗脊五味药材组成，收载于《卫生部药品标准中经成方制剂》第四册，具有补肾强身的功效。用于治疗腰酸足软，头晕耳鸣，眼花心悸，阳痿遗精等病症。该制剂的质量标准过于简单，只对其性状进行了描述，没有含量测定的方法，不能有效地控制该制剂的质量。为了提高质量标准，本实验采用HPLC法对淫羊藿中的淫羊藿苷进行含量测定【1】1仪器与试药仪器Waters高效液相色谱仪：1525泵、2996紫外检测器、1500柱温箱、717自动进样器；AG-135电子天平［梅特勒-托利多有限公司］。试药淫羊藿苷对照品购自中国药品生物制品检定所；补肾强身胶囊(陕西海普药业有限公司提供）；硅胶G购自青岛海洋化工厂；试剂：甲醇为色谱纯；水为重蒸馏水；其他试剂均为分析纯。2淫羊藿苷的含量测定色谱条件【2】色谱柱：KromasilC18(×250mm,5μm）；流动相：乙腈-水；检测波长：270nm；柱温：35℃；流速：/min；进样量：10μl。对照品溶液的制备精密称取淫羊藿苷对照品，置100ml量瓶中，加甲醇使溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。供试品溶液的制备精密称取本品置25ml容量瓶中，加甲醇适量使溶解，并用甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，精取续滤液，在水浴上蒸干，加10ml水，转移至分液漏斗中，用乙酸乙酯振摇提取2次，每次10ml，合并提取液，蒸干，残渣加甲醇使溶解，转移至25ml容量瓶中，并用甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。阴性样品溶液的制备取除淫羊藿外的其他处方量药材，按制备工艺方法制备缺淫羊藿的阴性样品，按上述供试品溶液制备方法制成阴性样品溶液。系统适用性试验分别取对照品溶液、供试品溶液和阴性样品溶液，按确定的色谱条件进样测定。结果色谱行为良好，淫羊藿苷峰与其他组分色谱可达基线分离，且与相邻色谱峰分离度大于；理论板数按供试品淫羊藿苷峰计，在3000以上；而阴性样品溶液色谱中在对照品相应的位置无色谱峰，说明阴性样品无干扰。图1淫羊藿对照品HPLC图图2阴性样品HPLC图图3供试品HPLC图线性关系考察分别精密吸取浓度为/ml的淫羊藿苷对照品溶液2、4、6、8、10μl，注入液相色谱仪，按上述色谱条件测定峰面积积分值，以对照品进样量为横坐标，峰面积积分值为纵坐标，绘制标准曲线，得回归方程为：A=+，r=。结果表明淫羊藿苷在～μg范围内具有良好的线性关系。精密度试验取同一浓度的淫羊藿苷对照品溶液，在上述色谱条件下测定，连续进样5次，测定峰面积积分值，平均值为1009563，RSD=%。结果表明本法精密度良好。稳定性试验分别精密吸取同一供试品溶液10μl，于0、1、2、4、8、16h进样，测定其淫羊藿苷峰面积积分值，平均值为805027，RSD=%。结果表明，供试品溶液在16h内稳定。重复性试验取同一样品5份，分别按上述含量测定方法测定其淫羊藿苷含量，平均含量为%，RSD=%。结果表明，本法重现性良好。回收率试验精密量取已知含量的供试品各9份置100ml容量瓶中，分别精密加入浓度为μg/ml的对照品溶液、、、、、、、、，加甲醇适量使溶解，照项下供试品溶液制备方法同法操作，按上述色谱条件测定淫羊藿苷含量，得淫羊藿苷平均回收率为%，RSD为%。结果表明本方法加样回收率好。表1淫羊藿苷回收率试验结果样品测定按上述条件和方法测定三批样品中淫羊藿苷的含量，结果见表2。表2淫羊藿苷的测定结果3讨论处方中淫羊藿为君药，故选择淫羊藿作为含量控制对象。经试验采用HPLC法测定淫羊藿中淫羊藿苷的含量，准确性好，灵敏度高。检测波长的确定：用淫羊藿苷对照品溶液在230～300nm范围内进行紫外光谱扫描测定，结果在波长处有最大吸收,故确定其检测波长为270nm。以上结果表