急性肾功能衰竭临床超声诊断体会.docx

急性肾损伤患者治疗前后调节性T细胞和降钙素原水平测定及临床意义【摘要】目的：观察急性肾损伤患者外周血降钙素原(PCT)、CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)水平变化，探讨其与急性肾损伤患者的关系。方法：入选急性肾损伤患者38例，应用酶联荧光分析法和流式细胞术检测患儿外周血PCT、和CD4+CD25+Treg细胞水平(CD4+CD25+Treg占CD4+T细胞百分比，并与30例正常对照健康进行比较。结果：急性肾损伤患者的治疗前PCT水平、CD4+CD25+Treg细胞水平均高于正常对照组，差异均有统计学意义(P<0.05)，治疗后PCT水平、CD4+CD25+Treg细胞水平均高于正常对照组，差异无统计学意义(P〉0.05)。结论：PCT、CD4+CD25+Treg在急性肾损伤发病机制中起重要作用。【关键词】急性肾损伤；降钙素原；调节性T细胞目前研究发现，除与肾毒性、缺血缺氧、肾小球血流动力学的改变、急性肾小管坏死、阻塞、间质性损害、氧化应激等相关外,而免疫介导的炎性反应机制在急性肾损伤(AKI)发病中备受关注。其中降钙素原(PCT)作为炎性反应指标，发现其与重症感染、多器官功能障碍综合征、疾病预后等均有良好的相关性。而调节性T细胞(Treg)是一类具有负向免疫调控功能的T细胞亚群，已有研究证实，肾缺血预适应(IPC)诱导产生一定数量的Treg，可有效抑制后继更严重缺血所致的免疫炎性反应，从而减轻IRI损伤[1]。1对象与方法1．1一般资料本院收治38例急性肾损伤患者，其中男25例，女13例，年龄(47.0±14.7)岁，3周内无感染征象；对照组由30例健康志愿者组成，平均年龄为(46．6±14．8)岁，均无烟酒不良嗜好。1．2观察指标与方法38例急性肾损伤患者于治疗前和治疗1周后采集静脉血，对照组亦采集静脉血。分离血清后，冻存于-80℃冰箱。采用免疫化学荧光法检测PCT，PCT检测试剂由德国柏林BA．H．M．S．Diagnostica公司生产，以≥0．5ug／L为阳性阳性阈值。应用美国BD公司生产的CD4异硫氰酸荧光素(FITC)、CD25试剂盒/淋巴细胞分离液(Histopsque密度1.077g·mL-1)磁珠（购自Signa-Aldrch），FACSCalibur流式细胞仪(美国BD公司)检测CD4+CD25+/CD4+T细胞比例。用淋巴细胞分离液行密度梯度离心法分离出外周血单个核细胞(PNMC)，按照磁珠分离细胞方法逐步分离并纯化，用流式细胞仪检测CD4+CD25+/CD4+T细胞，最后得到纯化的CD4+CD25+调节性T细胞。1．3统计学处理采用SPSS19.0软件,计数资料进行x2检验,理论频数少于5时,使用Fisher确切概率法;计量资料采用(x±s)表示,两组间比较采用独立样本t检验,检验水准α=0.05。所有参数的相关分析采用Pearson's相关检验。2结果急性肾损伤患者的平均PCT水平明显高于对照组(P<0.05)；治疗前和治疗1周后比较，差异有显著性(P<0.05)；治疗一周后与对照组相比，差异无显著性(P>0.05)。急性肾损伤患者的平均CD4+CD25+/CD4+T细胞比例明显高于对照组(P<0.05)，治疗1周后与对照组相比，差异无显著性(P>0.05)。结果见表1。3讨论据研究，在人类健康个体的外周血循环中，CD4+CD25+Treg细胞占CD4+T细胞的5％-10％。Treg对特异性抗原和抗原提呈细胞的刺激无反应，且经TCR介导的信号刺激后能抑制CD4+淋巴细胞和CD8+淋巴细胞的活化增殖，减轻对机体组织的损伤，抑制炎性免疫细胞的聚集与炎性反应,保护损伤的肾组织,因此Treg是近年来AKI的研究热点之一，针对Treg调控这一新的治疗靶点，已有不少基础研究通过不同方法上调体内Treg的表达并起到肾脏保护作用，如肾脏晚期IPC，N一二甲基鞘胺醇(DMS)，IL-2复合物和间充质干细胞(MSC)等均能促进Treg的表达并有效减轻AKI的肾损伤程度。PCT是一种糖蛋白，为降钙素(CT)的前体。正常生理状态下，PCT由甲状腺C细胞产生。血清半衰期为25－30h。正常人体内PCT水平是很低的(<0．05Ug／L)，大量研究认为可以将血清PCT作为细菌感染的生物学标志物，以区别自身免疫性或病毒、真菌引起的感染。本研究结果显示，急性肾损伤组外周血CD4+CD25+/CD4+T细胞比例和PCT水平显著高于对照组，且治疗前后也有明显变化，提示在急性肾损过程中，炎症免疫反应参与其过程。综上所述，在急性肾损伤发生过程中，CD4+CD25+T细胞和PCT发挥重要作用，临床通过检测CD4+CD25+T细胞和PCT水平变化，可以及时判断患者病情，尽早干预，提高患者生存率。Reference：[1]张改华,饶向荣.急性