基因工程制药工艺优质文档.ppt

基因工程制药工艺第六章基因工程制药工艺6.3基因工程菌发酵培养与控制6.3.1培养基组成与控制1、碳源2、氮源3、无机盐4、选择剂基因工程大肠杆菌含有抗生素抗性基因，抗生素作为选择剂：卡那霉素、氨苄青霉素、氯霉素、博来霉素等。基因工程酵母菌常用氨基酸营养缺陷型，缺陷亮氨酸、组氨酸、赖氨酸、色氨酸等。5、诱导物6.3.2培养工艺与控制1、温度对工程菌生长的影响生长与生产温度不一致。较高温度表达量大，易形成包涵体。策略：较低温度下有利于表达可溶性蛋白质。对于热敏感的蛋白质，高温会降解破坏。策略：生产期可采用先高温，然后低温，变温表达，避免蛋白质降解。两端变温发酵培养：前期：较高温度发酵，获得足够高的菌体密度。后期：较低温度发酵，对菌体合成目标产物的抑制不明显，但可有效抑制目标产物的降解和包涵体形成，总体提高工程菌的生产能力。温度诱导型大肠杆菌表达系统：生长期维持37℃，生产期提高温度42℃。2、pH值对发酵的影响添加低浓度的单糖和双糖及其他有机物如甘油等对菌体生长具有一定的促进作用。温度诱导型大肠杆菌表达系统：对于热敏感的蛋白质，高温会降解破坏。干扰素是在酸性条件下稳定，而在碱性条件下容易降解。3基因工程菌的发酵培养与控制调节搅拌转速和通气量。酸性环境有利于发挥菌株生产能力。2、pH值对发酵的影响1基因工程制药微生物表达系统pH值影响产物稳定性，最适生长和最适生产pH不同。温度诱导型启动子：PL、PR2、pH值对发酵的影响两类：营养缺陷互补标记和抗生素抗性选择标记温度诱导型启动子：PL、PR1、温度对工程菌生长的影响1、温度对工程菌生长的影响1基因工程制药微生物表达系统3、溶解氧6.3.3产物诱导与终点控制在生产中应严格控制工程菌1、化学诱导表达2、温度诱导表达谢谢观看