基因工程制药工艺推选优秀ppt.ppt

基因工程(jīyīngōngchéng)制药工艺第六章基因工程(jīyīngōngchéng)制药工艺6.3基因工程(jīyīngōngchéng)菌发酵培养与控制6.3.1培养基组成(zǔchénɡ)与控制1、碳源2、氮源3、无机盐4、选择(xuǎnzé)剂基因工程大肠杆菌含有抗生素抗性基因，抗生素作为选择(xuǎnzé)剂：卡那霉素、氨苄青霉素、氯霉素、博来霉素等。基因工程酵母菌常用氨基酸营养缺陷型，缺陷亮氨酸、组氨酸、赖氨酸、色氨酸等。5、诱导(yòudǎo)物6.3.2培养(péiyǎng)工艺与控制诱导表达型工程菌：在细胞生长到一定阶段，必需添加诱导物，以解除目标(mùbiāo)基因的抑制状态，活化基因，进行转录和翻译，生成产物。基因工程大肠杆菌含有抗生素抗性基因，抗生素作为选择(xuǎnzé)剂：卡那霉素、氨苄青霉素、氯霉素、博来霉素等。细菌喜欢偏碱性：大肠杆菌适宜pH为6.3产物(chǎnwù)诱导表达与终点控制甲醇营养型酵母：加入甲醇进行诱导。酿酒酵母生长最适温度30℃，最高温度40℃。与信号肽序列融合，组成性分泌表达整合到染色体中，严谨控制，分泌表达分阶段控制pH：根据试验结果来确定(quèdìng)生长最适pH和产物最适pH，以达到最佳生产。一般情况下，目标产物(chǎnwù)对宿主是不利的不同工程菌对氮源利用能力差别很大，具有很高的选择性。甲醇营养型酵母：加入甲醇进行诱导。2培养(péiyǎng)工艺与控制干扰素是在酸性条件下稳定，而在碱性条件下容易降解。基因工程大肠杆菌含有抗生素抗性基因，抗生素作为选择(xuǎnzé)剂：卡那霉素、氨苄青霉素、氯霉素、博来霉素等。2、温度(wēndù)诱导表达诱导时间：菌体生长的对数(duìshù)期或稍后一些，升高温度，合成产物。了解发酵过程中各个阶段的适宜pH以后，进一步设法控制pH在合适的范围内。3产物(chǎnwù)诱导表达与终点控制与信号肽序列融合，组成性分泌表达大肠杆菌：利用大分子有机氮源，酵母粉等。生长期维持(wéichí)37℃，生产期提高温度42℃。当产率最大时，结束发酵。细菌喜欢偏碱性：大肠杆菌适宜pH为6.酵母：利用氨基酸为氮源。细菌(xìjūn)：IPTG诱导高度严谨控制无毒蛋白的高水平表达两端变温发酵培养：前期：较高温度发酵，获得足够高的菌体密度。后期：较低温度发酵，对菌体合成目标产物的抑制不明显，但可有效抑制目标产物的降解和包涵体形成，总体提高工程菌的生产能力。温度诱导型大肠杆菌表达系统：生长期维持(wéichí)37℃，生产期提高温度42℃。2、pH值对发酵(fājiào)的影响了解发酵过程中各个阶段的适宜pH以后，进一步设法控制pH在合适的范围内。分阶段控制pH：根据试验结果来确定(quèdìng)生长最适pH和产物最适pH，以达到最佳生产。3、溶解氧6.3.3产物诱导(yòudǎo)与终点控制在生产(shēngchǎn)中应严格控制工程菌1、化学诱导(yòudǎo)表达2、温度(wēndù)诱导表达