血栓和止血检验的基本方法专家讲座.pptx

第十三章血栓与止血检验基本方法教学要求1.掌握PT时间、APTT、3P试验、FDPs、血浆D-二聚体等试验检测原理及临床意义、正常吸附血浆、正常血清所含凝血因子、过敏性紫癜、ITP、DIC、Even综合征概念及临床表现，过敏性紫癜主要过敏原、ITP诊疗标准，血友病诊疗和分型。2.熟悉各型血友病及血管性血友病因子检测意义、血栓与止血筛选试验应用，过敏性紫癜、ITP、血友病、DIC、Even综合征试验室检验。3.了解血小板检测、抗凝血酶检测、血浆纤溶活性检测和血栓前状态检测意义、其它凝血障碍性疾病检验。(一)血浆凝血酶原时间测定（PT）1.原理在受检血浆中加入足量组织凝血活酶（即TF）浸出液和和适量Ca2+离子后，血浆凝固所需时间称为血浆PT。2.参考值(1)平均为12s±1s,男性：11s～13.7s；女性：11s～14.3s，超出对照3s以下为异常。(2)PT时间比值（PTR）=被检血浆PT（s）/正常参比血浆PT（s），宜用多份正常血浆PT几何均数参考值为1.00±0.15(3)国际标准化比值(INR)=PTR[S]参考值因国际敏感度指数[S]而异。INR：需先求得所用组织凝血活酶国际敏感度指数[S]，是所用组织凝血活酶与已知参比品相比较一个参数。是用多份凝血因子水平不一样血浆（包含正常人和口服抗凝剂患者血浆），用参比品测得它们logPT，再用待标定组织凝血活酶测得它们logPT，以前者为纵坐标，后者为横坐标作图，经回归求得直线斜率。即待标定组织凝血活酶[S]=已知[S]×斜率。[S]值越低，试剂对相关凝血因子降低敏感度越高。再按下式求得INR：INR=PTR[S]3.临床意义：是外源性凝血路径筛选试验。(1)PT延长①Vitk缺乏：Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ、Ⅹ统称为依赖Vitk凝血因子。Vitk↓、因子↓→PT↑。②抗凝治疗，香豆素类抗凝药品与Vitk化学结构相同，竞争性拮抗，使PT↑。③肝病：肝脏是合成除组织因子（Ⅲ）、钙（Ⅳ）及Ⅷ因子外其它因子主要场所，肝受损→凝血因子合成↓→PT↑。④先天性凝血因子缺乏症：Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ。⑤抗凝物质增多。(2)PT缩短：常见于血栓前状态和血栓性疾病。(二)活化部分凝血活酶时间测定1.原理：37℃条件下，以白陶土激活因子Ⅻ和Ⅺ，以脑磷脂（部分凝血活酶）代替血小板3因子，在Ca2+参加下，观察贫血小板血浆凝固所需时间，即为活化部分凝血活酶时间（APTT）。2.参考值男：37s±3.3s女：37.5s±2.8s超出正常对照10s以上为异常。3.临床意义：是内源性凝血系统敏感而简便筛选试验。(1)APTT时间延长：①内源性凝血路径因子缺乏：Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ、Ⅻ。②外源性凝血路径因子缺乏：Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ、Ⅹ。③血中抗凝物质增多。(2)APTT时间缩短：可见于高凝状态及血栓形成性疾病。三、纤溶活性筛查试验血浆纤溶活性增强筛查，普通选取能直接或间接检测出血浆纤溶酶降解纤维蛋白（原）降解产物（FDPs）试验，临床惯用有：凝血酶时间（thrombintime，TT）、血浆鱼精蛋白副凝固试验（plasmaprotaminepracoagulationtest，3Ptest）。(一)凝血酶时间测定1.原理：受检血浆中加入“标准化”凝血酶溶液后、血浆凝固所需要时间，即为凝血酶时间。2.参考值：16s～18s。超出对照3s以上为异常。3.临床意义(1)TT延长：①肝素及肝素类抗凝物增多。②FgDP(FbDP)↑→DIC(消耗Fb或Fg)。③先天性纤维蛋白(原)异常或缺乏症。(2)TT缩短:极罕见,主要见于一些异常蛋白血症如巨球蛋白血症。(二)可溶性纤维蛋白单体试验：3P试验1．原理：血浆硫酸鱼精蛋白副凝固试验（plasmaprotamineparacoagulationtest,3Ptest），是在待测血浆中加入硫酸鱼精蛋白,可使可溶性纤维蛋白单体(FM)与FDP(主要是X片段)形成可溶性复合物解离,游离FM之间自行聚合呈肉眼可见纤维絮状或胶冻状沉淀。2.参考值：阴性3.临床意义(1)原发性纤溶时：阴性。(2)继发性纤溶时早期：阳性。(3)DIC晚期因FgDP或FbDP（X、Y）被降解为低分子量小碎片（D、E）：阴性。(三)血浆D-二聚体检测——乳胶颗粒浊度分析法1.原理：受检血浆中加入标有D-二聚体单抗胶乳颗粒悬液，假如血浆中D-二聚体含高于0.5mg/L时即可与胶乳颗粒上抗体结合，发生胶乳颗粒凝集。2．血浆D-二聚体是交联纤维蛋白降解产物之一，为继发纤溶特有代谢物。3．意义参考值阴性，在继发纤溶时（DIC）阳性；原发纤溶时阴性。常作为判别原发性纤溶与继发性纤溶可靠指标，也是溶栓治疗有效观察指标。D-二聚体阳性或增高是诊疗DIC主要依据之一。第二节血管壁(内皮)检验一、血管性血友病因子检测1.原理：血浆中血管性血友病因子(vW