一种能同时检测猪肉和鸭肉源性成分的恒温扩增引物组及其试剂盒.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN106544413A(43)申请公布日2017.03.29(21)申请号201610880177.4(22)申请日2016.10.09(71)申请人杭州天迈生物科技有限公司地址310019浙江省杭州市江干区九环路63号2幢C座304室(72)发明人赵澎涛吴东兵廖军华(74)专利代理机构杭州杭诚专利事务所有限公司33109代理人尉伟敏赵越剑(51)Int.Cl.C12Q1/68(2006.01)C12N15/11(2006.01)权利要求书1页说明书5页序列表3页(54)发明名称一种能同时检测猪肉和鸭肉源性成分的恒温扩增引物组及其试剂盒(57)摘要本发明公开了一种能同时检测猪肉和鸭肉源性成分的恒温扩增引物组及其试剂盒，包括：（1）用于检测猪肉源性成分的引物；（2）用于检测鸭肉源性成分的引物。本发明能同时对两种肉源性（猪肉和鸭肉）成分进行交叉引物恒温扩增，结合核酸检测试纸条，能快速鉴定样品中的这两种肉源性成分。CN106544413ACN106544413A权利要求书1/1页1.一种能同时检测猪肉和鸭肉源性成分的恒温扩增引物组，其特征在于，包括：（1）用于检测猪肉源性成分的引物：正向外围引物：5’-ATTACCATGCCGCGTGAAACCGC-3’，反向外围引物：5’-TCCTGGAGTAAGATCCAGATG-3’；正向交叉引物：5’-TAAGCATAGTAGGCTGCAGTTGATTGGTTGCGAGTCATTG-3’，反向交叉引物：5’-TTGTGTTCTGGATTGTGGGAATAGAAGTTGA-3’，检测探针引物：检测探针引物1：5’-TCCGCCGGATTTCG-3’，检测探针引物2：5’-TGCAGCTCCCGTCTTC-3’；（2）用于检测鸭肉源性成分的引物：正向外围引物：5’-TTACTCATGAAGCTGCGTACCAGA-3’，反向外围引物：5’-CTGGAAGAGCCGCGATTA-3’；正向交叉引物：5’-CGAGCATAAGTTGGCAAAAGAGATCATGCTTAGGCCCAGTG-3’，反向交叉引物：5’-TGGCTTATGTGTGCTGGATAAAGTTGCGTGA-3’；检测探针引物：检测探针引物3：5’-CGAGGAACCGATTTCA-3’，检测探针引物4：5’-CGCAGGGGTTGGGGGAA-3’。2.根据权利要求1所述的恒温扩增引物组，其特征在于，检测探针引物1的5’端标记修饰生物素，检测探针引物2的5’端标记修饰荧光素FAM。3.根据权利要求1所述的恒温扩增引物组，其特征在于，检测探针引物3的5’端标记修饰生物素，检测探针引物4的5’端标记修饰荧光素FAM。4.一种能同时检测猪肉和鸭肉源性成分的试剂盒，其特征在于，包括核酸检测试纸条、玻璃化恒温扩增管、复溶缓冲液、石蜡油、无菌双蒸水及检测缓冲液，玻璃化恒温扩增管中添加有扩增液，扩增液中含有权利要求1所述恒温扩增引物组。5.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，所述扩增液包括如下成分：用于检测猪肉源性成分的正向外围引物2.5fmol，用于检测猪肉源性成分的反向外围引物2.5fmol，用于检测猪肉源性成分的正向交叉引物20fmol，用于检测猪肉源性成分的反向交叉引物10fmol，用于检测鸭肉源性成分的正向外围引物2.5fmol，用于检测鸭肉源性成分的反向外围引物2.5fmol，用于检测鸭肉源性成分的正向交叉引物20fmol，用于检测鸭肉源性成分的反向交叉引物10fmol，检测探针引物1为10fmol，检测探针引物2为10fmol，检测探针引物3为10fmol，检测探针引物4为10fmol，dNTPs为5.0pmol，甜菜碱5.0μmol，BstDNA聚合酶16U。6.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，所述复溶缓冲液的组成为：10mmol/LKCl，10mmol/L(NH4)2SO4，20mmol/LTris-HCl，2mmol/LMgSO4，0.1%TritonX-100；pH8.8。7.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，所述检测缓冲液的组成为：30mmol/L、pH7.0柠檬酸缓冲液，0.3mol/LNaCl。2CN106544413A说明书1/5页一种能同时检测猪肉和鸭肉源性成分的恒温扩增引物组及其试剂盒技术领域[0001]本发明涉及食品安全快速检测领域，特别涉及一种能同时检测猪肉和鸭肉源性成分的恒温扩增引物组及其试剂盒。背景技术[0002]肉制品是人体蛋白质的重要来源。动物源性食品消费市场中，猪、牛、羊肉制品是消费者最欢迎的动物源食品，占到日常消费肉制品的绝大部分，但由于不同物种的动物肉类品质和价格存在差异，给掺杂掺假创造了利润空间。