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(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN109266752A(43)申请公布日2019.01.25(21)申请号201710581548.3C12N15/11(2006.01)(22)申请日2017.07.17(71)申请人中国科学院成都生物研究所地址610000四川省成都市人民南路四段9号申请人成都市食品药品检验研究院(72)发明人唐卓段庆梓杜凤梁恒兴陈浩东黄春燕陈蓉张彪董娟张玉尚柯王巍吴文林(74)专利代理机构成都高远知识产权代理事务所(普通合伙)51222代理人张娟刘华玲(51)Int.Cl.C12Q1/6888(2018.01)C12Q1/686(2018.01)权利要求书1页说明书6页序列表1页附图3页(54)发明名称一种用于检测牦牛源性成分的试剂盒和方法(57)摘要本发明涉及包含SEQIDNO.1~SEQIDNO.2所示引物对和SEQIDNO.3所示探针的用于牦牛源性成分检测的试剂盒,还涉及用于检测牦牛源性成分的方法。本发明试剂盒及方法可以准确检测肉及肉制品中的牦牛源性成分,检测快速、准确,成本低,特异性好,灵敏度高,有广泛的应用前景。CN109266752ACN109266752A权利要求书1/1页1.SEQIDNO.1、SEQIDNO.2所示的引物对。2.SEQIDNO.3所示的探针。3.SEQIDNO.1、SEQIDNO.2所示的引物对和SEQIDNO.3所示探针在制备检测牦牛源性成分的试剂中的用途。4.根据权利要求3所示的用途,其特征在于:所述试剂是检测肉及肉制品中牦牛源性成分的试剂。5.一种用于检测牦牛源性成分的试剂盒,其特征在于:它包括SEQIDNO.1、SEQIDNO.2所示的引物对和SEQIDNO.3所示的探针。6.根据权利要求5所述的试剂盒,其特征在于:它还包括实时荧光PCR预混液。7.根据权利要求5所述的试剂盒,其特征在于:它还包括TaqDNA聚合酶、MgCl2、dNTP和反应缓冲液。8.根据权利要求5所述的试剂盒,其特征在于:所述试剂盒的组成为:PCR反应总体积为20μL时,其中,模板DNA的浓度为1ng/μL~100ng/μL;引物的浓度为10μmol/L;探针的浓度为10μmol/L。9.权利要求5~权利要求8所述的任意一项试剂盒在用于检测肉及肉制品中牦牛源性成分中的用途。10.一种检测牦牛源性成分的方法,其特征在于:它包括如下步骤:(1)提取样本DNA:取待检组织,提取其中的DNA;(2)基因扩增:用权利要求5~权利要求8任意一项所述的试剂盒对待检样本中的DNA进行扩增;(3)结果检测:对DNA扩增结果进行检测;其中,所述待检组织为肉及肉制品。2CN109266752A说明书1/6页一种用于检测牦牛源性成分的试剂盒和方法技术领域[0001]本发明属于分子生物学领域,具体涉及一种用于检测牦牛源性成分的试剂盒和方法。背景技术[0002]近年来,伴随着肉类市场的急剧扩大,肉类掺假的事件频频发生,掺假的方式越来越多,形式越来越复杂,已成为全球食品行业的一个突出问题。肉制品掺假不仅会引起个体的健康风险,包括疾病感染、代谢紊乱、过敏反应等,而且肉制品的掺假更易引起经济、宗教、道德的问题。[0003]目前,肉类掺假常见的检测技术有ELISA法、显微判定法、电子鼻法、质谱法等,但都存在灵敏度低、周期长、不能检测熟肉等缺点而未被广泛使用。PCR技术具有灵敏度高、操作简便、抗干扰能力强等优势,越来越多被用于动物源性成分检测。[0004]现有标准《SNT4397-2015出口食品中牦牛源性成分的检测方法实时荧光PCR法》是利用了荧光PCR方法检测牦牛源性成分,但仅可用于出口食品,而且我们在检测过程中发现,该方法对猪肉成分会出现假阳性,无法保证判定结果的准确性。[0005]公开号为CN102634581A的专利申请公开了一种牦牛源性纤维成分的荧光定量PCR方法,其仅针对牦牛毛发进行PCR扩增,而且引物序列不够特异,导致检测结果判定模糊,无法做出准确判定。发明内容[0006]本发明的目的在于提供一种用于检测牦牛源性成分的试剂盒和方法。[0007]本发明提供了SEQIDNO.1、SEQIDNO.2所示的引物对、SEQIDNO.3所示的探针。[0008]本发明还提供了SEQIDNO.1、SEQIDNO.2所示的引物对和SEQIDNO.3所示的探针在制备检测牦牛源性成分的试剂中的用途。[0009]其中,所述试剂是检测肉及肉制品中牦牛源性成分的试剂。[0010]本发明还提供了一种用于检测牦牛源性成分的试剂盒,它包括SEQIDNO.1、SEQIDNO.2所示的引物对和SEQIDNO.3所示的探针。[0011]其中,它还包括实时荧光PCR预混液。[0012]其中,它还包括TaqDNA聚合