氨测定试剂盒.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN107607524A(43)申请公布日2018.01.19(21)申请号201710771678.3(22)申请日2017.08.31(71)申请人迈克生物股份有限公司地址611731四川省成都市高新区百川路16号(72)发明人任荣梅陈中洪吴昌英罗湘宇龙腾镶(51)Int.Cl.G01N21/75(2006.01)权利要求书1页说明书23页(54)发明名称氨测定试剂盒(57)摘要本发明涉及医学检验技术领域，具体涉及一种氨测定试剂盒。本发明主要解决的是现有试剂稳定性不好的技术问题，故提供了一种新的氨测定试剂盒，其含有乳酸脱氢酶、谷氨酸脱氢酶、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸、α-酮戊二酸、三羟甲基氨基甲烷缓冲液和防腐剂等组分。本发明氨测定试剂盒稳定性优异，检测灵敏准确，可应用于全自动生化分析仪，具有很好的应用前景。CN107607524ACN107607524A权利要求书1/1页1.氨测定试剂盒，其特征在于：含有以下浓度的组分：乳酸脱氢酶5～50KU/L；谷氨酸脱氢酶1～10KU/L；烟酰胺腺嘌呤二核苷酸280～380μmol/L；α-酮戊二酸5～15mmol/L；缓冲液20～40mmol/L；防腐剂0.025-0.8％。2.根据权利要求1所述的氨测定试剂盒，其特征在于：含有以下浓度的组分：乳酸脱氢酶8-30KU/L；谷氨酸脱氢酶3-8KU/L；烟酰胺腺嘌呤二核苷酸280～380μmol/L；α-酮戊二酸5～15mmol/L；缓冲液20～40mmol/L；防腐剂0.025-0.8％。3.根据权利要求1或2所述的氨测定试剂盒，其特征在于：所述的缓冲液为三羟甲基氨基甲烷缓冲液。4.根据权利要求1～3任一项所述的氨测定试剂盒，其特征在于：所述的缓冲液pH为8.0-9.0。5.根据权利要求1～4任一项所述的氨测定试剂盒，其特征在于：所述的防腐剂为PC系列防腐剂或叠氮钠中的至少一种。6.权利要求1～5任一项所述的氨测定试剂盒在血液样本氨含量检测试剂中的用途。2CN107607524A说明书1/23页氨测定试剂盒技术领域[0001]本发明涉及医学检验技术领域，具体涉及一种氨测定试剂盒。背景技术[0002]氨(Ammonia，AMM)在人体内含量极低，但氨对人体是有毒性的，尤其是对中枢神经系统有毒副作用。正常人体内血氨的来源主要是两方面，一是来源于体内蛋白质在代谢过程中产生的氨基酸，以及经脱氨作用分解而来的内源性氨；另一来源是蛋白质类食物在肠道内经细菌分解而成的外源性氨。在正常人体内主要经过以下途径去除血氨的毒作用：1、肝内经鸟氨酸循环合成尿素，经肾脏排出体外；2、转变为氨基酸上的氨基；3、在肾脏泌氨中与肾小管腔中的H+形成铵盐，随尿排出体外。肝脏将氨合成尿素，是保证血氨正常的关键。当肝脏功能严重损伤(80％肝组织遭破坏)时，氨不能被解毒，在中枢神经系统聚集，会引起肝性脑病。[0003]一般来说，正常人体内游离血氨含量极低，血氨的生产和消除在正常体内维持着动态平衡，打破了这种平衡，血氨的生产增加或消除减少，都会引起血氨水平的增高。在发生代谢障碍性疾病肝性昏迷、肝性脑病、重症肝炎、尿毒症等及遗传性代谢性疾病时，由于氨不能从循环中及时清除均可使血氨升高。血氨测定是肝性脑病的重要实验诊断及监测指标，严重肝脏疾病时，氨不能从循环中清除，导致血氨增高，可引起肝性脑病(肝昏迷)。血氨病理学增高见于：1、严重肝损伤(肝性脑病、肝硬化、肝癌、重症肝炎等)；2、尿毒症；3、上消化道大出血；4、肝外门脉系统分流形成。生理性增高见于过多进食高蛋白饮食和运动后；减低见于低蛋白饮食和严重贫血等。由于高血氨有神经毒性，因此它的测定对于肝昏迷、Reye综合征及儿科的一些先天性代谢等疾病的诊断、观察和预后判断有着重要的意义。[0004]目前检测血氨的方法有多种，扩散法、去蛋白波氏比色法、离子交换层析法、氨电极法、酶法以及干化学法等等，全国临床检验操作规程推荐采用基于谷氨酸脱氢酶的酶学方法。基于谷氨酸脱氢酶的酶学方法的反应原理是：氨在谷氨酸脱氢酶的作用下与α-酮戊二酸和NADH反应，生成L-谷氨酸和NAD+，通过监测NADH的下降速率，与校准液相比，计算出血液样本中氨的含量。目前市场上存在单、双、三试剂等多种液体试剂盒及干片制剂用于血氨检测，但普遍存在试剂稳定性差的问题，特别是其中的NADH组分的稳定性尤为不好。NADH在水溶液中不稳定，易发生氧化还原反应，从而缩短试剂效期，难以在医院推广使用。冻干试剂虽能很好的解决液体试剂稳定性差的问题，但试剂在制备过程中需要进行冻干，增加试剂成本；冻干制剂在使用时也需要复溶等过程，使用较为繁琐，且复溶后的试剂短期不用完也难以继续使用，造成浪费，增加检测的实际成本。发明内容[