免疫荧光层析检测试纸条、免疫荧光层析检测系统以及确定样品中待测物含量的方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN107632159A(43)申请公布日2018.01.26(21)申请号201710608436.2G01N33/543(2006.01)(22)申请日2017.07.24G01N33/533(2006.01)(71)申请人深圳清华大学研究院地址518057广东省深圳市高新技术产业园南区深圳清华大学研究院申请人深圳无微华斯生物科技有限公司纳迈达斯生物科技中心(72)发明人王国新廖滔唐梅杰杨晴来赵肃(74)专利代理机构北京清亦华知识产权代理事务所(普通合伙)11201代理人赵天月(51)Int.Cl.G01N33/68(2006.01)G01N33/558(2006.01)权利要求书2页说明书11页附图6页(54)发明名称免疫荧光层析检测试纸条、免疫荧光层析检测系统以及确定样品中待测物含量的方法(57)摘要本发明提出了免疫荧光层析检测试纸条、免疫荧光层析检测系统以及确定样品中待测物含量的方法。所述免疫荧光层析检测试纸条包括：本体，所述本体上限定出依次相连的样品区、结合区、检测区、吸附区；荧光微球标记的第一抗体，所述第一抗体包被于所述结合区，所述第一抗体特异性识别待测物；检测线和质控线，所述检测线和质控线设置在所述检测区中；第二抗体，所述第二抗体包被于所述检测线上，所述第二抗体特异性识别所述待测物；以及第三抗体，所述第三抗体包被于所述质控线上，所述第三抗体特异性识别所述第一抗体，其中，所述荧光微球为近红外II区高分子荧光微球。利用本发明的免疫荧光层析检测试纸条检测的准确性强、灵敏度高、精密度高。CN107632159ACN107632159A权利要求书1/2页1.一种免疫荧光层析检测试纸条，其特征在于，包括：本体，所述本体上限定出依次相连的样品区、结合区、检测区、吸附区；荧光微球标记的第一抗体，所述第一抗体包被于所述结合区，所述第一抗体特异性识别待测物；检测线和质控线，所述检测线和质控线设置在所述检测区中，且所述检测线靠近所述结合区；第二抗体，所述第二抗体包被于所述检测线上，所述第二抗体特异性识别所述待测物；以及第三抗体，所述第三抗体包被于所述质控线上，所述第三抗体特异性识别所述第一抗体，其中，所述荧光微球为近红外II区高分子荧光微球，所述近红外II区高分子荧光微球是通过下列方法获得的：(1)利用与水不混溶的有机溶剂对荧光染料进行溶解，以便得到荧光染料溶液；(2)将高分子微球分散于十二烷基磺酸钠水溶液中，以便得到微球载体溶液；(3)将所述荧光染料溶液与所述微球载体溶液混合并进行超声处理，以便得到乳化混合液；(4)将所述乳化混合液进行溶胀，以便使所述荧光染料溶液浸入所述高分子微球溶胀过程中产生的纳米孔内；以及(5)对步骤(4)中所得混合物进行加热，随着所述有机溶剂的挥发，所述荧光染料结晶析出并被包裹在所述纳米孔内，以便获得所述近红外II区高分子荧光微球。2.根据权利要求1所述的免疫荧光层析检测试纸条，其特征在于，所述待测物为心肌肌钙蛋白，所述第一抗体为心肌肌钙蛋白抗体1；所述第二抗体为心肌肌钙蛋白抗体2，所述第一抗体和第二抗体上特异性识别所述待测物的位点并不相同，所述第三抗体为二抗，优选羊抗鼠抗体。3.根据权利要求1所述的免疫荧光层析检测试纸条，其特征在于，所述荧光染料具有式I所示结构任选地，所述荧光染料溶液中所述荧光染料的浓度为1-50mg/mL；任选地，所述有机溶剂为选自乙酸乙酯、二氯甲烷、三氯甲烷、1，2-二氯乙烷和芳烃中的至少一种，优选二氯甲烷；任选地，所述高分子微球为聚苯乙烯微球、聚甲基丙烯酸甲酯微球、聚甲醛微球、聚乳酸-羟基乙酸共聚物微球中的至少一种；2CN107632159A权利要求书2/2页任选地，所述高分子微球的粒径为20nm～1000nm；任选地，步骤(2)中，将所述高分子微球按照10-200mg/ml的质量体积比分散于所述十二烷基磺酸钠水溶液中；任选地，所述荧光染料溶液与所述微球载体溶液的体积比为1：(5-20)；任选地，所述荧光染料与所述高分子微球的质量比为(0.1-30):100；任选地，步骤(4)，所述溶胀是在10-50摄氏度下搅拌1-10小时完成的，任选地，步骤(5)中，所述加热的温度为50-90摄氏度。4.一种免疫荧光层析检测系统，其特征在于，包括：荧光免疫分析仪；以及权利要求1～3任一项所述的荧光免疫检测试纸条。5.一种确定样品中待测物含量的方法，其特征在于，包括：(1)将所述样品施加至权利要求1～3任一项所述的免疫荧光检测试纸条的样品区内；(2)确定所述免疫荧光检测试纸条的荧光信号；以及(3)基于所述免疫荧光检测试纸条的荧光信号，确定所述样品中待测物含量。6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述样品为血清样品。7.