一种特异性结合高表达PDL1蛋白的细胞的核酸适配体及其应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN108929874A(43)申请公布日2018.12.04(21)申请号201810756230.9(22)申请日2018.07.11(71)申请人安徽省昂普拓迈生物科技有限责任公司地址230000安徽省合肥市经济技术开发区石柱路339号金星商业城2期2002室(72)发明人罗昭锋张立云方晓娜何磊(74)专利代理机构合肥市长远专利代理事务所(普通合伙)34119代理人傅磊(51)Int.Cl.C12N15/115(2010.01)G01N33/569(2006.01)C12N5/09(2010.01)权利要求书1页说明书6页序列表1页附图2页(54)发明名称一种特异性结合高表达PDL1蛋白的细胞的核酸适配体及其应用(57)摘要本发明公开了一种特异性结合高表达PDL1蛋白的细胞的核酸适配体，所述核酸适配体序列包含以下四种序列中的至少一种：A、如SEQIDNo.1所示的DNA序列；B、与SEQIDNo.1所示DNA序列具有60％以上同源性，且能够特异性结合高表达PDL1蛋白的细胞的DNA序列；C、在严格条件下与SEQIDNo.1所示DNA序列杂交的DNA序列；D、由SEQIDNo.1所示DNA序列转录的RNA序列。本发明还公开了一种核酸适配体衍生物。本发明还公开了上述核酸适配体或核酸适配体衍生物的应用。本发明能够与表达PDL1蛋白的细胞紧密结合。CN108929874ACN108929874A权利要求书1/1页1.一种特异性结合高表达PDL1蛋白的细胞的核酸适配体，其特征在于，所述核酸适配体序列包含以下四种序列中的至少一种：A、如SEQIDNo.1所示的DNA序列；B、与SEQIDNo.1所示DNA序列具有60％以上同源性，且能够特异性结合高表达PDL1蛋白的细胞的DNA序列；C、在严格条件下与SEQIDNo.1所示DNA序列杂交的DNA序列；D、由SEQIDNo.1所示DNA序列转录的RNA序列。2.根据权利要求1所述特异性结合高表达PDL1蛋白的细胞的核酸适配体，其特征在于，所述核酸适配体序列被修饰，所述修饰包括磷酸化、甲基化、氨基化、巯基化、用硫取代氧、用硒取代氧或同位素化。3.根据权利要求1所述特异性结合高表达PDL1蛋白的细胞的核酸适配体，其特征在于，所述核酸适配体序列上连接荧光标记物、放射性物质、治疗性物质、生物素、地高辛、纳米发光材料、小肽、siRNA或酶。4.一种核酸适配体衍生物，其特征在于，所述核酸适配体衍生物是由权利要求1-3任一项中所述核酸适配体序列的骨架衍生出的硫代磷酸酯骨架序列，或者是由权利要求1-3任一项所述核酸适配体改造成的肽核酸。5.一种如权利要求1-3任一项所述核酸适配体或权利要求4所述核酸适配体衍生物在组织成像中的应用。6.一种如权利要求1-3任一项所述核酸适配体或权利要求4所述核酸适配体衍生物在捕获高表达PDL1蛋白的细胞中的应用。7.一种如权利要求1-3任一项所述核酸适配体或权利要求4所述核酸适配体衍生物在制备检测高表达PDL1蛋白的细胞的试剂盒或分子探针中的应用。2CN108929874A说明书1/6页一种特异性结合高表达PDL1蛋白的细胞的核酸适配体及其应用技术领域[0001]本发明涉及生物技术领域，尤其涉及一种特异性结合高表达PDL1蛋白的细胞的核酸适配体及其应用。背景技术[0002]程序性死亡分子1(programmeddeath-1，PD1)及其配体(programmeddeathligand，PDL)属于B7家族的共刺激分子，介导免疫反应的负性调节信号，在肿瘤发生、病毒感染以及自身免疫病中都发挥了特异性的调节作用。PDL有两种分子模式：细胞程序性死亡-配体1(Programmedcelldeath1ligand1，PDL1)和细胞程序性死亡-配体2(Programmedcelldeath1ligand1，PDL2)，PDL1组成性表达于T细胞、B细胞、巨噬细胞和树突状细胞(dentriccell，DC)上，在活化后的细胞上表达量增加。除此之外，PDL1还表达于大量非淋巴细胞的组织细胞上，如心脏内皮细胞、胰腺的β细胞、胎盘的合体滋养层细胞等等。相反，PDL2的表达相对较局限，主要表达在抗原递呈细胞上，如活化的巨噬细胞、DC，所以在调节免疫方面主要是PD1/PDL1发挥作用。PDL1也称为表面抗原分化簇274(clusterofdifferentiation274，CD274)或B7同源体1(B7homolog1，B7-H1)，由CD274基因编码，是由290个氨基酸组成的第一型跨膜蛋白。正常情形下免疫系统会对聚集在淋巴结或脾脏的外来抗原产生反应，抗原特异性的细胞毒杀性T细胞(CD8+T细胞)会增生，而PD