双特异性抗体及其应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN110305217A(43)申请公布日2019.10.08(21)申请号201810263832.0(22)申请日2018.03.27(71)申请人广州爱思迈生物医药科技有限公司地址510663广东省广州市黄浦区开源大道11号B10栋511室(72)发明人张文军陈翠娟韦雪梅罗彤晖(74)专利代理机构北京市柳沈律师事务所11105代理人张文辉凃滔(51)Int.Cl.C07K16/46(2006.01)C07K16/28(2006.01)A61K47/68(2017.01)A61K39/395(2006.01)A61P35/00(2006.01)权利要求书2页说明书23页序列表23页附图9页(54)发明名称双特异性抗体及其应用(57)摘要本发明提供了新的抗体和癌症治疗方法。具体地说，本发明涉及靶向CD3和肿瘤抗原靶点例如HER2的双特异性抗体，所述抗体的制备方法及其用途。本发明还涉及包含上述抗体的组合物以及使用所述抗体治疗癌症的方法。CN110305217ACN110305217A权利要求书1/2页1.抗体或抗体片段，其包含结合CD3的抗原结合域，所述结合CD3的抗原结合域具有SEQIDNO:21的重链可变区(VH)序列和SEQIDNO:22的轻链可变区(VL)序列。2.根据权利要求1所述的抗体或抗体片段，其包含SEQIDNO:9所示的重链序列，和SEQIDNO:11所示的轻链序列。3.根据权利要求1或2所述的抗体或抗体片段，其中所述抗体是双特异性抗体或多特异性抗体。4.根据权利要求1-3中任一项所述的抗体或抗体片段，其还包含结合肿瘤抗原靶点的另一抗原结合域。5.根据权利要求4所述的抗体或抗体片段，其中所述肿瘤抗原靶点是HER2。6.根据权利要求5所述的抗体或抗体片段，其中所述抗体包含选自Her2-OB1(SEQIDNO:1)、Her2-OB2(SEQIDNO:3)、Her2-OB3(SEQIDNO:5)和Her2-OB4(SEQIDNO:7)的重链序列。7.根据权利要求6所述的抗体或抗体片段，其中所述抗体包含Her2-OB4(SEQIDNO:7)的重链序列。8.根据权利要求1-7中任一项所述的抗体或抗体片段，其中所述抗体片段选自Fab片段、Fab'片段、Fd片段、Fd'片段、Fv片段、dAb片段、F(ab')2片段和scFv片段。9.双特异性抗体，其具有两条重链和一条轻链，其中第一重链自N端到C端具有scFv-铰链区-Fc；第二重链自N端到C端具有VH-CH1-铰链区-Fc；所述轻链自N端到C端具有VL-CL，其中所述第一重链的scFv的抗原结合结构域结合肿瘤抗原靶点，所述第二重链的VH-CH1与所述轻链的VL-CL形成另一抗原结合域，其结合免疫效应细胞表面的信号通道受体。10.根据权利要求9所述的双特异性抗体，其中所述肿瘤抗原靶点是HER2，且所述信号通道受体是CD3。11.根据权利要求9或10所述的双特异性抗体，其中所述第二重链的VH具有SEQIDNO:21的序列，所述轻链的VL具有SEQIDNO:22的序列。12.根据权利要求9-11中任一项所述的双特异性抗体，其中所述第二重链具有SEQIDNO:9的序列，所述轻链具有SEQIDNO:11的序列。13.根据权利要求9-12中任一项所述的双特异性抗体，其中所述第一重链的scFv自N端到C端具有Ch4D5单克隆抗体的VH区，连接肽[(GGGGS)xN，N＝3,4,5]和Ch4D5单克隆抗体的VL区，或者自N端到C端具有Ch4D5单克隆抗体的VL区，连接肽[(GGGGS)xN，N＝3,4,5]和Ch4D5单克隆抗体的VH区。14.根据权利要求9-13中任一项所述的双特异性抗体，其中所述第一重链具有选自下组的序列：Her2-OB1(SEQIDNO:1)、Her2-OB2(SEQIDNO:3)、Her2-OB3(SEQIDNO:5)和Her2-OB4(SEQIDNO:7)。15.根据权利要求9-14中任一项所述的双特异性抗体，其中所述第一重链具有Her2-OB4(SEQIDNO:7)的序列。16.根据权利要求9-15中任一项所述的双特异性抗体，其中所述第二重链的CH2含有L234A，L235A突变，和/或所述第一重链的CH2含有L234A，L235A突变。17.根据权利要求9-16中任一项所述的双特异性抗体，其中所述第二重链的CH3含有T394D,P395D,P396D突变，且所述第一重链的CH3含有P395K,P396K,V397K突变，或者所述第2CN110305217A权利要求书2/2页二重链的CH3含有P395K,P396K,V397K突变，且所述第一重链的CH3含有T394D,P395D,P39