双特异性抗体及其应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN114106192A(43)申请公布日2022.03.01(21)申请号202111585813.8A61K39/395(2006.01)(22)申请日2021.12.20A61K47/68(2017.01)A61P35/00(2006.01)(71)申请人广州爱思迈生物医药科技有限公司地址510000广东省广州市黄埔区开源大道11号B10栋5层511房(72)发明人张文军李峰刘敏潘志豪覃陆英曹广灿(74)专利代理机构北京品源专利代理有限公司11332代理人陈小龙(51)Int.Cl.C07K16/46(2006.01)C12N15/13(2006.01)C12N15/85(2006.01)C12N5/10(2006.01)权利要求书5页说明书31页序列表88页附图13页(54)发明名称双特异性抗体及其应用(57)摘要本发明提供了双特异性抗体及其应用，所述双特异性抗体含有抗体或抗体片段，所述抗体或抗体片段为具有第一重链和第一轻链以及第二重链和第二轻链的双特异性抗体或抗体片段；所述第一重链和第一轻链形成第一Fab区；所述第二重链和第二轻链形成第二Fab区；所述第一Fab区和第二Fab区中引入了多种突变。本申请通过对所述抗体或抗体片段的重链CH1和轻链CL界面氨基酸进行氨基酸大小和电荷突变，增强了针对不同抗原的重/轻链正确配对，保持特定抗原的结合能力，减少了错配并提高了结合特异性，提高了目的产物的产率。CN114106192ACN114106192A权利要求书1/5页1.抗体或抗体片段，其特征在于，所述抗体或抗体片段为具有第一重链和第一轻链以及第二重链和第二轻链的双特异性抗体或抗体片段；所述第一重链和第一轻链形成第一Fab区；所述第二重链和第二轻链形成第二Fab区；所述抗体或抗体片段的第一Fab区引入以下突变中的任意一种或至少两种的组合：a)重链恒定区CH1中的S186A/S186T/S186E/S186Q/S186M/S186D/S186K/S186V/S186W/S186Y；和轻链恒定区CL中的T178M/T178Y/T178L/T178I/T178A/T178V/T178S/T178R/T178E；b)重链恒定区CH1中的S188Y/S188M/S188T/S188F/S188V/S188L/S188I/S188R；和轻链恒定区CL中的S176M/S176L/S176Y/S176A/S176I/S176E/S176T/S176W/S176H/S176V；c)重链恒定区CH1中的V190T/V190I/V190W/V190M/V190Y/V190F/V190L/V190Q/V190S；和轻链恒定区CL中的S174F/S174N/S174M/S174A/S174T/S174W/S174R/S174C/S174K/S174H/S174Y/S174L；所述抗体或抗体片段的第二Fab区引入以下突变中的任意一种或至少两种的组合：a)重链恒定区CH1中的S186A/S186T/S186E/S186Q/S186M/S186D/S186K/S186V/S186W/S186Y；和轻链恒定区CL中的T178M/T178Y/T178L/T178I/T178A/T178V/T178S/T178R/T178E；b)重链恒定区CH1中的S188Y/S188M/S188T/S188F/S188V/S188L/S188I/S188R；和轻链恒定区CL中的S176M/S176L/S176Y/S176A/S176I/S176E/S176T/S176W/S176H/S176V；c)重链恒定区CH1中的V190T/V190I/V190W/V190M/V190Y/V190F/V190L/V190Q/V190S；和轻链恒定区CL中的S174F/S174N/S174M/S174A/S174T/S174W/S174R/S174C/S174K/S174H/S174Y/S174L。2.根据权利要求1所述的抗体或抗体片段，其特征在于，所述抗体或抗体片段的第一Fab区引入以下突变中的任意一种：a)重链恒定区CH1中的S186T和轻链恒定区CL中的T178A；b)重链恒定区CH1中的S188Y和轻链恒定区CL中的S176E；c)重链恒定区CH1中的V190F和轻链恒定区CL中的S174A；或a)重链恒定区CH1中的S186V和轻链恒定区CL中的T178L；b)重链恒定区CH1中的S188L和轻链恒定区CL中的S176W；c)重链恒定区CH1中的V190M和轻链恒定区CL中的S174R；或a)重链恒定区CH1中的S186W和轻链恒定区CL中的T178M；b)重链恒定区CH1中的S188F和轻链恒定区CL中的S