一种血型检测卡及其制备方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN110672862A(43)申请公布日2020.01.10(21)申请号201910938378.9(22)申请日2019.09.29(71)申请人迈克生物股份有限公司地址610000四川省成都市高新区安和二路8号1栋(72)发明人王小波毛亚琳黄谦(74)专利代理机构成都高远知识产权代理事务所(普通合伙)51222代理人李高峡张娟(51)Int.Cl.G01N33/80(2006.01)G01N33/543(2006.01)G01N33/544(2006.01)G01N33/531(2006.01)权利要求书2页说明书20页附图2页(54)发明名称一种血型检测卡及其制备方法(57)摘要本发明公开了一种用于血型检测的凝胶微球，其微球上连接有血型抗体。本发明还公开了一种用于血型检测的凝胶微球的制备方法，包括如下步骤：包括如下步骤：1)活化位于凝胶微球表面的基团，使所述基团能够与血型抗体发生化学反应而相接合；2)将血型抗体与被活化的基团相接合；3)使用封闭剂封闭未接合血型抗体的被活化的基团，洗涤，得到可特异性结合血型抗原的凝胶。本发明的血型检测卡相比现有的血型检测卡，具有更高的稳定性、灵敏度，应用前景良好。CN110672862ACN110672862A权利要求书1/2页1.一种用于血型检测的凝胶微球，其特征在于：凝胶微球上连接有血型抗体。2.如权利要求1所述的微球，其特征在于：血型抗体与凝胶微球通过位于二者表面的基团反应相连；优选地，凝胶微球表面的基团为甲苯磺酰基、环氧基、羧基、氨基或链霉亲和素。3.如权利要求2所述的微球，其特征在于：微球表面还连接了封闭剂，封闭剂与微球表面的基团反应连接，封闭剂所反应的微球表面的基团与抗体所反应的基团相同；优选地，所述的封闭剂为非蛋白类封闭剂。4.如权利要求2或3所述的微球，其特征在于：血型抗体与凝胶微球通过微球表面的羧基与血型抗体的氨基反应连接；所述封闭剂为可结合羧基的非蛋白类封闭剂，优选为带氨基的化合物，进一步优选为带氨基的聚乙二醇。5.如权利要求1所述的凝胶微球，其特征在于：所述的凝胶微球是葡聚糖凝胶、琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶微球；优选为羧基聚丙烯酰胺凝胶微球。6.一种血型检测卡，其特征在于：所述检测卡中的微球是权利要求1-5任一所述微球。7.一种用于血型检测的凝胶微球的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：1)活化位于凝胶微球表面的基团，使所述基团能够与血型抗体发生化学反应而相接合；2)将血型抗体与被活化的基团相接合；3)使用封闭剂封闭未接合血型抗体的被活化的基团，洗涤，得到可特异性结合血型抗原的凝胶；优选地，步骤1)所述的基团选自甲苯磺酰基、环氧基、羧基、氨基和链霉亲和素中的一种或两种以上；进一步优选地，步骤1)所述的基团为羧基；进一步优选地，步骤2)活化羧基所用试剂为1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐；更进一步优选地，步骤3)所述封闭剂为可结合羧基的非蛋白类封闭剂，优选为带氨基的化合物，进一步优选为带氨基的聚乙二醇。8.如权利要求7所述的制备方法，其特征在于：步骤1)所述凝胶微球是羧基聚丙烯酰胺凝胶微球；和/或，步骤2)使用终浓度为0.25-1mg/ml的1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐活化所述基团。9.如权利要求7所述的制备方法，其特征在于，步骤1)所述微球粒径X10为20.9-85.6微米；和/或，所述微球粒径X90为90.1-180.3微米；和/或，所述微球平均粒径为53.3-150.9微米；所述X10指粒径最小的10％的微球的最大粒径；所述X90指粒径最小的90％的微球的最大粒径。10.一种血型检测卡的制备方法，其特征在于，它是使用权利要求1-5任一所述的凝胶微球，或使用权利要求7-9任一所述方法制备得到的凝胶微球，与缓冲液混合，灌装于验血卡片的离心管内即可；所述缓冲液中，缓冲盐选自吗啉乙磺酸钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、磷酸氢二钾、磷酸2CN110672862A权利要求书2/2页二氢钾、氯化钠中的一种或多种；优选的，凝胶微球与缓冲液混合后，沉淀与上清的比例是2：(0.5-2)；更进一步优选地，沉淀与上清的比例是2：1。3CN110672862A说明书1/20页一种血型检测卡及其制备方法技术领域[0001]本发明属于输血检测领域，涉及一种血型检测卡的制备方法，检测的血型包括但不限于ABO血型系统的检测和Rh血型系统D、C、c、E、e抗原的检测。背景技术[0002]众所周知，血型检测与输血密切相关，在所有可能需要输血的手术前，都必须由输血科提供有效的血型检测结果。若受血者输入异体供血者血液时，可能产生同种异体抗体，发生输血性不良反应，其中最严重的是ABO、RhD血型不合所导致的