ABO、RhD血型定型试剂卡及其制备方法及其采用的抗体稀释液.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局*CN102445550A*(12)发明专利申请(10)申请公布号CN102445550A(43)申请公布日2012.05.09(21)申请号201010500464.0(22)申请日2010.10.09(71)申请人苏州苏大赛尔免疫生物技术有限公司地址215000江苏省苏州市苏州工业园区钟南街502号(72)发明人费敏(74)专利代理机构苏州华博知识产权代理有限公司32232代理人孙艳(51)Int.Cl.G01N33/80(2006.01)G01N33/531(2006.01)权利要求书2页说明书6页(54)发明名称ABO、RhD血型定型试剂卡及其制备方法及其采用的抗体稀释液(57)摘要本发明公开了一种ABO、RhD血型定型试剂卡及其制备方法及其采用的抗体稀释液，通过磷酸钠盐缓冲体系维持体系的pH值，添加了吐温80，去除凝胶保存液成份，并且使得红细胞通过凝胶间隙时获得合适的润滑能力，使无凝集的红细胞具有完全通过凝胶颗粒间隙的能力，而凝集的红细胞则不能通过。通过添加牛血清白蛋白保护抗体的效价，消除凝胶的非特异性吸附。采用叠氮钠降低微生物污染，延长产品的保存期，消除微生物污染带来的血型定型错误。并在制备过程中还需要对凝胶进行筛选，对筛选获得的凝胶原料需要进行溶胀、湿热灭菌、洗涤，消除凝胶中含有的微生物，去除凝胶保存液成份以及破损的凝胶颗粒，大大提高了产品的质量。CN10245ACCNN110244555002445569A权利要求书1/2页1.一种ABO、RhD血型定型试剂卡的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一、抗体稀释液的配制，所述抗体稀释液配方如下：甘氨酸：10-20g/L，磷酸氢二钠：0.30-0.50g/L，磷酸二氢钠：0.30-0.50g/L，牛血清白蛋白：12-20g/L，吐温80：0.005-0.015g/L，注射用水加至1L；步骤二：凝胶前处理a.湿热灭菌：选用丙烯葡聚糖凝胶，按照质量体积比1∶1.2-1∶2加入生理盐水悬浮凝胶，进行湿热灭菌，湿热灭菌后备用；b.洗胶：湿热灭菌后凝胶按照质量体积比1∶1.2-1∶2加入所述抗体稀释液，悬浮凝胶，凝胶静置时间不得少于6小时，以便凝胶自然沉降结实，倒去上清液，再加入质量体积比1∶1.2-1∶2的抗体稀释液，悬浮凝胶，如此重复至少2次，除去凝胶保存液成份、凝胶破损碎片，收集得到颗粒大小均匀的凝胶；步骤三：配料按照质量体积比1.3∶1-1.7∶1配制成IgM性质的单克隆抗A凝胶、含有IgM性质的单克隆抗B凝胶和含有IgM性质的单克隆抗D凝胶；以及不含抗体的抗体稀释液的的凝胶，即中性胶；步骤四：分装将所述抗A凝胶、抗B凝胶、抗D凝胶、中性胶分别加入到微柱凝胶管中，前三管为抗A凝胶、抗B凝胶、抗D凝胶，后三管为中性胶。步骤五：封口将分装好的微柱凝胶卡的上部微柱凝胶管口进行封口处理。2.根据权利要求1所述的ABO、RhD血型定型试剂卡的制备方法，其特征在于，所述抗体稀释液配方还包括以下组分：氯化钠：1.5-2.0g/L，叠氮钠：0.005-0.015g/L。3.根据权利要求1或2所述的ABO、RhD血型定型试剂卡的制备方法，其特征在于，所述分装是在微柱凝胶管中按照每管25-30ul的灌装量，分别灌注所述抗A凝胶、抗B凝胶、抗D凝胶和中性胶。4.根据权利要求3所述的ABO、RhD血型定型试剂卡的制备方法，其特征在于，所述封口是用铝箔对微柱凝胶管口进行热力塑封。5.根据权利要求4所述的ABO、RhD血型定型试剂卡的制备方法，其特征在于，所述封口步骤后增加步骤六：贴签，即封口完成后，在微柱凝胶管上贴签，形成ABO、RhD血型定型试剂卡。6.根据权利要求4所述的ABO、RhD血型定型试剂卡的制备方法，其特征在于，在步骤六后增加步骤七：封装，即对ABO、RhD血型定型试剂卡进行无菌塑封和装盒。7.一种用于制备权利要求1或2所述的ABO、RhD血型定型试剂卡的抗体稀释液，其特征在于，所述抗体稀释液配方如下：甘氨酸：10-20g/L，磷酸氢二钠：0.30-0.50g/L，磷酸二氢钠：0.30-0.50g/L，牛血清白蛋白：12-20g/L，吐温80：0.005-0.015g/L，注射用水加至1L。8.根据权利要求7所述的抗体稀释液，其特征在于，所述抗体稀释液还包括以下组分：氯化钠：1.5-2.0g/L，叠氮钠：0.005-0.015g/L。9.一种ABO、RhD血型定型试剂卡，其特征在于，所述ABO、RhD血型定型试剂卡采用权2CCNN110244555002445569A权利要求书2/2页利要求1或2所述的ABO、RhD血型定型试剂卡的制备方法制备。3CCNN110244555002445569A说明书1/6页ABO、RhD血型定型试剂卡及其制