用于结核分枝杆菌感染检测的抗原组合物.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN112457410A(43)申请公布日2021.03.09(21)申请号202011221017.1G01N33/58(2006.01)(22)申请日2020.11.05G01N33/68(2006.01)(71)申请人迈克生物股份有限公司地址611731四川省成都市武侯区高新区百川路16号(72)发明人张文娅张凌燕(74)专利代理机构北京华进京联知识产权代理有限公司11606代理人王勤思(51)Int.Cl.C07K19/00(2006.01)C12N15/62(2006.01)G01N33/569(2006.01)G01N33/543(2006.01)G01N33/577(2006.01)权利要求书1页说明书11页序列表5页(54)发明名称用于结核分枝杆菌感染检测的抗原组合物(57)摘要本发明涉及医学检测领域，具体而言，涉及一种用于结核分枝杆菌感染检测的抗原组合物。本发明筛选出的15条相配的特异性组合多肽，使结核分枝杆菌感染测定结果灵敏度更高、特异性更强。CN112457410ACN112457410A权利要求书1/1页1.抗原组合物，其包含序列如SEQIDNO:1～15所示的多肽。2.根据权利要求1所述的抗原组合物，SEQIDNO:1～15所示的多肽中的任意2种或多种融合形成融合肽。3.编码权利要求1或2所述的抗原组合物的核酸。4.含有权利要求3所述的核酸的载体。5.含有权利要求3所述核酸或权利要求4所述载体的宿主细胞。6.含有权利要求1或2所述的抗原组合物的结核分枝杆菌感染检测试剂盒。7.根据权利要求6所述的试剂盒，其还含有配对的抗γ‑干扰素第一抗体和第二抗体、固相载体、反应缓冲液、洗涤液、γ‑干扰素抗原标准品、阳性对照刺激物以及阴性对照中的一种或多种；所述第一抗体偶联有信号物质。8.根据权利要求7所述的试剂盒，所述第二抗体固定包被于所述固相载体上；可选地，所述固相载体选自试管、EP管、多孔板、微量反应板凹孔或微球；可选的，所述固相载体为磁微粒；可选地，所述信号物质选自发色团、地高辛标记探针、电子致密物质、胶体金或酶中的任一种或多种；可选地，所述信号物质为吖啶酯。9.权利要求1或2所述的抗原组合物在制备用于体外检测结核感染引起的特异性T细胞免疫反应的检测试剂或试剂盒中的应用。10.根据权利要求9所述的应用，所述的检测试剂或试剂盒采用基于化学发光法、放射免疫法、酶联免疫反应法或胶体金技术检测γ‑干扰素。2CN112457410A说明书1/11页用于结核分枝杆菌感染检测的抗原组合物技术领域[0001]本发明涉及医学检测领域，具体而言，涉及一种用于结核分枝杆菌感染检测的抗原组合物。背景技术[0002]结核病是由结核分枝杆菌引起的传染病，全球范围内，结核病是导致死亡的十大原因之一。目前对结核病的诊断主要依据临床症状、胸部X光片及细菌学检查，这些传统的诊断方法费时且检测率低，延误了早期发现及早期治疗的最佳时机。早期人们发现结核分枝杆菌可以刺激体内T细胞产生免疫反应，利用结核分枝杆菌的纯化抗原(tuberculinpurifiedproteinderivate，PPD)做成结核菌素皮肤试验(tuberculinskintest，TST)可快速诊断结核病。然而随着人们对诊断方法的深入研究发现，结核菌素试验存在诸多缺点，例如TST中使用的纯蛋白衍生物PPD的某些抗原成分与卡介苗和大多数环境中非结核分枝杆菌的抗原成分相同，易发生交叉反应，使TST出现较高的假阳性率，诊断特异性较低。[0003]而现目前采取结核分枝杆菌特异性细胞免疫反应(即γ‑干扰素释放试验，IGRAs)的主要原理：受到结核分枝杆菌抗原刺激致敏的T淋巴细胞(T细胞)再次遇到相同抗原时可产生γ‑干扰素，IGRAs通过检测样本中的T细胞在结核分枝杆菌特异性抗原刺激下产生的γ‑干扰素，判断受试者是否存在结核分枝杆菌感染。目前，国际上较成熟的IGRAs有两种：一是检测全血中致敏T细胞再次受到结核分枝杆菌特异性抗原刺激后释放的γ‑干扰素水平；二是测定在结核分枝杆菌特异性抗原刺激下，外周血单个核细胞中能够释放γ‑干扰素的效应T细胞数量。目前用于刺激的试剂主要为各种组合抗原，如常用的ESAT‑6和CFP‑10等抗原肽，单个抗原肽对于检测的灵敏度不能满足，需多个抗原肽联合检测，从而提高检测的灵敏度。而抗原肽的制定过程中，易产生类毒素，使测定结果产生假阳性，从而使测定的特异性降低。发明内容[0004]本发明综合以上矛盾，获得了一种具有较高灵敏度和特异性的可用于结核分枝杆菌感染或者结核病的检测所需的组合多肽作为刺激物。[0005]本发明涉及一种抗原组合物，其包含序列如SEQIDNO:1～15所示的多肽。[0006]