一种高载量的核酸提取用磁珠及其制备方法与应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN112779245A(43)申请公布日2021.05.11(21)申请号201911089465.8(22)申请日2019.11.08(71)申请人北京迈佳致和科技有限公司地址100085北京市海淀区上地信息路12号1幢D308室(72)发明人李宗洋(74)专利代理机构北京知元同创知识产权代理事务所(普通合伙)11535代理人聂稻波吕少楠(51)Int.Cl.C12N15/10(2006.01)H01F1/00(2006.01)H01F41/00(2006.01)权利要求书2页说明书5页附图4页(54)发明名称一种高载量的核酸提取用磁珠及其制备方法与应用(57)摘要本发明公开一种高载量的核酸提取用磁珠及其制备方法与应用。该磁珠包括磁核和包覆在所述磁核表层的包覆层，磁核的粒径R与包覆层的厚度D的比值R/D为0.5-8，包覆层上带有羟基、羧基、氨基、巯基、酚羟基或对甲苯磺酰基基团。制备时采用处理液对带有包覆层的磁核进行活化处理制备得到磁珠；处理液为包括无机盐、无机碱、水溶性有机碱和表面活性剂中的至少一种的水溶液；活化处理包括对含有带包覆层的磁核的处理液进行搅拌下超声处理。活化处理可使磁珠表面的包覆材料上形成褶皱等微观结构，在保持磁珠的磁强度不变下，增加磁珠的比表面积，从而使磁珠对核酸提取的载量增加。CN112779245ACN112779245A权利要求书1/2页1.一种磁珠，其特征在于，所述磁珠包括磁核和包覆在所述磁核表层的包覆层，所述磁核的粒径R与包覆层的厚度D的比值R/D为0.5-8，所述包覆层上带有羟基、羧基、氨基、巯基、酚羟基或对甲苯磺酰基基团；其中，R代表磁核的直径。2.根据权利要求1所述的磁珠，其特征在于，所述磁核为超顺磁性材料，所述磁核的粒径为10nm-10μm；优选地，所述磁核的形状为球形、立方体、长方体、圆柱体、棒状或无定形状；优选地，所述包覆层的厚度为10-500nm；优选地，形成包覆层的原料为二氧化硅、高分子聚合物、生物大分子材料中的至少一种。3.根据权利要求1或2所述的磁珠，其特征在于，所述磁珠的饱和磁化强度为25-80emu/g；优选地，每毫克磁珠结合核酸的量为10-100μg。4.权利要求1-3任一项所述磁珠的制备方法，其特征在于，采用处理液对带有包覆层的磁核进行活化处理制备得到所述磁珠；所述处理液为包括无机盐、无机碱、水溶性有机碱和表面活性剂中的至少一种的水溶液；所述活化处理包括对含有带包覆层的磁核的处理液进行搅拌下超声处理。5.根据权利要求4所述磁珠的制备方法，其特征在于，所述无机盐选自碳酸钠、碳酸氢钠、碳酸钾、碳酸氢钾、磷酸钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、柠檬酸钠、氟化钠、氟化氢钾、氟化铯、氯化钠、氯化钾和溴化钠中的至少一种；优选地，所述无机盐选自碳酸钠、碳酸氢钠、碳酸钾、碳酸氢钾、磷酸钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、柠檬酸钠、氟化钠、氯化钠或溴化钠；优选地，所述处理液中无机盐的浓度为0-10wt％；优选地，所述无机碱选自氢氧化钠、氢氧化钾、氨水、氢氧化钙中的至少一种；优选地，所述处理液中无机碱的浓度为0-10wt％；优选地，所述水溶性有机碱选自DBU(1,8-二氮杂二环[5.4.0]十一碳-7-烯)、DBN(1,5-二氮杂双环[4.3.0]壬-5-烯)、甲胺和乙胺中的至少一种；优选地，所述处理液中水溶性有机碱的浓度为0-10wt％；优选地，所述表面活性剂选自四丁基氟化铵、四丁基溴化铵、四丁基氯化铵、皂角粉、SDS(十二烷基硫酸钠)、MorwetEFW(丁基萘磺酸钠)中的至少一种；优选地，所述处理液中表面活性剂的浓度为0-0.15wt％。6.根据权利要求4或5所述磁珠的制备方法，其特征在于，所述磁核、包覆层、以及磁核的粒径R与包覆层的厚度D的比值R/D具有如权利要求1或2所述的含义；优选地，所述超声的时间为0.5-8h，超声频率为20-100kHz。7.根据权利要求4-6任一项所述磁珠的制备方法，其特征在于，所述制备方法还包括活化处理前对带有包覆层的磁核进行修饰的过程。8.根据权利要求4-7任一项所述磁珠的制备方法，其特征在于，所述磁珠的制备方法，包括以下步骤：(1)采用包覆材料对磁核进行包覆，得到具有包覆层的磁核；2CN112779245A权利要求书2/2页(2)对具有包覆层的磁性进行修饰，然后利用处理液对所述具有包覆层的磁核进行活化处理；或者，直接利用处理液对所述具有包覆层的磁核进行活化处理，得到所述磁珠；所述处理液为包括无机盐、无机碱、水溶性有机碱和表面活性剂中的至少一种的水溶液；所述活化处理包括对含有带包覆层的磁核的处理液进行搅拌下超声处理。9.权利要求4-8任一项所述制备方法得到的磁珠。10.权利要求1-3任一项或权