用于制备GalNAc亚磷酰胺差向异构体的方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN113840828A(43)申请公布日2021.12.24(21)申请号202080037148.6(74)专利代理机构北京市中咨律师事务所(22)申请日2020.05.1811247代理人胡晨曦黄革生(30)优先权数据19175309.42019.05.20EP(51)Int.Cl.C07H1/00(2006.01)(85)PCT国际申请进入国家阶段日C07H15/08(2006.01)2021.11.18C07H21/00(2006.01)(86)PCT国际申请的申请数据PCT/EP2020/0637492020.05.18(87)PCT国际申请的公布数据WO2020/234208EN2020.11.26(71)申请人豪夫迈·罗氏有限公司地址瑞士巴塞尔(72)发明人S·A·布莱特勒K·普恩特纳权利要求书7页说明书23页序列表1页(54)发明名称用于制备GalNAc亚磷酰胺差向异构体的方法(57)摘要本发明包括一种用于制备式I的GalNAc亚磷酰胺差向异构体、其对应的对映异构体和/或旋光异构体的方法，其中R1为羟基保护基，n为0至10的整数，且m为0至20的整数，以及该方法用于制备GalNAc‑簇寡核苷酸缀合物的用途。CN113840828ACN113840828A权利要求书1/7页1.一种用于制备差向异构纯的式I的GalNAc亚磷酰胺差向异构体、其对应的对映异构体和/或旋光异构体的方法，其中R1为羟基保护基，n为0到10的整数，且m为0到20的整数，所述方法包括a)偶联式II化合物，其中R3为羟基保护基，且m如上，或其盐与式III的GalNAc部分2CN113840828A权利要求书2/7页其中R1和n如上，以形成式IV的GalNAc酰胺其中R1、R3、n和m如上；以及b)除去所述羟基保护基R3，以形成式IV的所述GalNAc酰胺的游离醇，以及c)将式IV的所述GalNAc酰胺的游离醇与亚磷酰胺化剂反应以形成所述式I的所述GalNAc亚磷酰胺差向异构体。2.根据权利要求1所述的方法，其中R1为酰基。13.根据权利要求1或2所述的方法，其中R为C1‑6‑烷基羰基，其任选地被C1‑6‑烷基或苯基取代。4.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，其中n为0到5的整数，且m为0到10的整数。5.根据权利要求1至4中任一项所述的方法，其中R1为乙酰基，n为2且m为5。6.根据权利要求1至5中任一项所述的方法，其中R3为苄基。3CN113840828A权利要求书3/7页7.根据权利要求1至6中任一项所述的方法，其中所述式I包括式Ib到式Ie的GalNAc亚磷酰胺差向异构体。4CN113840828A权利要求书4/7页5CN113840828A权利要求书5/7页8.根据权利要求1至7中任一项所述的方法，其中所述式II的化合物通过以下步骤制备：a1)偶联式V的赖氨酸化合物其中R2和R4为氨基保护基与所述式VI的胺其中R3和m如上以形成式VII的羧酰胺；其中R2、R3、R4和m如上，以及b1)除去氨基保护R4，以形成式VIII的胺6CN113840828A权利要求书6/7页其中R2、R3和m如上；c1)偶联所述式VIII的胺与氨基受保护的赖氨酸以形成式IX的二肽其中R2和R3和m如上；以及d1)除去氨基保护基R2，以形成式II的化合物。9.根据权利要求8所述的方法，其中偶联步骤a1)和c1)在肽偶联剂、胺碱和有机溶剂的存在下进行。10.根据权利要求8或9所述的方法，其中所述肽偶联剂为正丙基磷酸酐，所述胺碱为叔胺，所述有机溶剂为极性非质子溶剂，并且反应温度选自20℃至70℃。11.根据权利要求8至10所述的方法，其中R4为在碱性条件下可断裂的氨基保护基，优选FMOC。12.根据权利要求11所述的方法，其中所述碱性条件涉及在有机溶剂的存在下用仲脂族胺、优选二乙胺处理。13.根据权利要求8至12中任一项所述的方法，其中所述氨基保护基R2为叔丁氧基羰基。14.根据权利要求8所述的方法，其中在步骤d1)中，在酸性条件下除去所述氨基保护基R2，并且形成与相应的酸的式IX的二肽的三铵盐。15.根据权利要求14所述的方法，其中所述酸为磺酸，优选甲磺酸。16.根据权利要求1至7所述的方法，其中在步骤a)中，所述式II的化合物与所述式III的GalNAc部分的偶联在肽偶联剂、胺碱和有机溶剂的存在下进行。17.根据权利要求16所述的方法，其中所述肽偶联剂为正丙基磷酸酐，所述胺碱为叔胺，所述有机溶剂为极性非质子溶剂，并且反应温度选自20℃至70℃。18.根据权利要求1至7所述的方法，其中步骤b)中的除去所述羟基保护基R3以形成所述游离醇是通过在氢化催化剂的存在下与氢进行的催化氢化的方式来进