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(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN115925783A(43)申请公布日2023.04.07(21)申请号202310219184.XA23L3/3526(2006.01)(22)申请日2023.03.09C12R1/865(2006.01)(71)申请人南京脂禾生物科技有限公司地址210046江苏省南京市栖霞区仙林街道纬地路9号江苏生命科技园D6栋207、208室(72)发明人孙小曼闫春晓黄和郭东升李颖风顾洋(74)专利代理机构天津盛理知识产权代理有限公司12209专利代理师韩晓梅(51)Int.Cl.C07K5/037(2006.01)C12P21/02(2006.01)A23L33/18(2016.01)权利要求书2页说明书9页附图3页(54)发明名称一种谷胱甘肽粗提物、复合天然抗氧化剂、应用及提高鱼油货架期的方法(57)摘要本发明公开了一种谷胱甘肽粗提物、复合天然抗氧化剂、应用及提高鱼油货架期的方法,所述谷胱甘肽粗提物是通过酿酒酵母发酵获得的。利用所述的谷胱甘肽粗提物的用于延长鱼油货架期的复合天然抗氧化剂,所述抗氧化剂由以下成分组成:植酸、谷胱甘肽粗提物和迷迭香。本发明通过单因素试验和正交试验相结合的方式,筛选获得一种复合天然抗氧化剂,该抗氧化剂能够有效维持鱼油氧化稳定性,该抗氧化剂能够实现鱼油的货架期由15天延长至30天。CN115925783ACN115925783A权利要求书1/2页1.一种谷胱甘肽粗提物,其特征在于:所述谷胱甘肽粗提物是通过酿酒酵母发酵获得的,具体包括如下步骤:步骤(1):从‑80℃冰箱取保菌管中的酿酒酵母10μL于YPD培养基,30℃,220rpm摇床过夜培养;步骤(2):按照菌液初始OD600=0.2转接至新鲜的YPD培养基,30℃,220rpm摇床培养48h,收集菌液;步骤(3):将收集的菌液3,000g离心5min,弃上清,收集菌体;步骤(4):利用热水抽提法制备酿酒酵母细胞中谷胱甘肽,具体操作为:向收集的菌体中先加入常温去离子水,然后加入沸水;在90℃恒温锅中浸提10min,并使用2MHCl调pH为3‑4,迅速转移至冰水中冷却10min,7,000rpm,离心30min,取上清液,得到谷胱甘肽粗提物。2.根据权利要求1所述的谷胱甘肽粗提物,其特征在于:所述酿酒酵母为酿酒酵母CEN.PK113‑7D;所述YPD培养基的配方为:葡萄糖:20g/L,蛋白胨:20g/L,酵母提取物:20g/L;所述摇床过夜培养为摇床过夜培养12h‑16h;上清液中谷胱甘肽的浓度为:0.020mg/mL。3.利用如权利要求1或2所述的谷胱甘肽粗提物的用于延长鱼油货架期的复合天然抗氧化剂,其特征在于:所述抗氧化剂由以下成分组成:植酸、谷胱甘肽粗提物和迷迭香。4.根据权利要求3所述的复合天然抗氧化剂,其特征在于:所述复合天然抗氧化剂使用后能够使鱼油的货架期由原来的15天延长至30天。5.如权利要求3所述的复合天然抗氧化剂在延长鱼油货架期方面中的应用。6.如权利要求3或4所述的复合天然抗氧化剂的使用方法,其特征在于:每千克鱼油制备过程中添加60mg植酸,30mg谷胱甘肽粗提物以及70mg迷迭香,将鱼油和天然抗氧化剂充分混合溶解,装罐密封。7.如权利要求3所述的复合天然抗氧化剂的筛选方法,其特征在于:包括如下步骤:S1:天然抗氧化剂的制备,其中植酸和迷迭香购买于市场,谷胱甘肽粗提物来源于酿酒酵母发酵获得;S2:测定鱼油过氧化值:将在市场购买的未处理的鱼油进行称重且等质量的进行分装;鱼油和天然抗氧化剂充分混合溶解;装罐密封;最后测定不同储存时间鱼油的过氧化值;通过单因素试验和正交试验,比较不同储存天数的鱼油过氧化值,筛选获得了一种延长鱼油货架期的最优天然抗氧化剂组合。8.根据权利要求7所述的复合天然抗氧化剂的筛选方法,其特征在于:包括如下步骤:步骤(1):称重:取天然的、未氢化且不含防腐剂的鱼油作为实验对象,按照每份鱼油100g进行分装,在每份中添加单一/复合天然抗氧化剂置于临时储存罐,以作备用;步骤(2):充分溶解:将上述步骤(1)所得混合物,置于磁力搅拌器,以转速1,200rpm/min,充分搅拌10min,确保抗氧化剂完全溶于鱼油;步骤(3):装罐密封;2CN115925783A权利要求书2/2页将充分溶解天然抗氧化剂的鱼油通过人工罐装的方式,定量罐装至棕色玻璃瓶,密封,保存于室温;步骤(4):测定不同储存时间的鱼油过氧化值。9.根据权利要求7所述的筛选方法,其特征在于:所述单因素试验为:植酸10mg/kg、20mg/kg、30mg/kg、40mg/kg、50mg/kg、60mg/kg、70mg/kg、80mg/kg,谷胱甘肽粗提物10mg/kg、20mg/kg、30mg/kg、40m