胃癌化疗多药耐药研究进展.ppt

胃癌化疗多药耐药研究进展胃癌是我国常见的恶性肿瘤且中晚期癌(进展期癌)占很大的比例。化疗是其治疗的重要手段之一。由于肿瘤细胞的耐药性化疗疗效常欠理想。20世纪60年代末Biedler和Riehm在中国仓鼠肺细胞上成功地筛选出对放线菌素D耐药的细胞株这种细胞株对结构与作用机制不同的多种药物如长春新碱、柔红霉素和丝裂霉素等产生耐药性此种现象称多药耐药性(multidrugresistanceMDR)。MDR包括原发性或继发性耐药。原发性耐药指化疗开始时已经存在继发性耐药指在化疗过程中产生的耐药性。MDR是导致肿瘤化疗失败的原因之一目前较为明确的机制包括：①多药耐药基因mdr1及其编码的P-糖蛋白(P-glycoproteinPgp)过度表达；②多药耐药相关蛋白（MDR-relatedproteinMRP）基因及其家族MRP2~6的过度表达；③肺耐药相关蛋白(lungresistance-relatedproteinLRP)的过度表达；④谷胱甘肽S转移酶(GST)的活性增加⑤DNA拓扑异构酶Ⅱ(topoisomeraseⅡToPoⅡ)量和质的改变。Pgp、MRP和LRP同属细胞膜ATP结合蛋白大家族(ATP-bindingcassettesuperfamily)的成员是导致肿瘤细胞多药耐药的重要原因。目前已发现该基因家族有五十多个成员。一、胃癌的化疗(一)胃癌化疗药物(二)联合化疗(三)新辅助化疗胃癌术前辅助化疗对于不能手术的胃癌有效而且对手术后有肝转移和淋巴结转移者有作用。它能延长患者的生存期。此外胃癌术前化疗可使胃癌TNM分期减低的作用如原有肝转移的第Ⅳ期不能手术的胃癌患者术前化疗后可能使手术成为可能。常用的药物为5-FU、CDDP、阿霉素、表阿霉素、丝裂霉素、拓扑异物酶抑制剂CPT-11及VP-16、MTX、Taxol、Taxotere等。一般主张联合应用化疗药物。二、胃癌多药耐药机制(一)ATP结合蛋白与胃癌耐药Pgp是由1280个氨基酸构成并组成2个同源部分每一部分包含6个跨膜功能区和1个ATP结合点。跨膜功能区具有疏水性ATP结合点则为药物的泵出提供能量。如果2个ATP结合点的任何一个失活则导致细胞的MDR功能丧失。Pgp和己知的许多转运蛋白如溶血素B、白细胞毒素等的结构和功能相似。抗癌药物通过被动扩散到细胞内然后与细胞膜糖白结合依靠ATP水解供能而主动泵出细胞外从而导致肿瘤细胞多种耐药性。1992年Cole等在两种非PgpMDR细胞株上首先发现一种膜转运蛋白基因过度表达并命名为mrp其编码蛋白质为MRP基因定位于16p13.1。mrp与mdr1基因有14%的同源序列。mrpmRNA全长6.5kb编码1531个氨基酸组成的分子量为190KD的蛋白质。MRP结构与Pgp相似。MRP和Pgp有19%同源性。MRP碳末端核酸结合位点上末位12个氨基酸为特征性标志MRP和Pgp在第5、8两个氨甚酸位点上不一致。MRP家族其他5个成员分别命名为MRP2、MRP3、MRP4、MRP5和MRP6。MRP6与MRP基因均定位于染色体16P13外显子均为31个。编码MRP3～5的基因与MRP基因不在同一染色体上。MRP基因家族分为两组一组包括MRP1、MRP2、MRP3和MRP6氨基酸序列同源性45%～48%特征为氮末端延伸200个氨基酸与5个胯膜片段结合；另一组包括MRP4和MRP5与MRP1同源性34%～39%与Pgp相似氮来源无上述延伸结构。1993年Scheper等在肺癌细胞株上发现相对分子质量为110000的蛋白(LRP)过度表达并认为是导致该细胞MDR的主要原因。通过荧光原位杂交技术发现LRP基因定位于16号染色体短臂16p13.1～16p11.2与MRP的基因位置相近。LRP基因长2.8kb。LRP基因测序表明氨基酸序列有87.7%与褐鼠的穹窿体主蛋白(majorvaultproteinMVP)具有同源性因此LRP可能是人的MVP。（2）Pgp、MRP及LRP的组织分布与生理功能MRP主要分布在肺、肌肉组织、睾丸和外周血单个核细胞内而在肝脏、大肠、十二指肠、肾脏、卵巢、胎盘和脑组织等表达较低。MRP主要定位于细胞膜上内质网、高尔基复合体亦有少量分布。MRP的底物是与谷胱甘肽的亲脂性复合物以及阴离子残基包括白细胞三烯C4、D4、E4以及S-（24-二硝基苯酚)谷胱甘肽。此外某些两性阴离子化合物尤其是谷胱甘肽、葡萄糖酸酯及硫酸盐等的偶合物是MRP的底物。在剔除MRP基因(Knock-out)模型研究中发现MRP对于谷胱甘肽结合物的转运具有重要作用。MRP2主要表达在肝细胞的毛细胆管膜上正常肾脏小管细胞的管腔