一种酒石酸/磷酸泰乐菌素的制备方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN108329370A(43)申请公布日2018.07.27(21)申请号201810356481.8(22)申请日2018.04.19(71)申请人齐鲁制药（内蒙古）有限公司地址010080内蒙古自治区呼和浩特市新城区金川开发区南区纬四路2号(72)发明人成祥兴范泽雷居亚东刘萍(74)专利代理机构济南金迪知识产权代理有限公司37219代理人张宏松(51)Int.Cl.C07H17/08(2006.01)C07H1/06(2006.01)权利要求书1页说明书5页附图2页(54)发明名称一种酒石酸/磷酸泰乐菌素的制备方法(57)摘要本发明涉及一种酒石酸/磷酸泰乐菌素的制备方法，本发明过滤后的发酵液通过特定的碱液、特定pH可以将发酵液中没有过滤掉的特殊蛋白质进行析出分离，通过离心将发酵液中没有过滤掉的特殊蛋白质及发酵产生的脂肪酸、部分油脂彻底去除，并且对溶媒乙酸丁酯起到净化作用，促使萃取高效进行，在净化溶媒的同时不会对溶媒造成其他任何影响，保证萃取顺利进行，同时操作简单、成本低，简单、成本低的处理手段即可达到高效、彻底的减少发酵滤液杂质，提高了产品的纯度及溶解性。CN108329370ACN108329370A权利要求书1/1页1.一种酒石酸/磷酸泰乐菌素的制备方法，包括步骤如下：向经过发酵得到的泰乐菌素发酵液中加入絮凝剂或助滤剂搅拌预处理后，经板框分离得到滤液，滤液进行提纯后，进行萃取，再经过反萃取、脱色、干燥得到泰乐菌素产品；其中，所述的提纯是向滤液中加入氢氧化钠溶液，然后泵入混合器中进行混合，控制pH在7.5—8.0范围内，混合液以4000-5000转/min的转速下离心，得到提纯后滤液，提纯后滤液加入乙酸丁酯溶媒进行萃取。2.根据权利要求1所述的酒石酸/磷酸泰乐菌素的制备方法，其特征在于，所述的絮凝剂为聚氯化铝，聚氯化铝的添加量与发酵液的重量比为1.0±0.3％(w/w)，所述的助滤剂为质量浓度为20-22％的聚合氯化铝溶液，聚合氯化铝溶液的添加量与发酵液的质量体积比的0.6％(w/v)；预处理时间为20-30min。3.根据权利要求1所述的酒石酸/磷酸泰乐菌素的制备方法，其特征在于，所述的固液分离采用压滤或压榨方式进行，压滤或压榨压力小于等于0.4Mpa。4.根据权利要求1所述的酒石酸/磷酸泰乐菌素的制备方法，其特征在于，提纯控制pH为7.5-7.9。5.根据权利要求1所述的酒石酸/磷酸泰乐菌素的制备方法，其特征在于，提纯控制pH为7.5-7.7。6.根据权利要求1所述的酒石酸/磷酸泰乐菌素的制备方法，其特征在于，提纯控制pH为7.54。7.根据权利要求1所述的酒石酸/磷酸泰乐菌素的制备方法，其特征在于，离心转速为4500-4800转/min，离心时间为0.2s-2min。8.根据权利要求1所述的酒石酸/磷酸泰乐菌素的制备方法，其特征在于，氢氧化钠溶液质量浓度为2-6wt％。2CN108329370A说明书1/5页一种酒石酸/磷酸泰乐菌素的制备方法技术领域[0001]本发明涉及一种酒石酸/磷酸泰乐菌素的制备方法，属于生物农药制备技术领域。背景技术[0002]泰乐菌素首先由美国学者Hamill等从泰国土壤中分离而得，产生菌有弗氏链霉菌(S.fradiae，NRR2702，2703)，龟裂链霉菌(S.rimosns)和吸水链霉菌(S.hygro-scopicus)；泰乐菌素有效成分包括：泰乐菌素A(真泰乐菌素)、泰乐菌素B(脱碳酶糖泰乐菌素Desmycosin)泰乐菌素C(大菌素mucrosin)和泰乐菌素D(雷洛霉素Relomysin)，A组分≥80％，总组分A+B+C+D≥95％，效价＞800IU。泰乐菌素各有效成分的化学结构式见下表1：[0003]表1[0004][0005]泰乐菌素的发酵以豆油为主要碳源。葡萄糖对泰乐菌素的生物合成有明显抑制作用，若分化期发酵中存在过量的葡萄糖，则促进ATP水平的上升，从而抑制泰乐菌素的生长，而豆油中的油酸、亚油酸经过甲基化形成甲基油酸，它是泰乐菌素的前体物质，能促进其生物合成。因此，在发酵过程中主要以补加豆油来满足产生菌对碳源的需要。而严格控制豆油的加量是决定发酵成败的关键。豆油含量低，不利于菌丝生长，而含量过高，则不能完全利用，产生脂肪酸积累，造成pH值下降，由此抑制了大菌素C甲基转移酶的活性，影响了组份含量。泰乐菌素发酵过程中温度、PH、菌丝生产状况和豆油添加量，对大菌素C甲基转移酶的活性具特征性指标意义，一直是决定泰乐菌素产量的关键点。[0006]泰乐菌素的发酵应严格控制杂菌污染，若因条件有限或不可避免或因操作、设备等原因造成染菌，泰乐菌素发酵液染菌后，放罐质量差，有异臭，滤速慢，滤液浑浊，效价降低，残