一种通便灵胶囊指纹图谱及其构建方法和应用.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN115436490A(43)申请公布日2022.12.06(21)申请号202110613928.7(51)Int.Cl.(22)申请日2021.06.02G01N30/02(2006.01)G01N30/06(2006.01)(71)申请人武汉康乐药业股份有限公司G01N30/34(2006.01)地址430056湖北省武汉市武汉经济技术G01N30/36(2006.01)开发区3MA地块(创业三路29号)G01N30/86(2006.01)(72)发明人明孟碟卢子龙饶德林刘世勇林诚诚陈日丹戴志军王磊贺友虎王红朋范军黎俊杰曹儒宾郭斐李莎华桂香胡倩倩张丹樊璐武新红鲁俊娥程诗旋王蓉段玲玲王芳周晓签(74)专利代理机构上海弼兴律师事务所31283专利代理师王卫彬黄益澍权利要求书2页说明书9页附图6页(54)发明名称一种通便灵胶囊指纹图谱及其构建方法和应用(57)摘要本发明公开了一种通便灵胶囊指纹图谱及其构建方法和应用。其包括以下步骤：利用高效液相色谱检测供试品溶液，将检测结果生成指纹图谱；所述供试品溶液的制备方法包括：将所述通便灵胶囊与60％的甲醇按照(0.4～0.6)g:50mL的质量体积比混匀；所述高效液相色谱的色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱；所述高效液相色谱的色谱条件为：流动相包括流动相A与流动相B，所述流动相A为乙腈，所述流动相B为0.1％磷酸水溶液；梯度洗脱程序如本发明中所述。本发明所提供的指纹图谱对通便灵胶囊药材和多个有效成分进行定性鉴别。CN115436490ACN115436490A权利要求书1/2页1.一种通便灵胶囊指纹图谱的构建方法，其特征在于，其包括以下步骤：利用高效液相色谱检测供试品溶液，将检测结果生成指纹图谱；所述供试品溶液的制备方法包括：将所述通便灵胶囊与60％的甲醇按照(0.4～0.6)g:50mL的质量体积比混匀；所述高效液相色谱的色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱；所述高效液相色谱的色谱条件为：流动相包括流动相A与流动相B，所述流动相A为乙腈，所述流动相B为0.1％磷酸水溶液；梯度洗脱程序：时间(min)0510163040606569乙腈(％)331518202590330.1％磷酸(％)979785828075109797其中，表格中的百分比为流动相A与流动相B分别占流动相总体积的体积百分比。2.如权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱的柱温为20～25℃；和/或，所述流动相的流速为1.0mL/min；和/或，所述高效液相色谱的检测波长为200～260nm；和/或，所述高效液相色谱的进样体积为5～20μL；和/或，所述十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱为YMC‑TriantC18色谱柱；和/或，所述通便灵胶囊与60％的甲醇按照0.5g:50mL的质量体积比混匀。3.如权利要求2所述的构建方法，其特征在于，所述高效液相色谱的检测波长为220nm；和/或，所述高效液相色谱的进样体积为10μL；和/或，所述YMC‑TriantC18色谱柱的规格为4.6mm×250mm，5μm，12nm。4.如权利要求1～3任一项所述的构建方法，其特征在于，所述构建方法中使用混合对照品；混合对照品溶液优选包括番泻苷A对照品、番泻苷B对照品、松果菊苷对照品、芦荟大黄素对照品和大黄素对照品。5.一种利用如权利要求1～4任一项所述的构建方法获得的通便灵胶囊的指纹图谱，其特征在于，所述指纹图谱包括16个峰，且：(1)以6号峰松果菊苷、15号峰芦荟大黄素、16号峰大黄酸为对照峰：1号峰的保留时间为12.363min、RSD为0.151％；2号峰的保留时间为13.969min、RSD为0.104％；3号峰的保留时间为15.870min、RSD为0.125％；4号峰的保留时间为16.890min、RSD为0.135％；5号峰的保留时间为18.427min、RSD为0.175％；6号峰的保留时间为19.868min、RSD为0.201％；7号峰的保留时间为20.797min、RSD为0.179％；8号峰的保留时间为23.175min、RSD为0.210％；9号峰的保留时间为26.738min、RSD为0.215％；10号峰的保留时间为28.241min、RSD为0.239％；2CN115436490A权利要求书2/2页11号峰的保留时间为29.489min、RSD为0.250％；12号峰的保留时间为31.190min、RSD为0.231％；13号峰的保留时间为43.030min、RSD为0.144％；14号峰的保留时间为48.695min、RSD为0.029％；15号峰的保留时间为53.920min、RSD为0.019％；16号峰的保留时间为5