厚朴麻黄汤指纹图谱的构建方法及其标准指纹图谱和应用.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN115901988A(43)申请公布日2023.04.04(21)申请号202211281827.5(51)Int.Cl.(22)申请日2022.10.19G01N30/02(2006.01)G01N30/04(2006.01)(71)申请人神威药业集团有限公司G01N30/06(2006.01)地址050000河北省石家庄市栾城区石栾G01N30/72(2006.01)大街168号申请人京津冀联创药物研究（北京）有限公司云南神威施普瑞药业有限公司(72)发明人罗建光孔令义郭晶晶郭勇侯金才邹妍李响何燕宁张岩岩(74)专利代理机构北京汇智英财专利代理有限公司11301专利代理师何佳权利要求书2页说明书10页附图4页(54)发明名称厚朴麻黄汤指纹图谱的构建方法及其标准指纹图谱和应用(57)摘要本发明提供一种厚朴麻黄汤指纹图谱的构建方法及其标准指纹图谱和应用，属于药物检测技术领域，所述构建方法是取厚朴麻黄汤制备供试品溶液，所得供试品溶液经HPLC‑Q‑TOF‑MS法检测，即得所述厚朴麻黄汤指纹图谱；所述HPLC‑Q‑TOF‑MS中高效液相色谱采用的流动相A为乙腈、流动相B为浓度为0.1～0.3wt％的甲酸水溶液；并获得厚朴麻黄汤的标准指纹图谱，用于厚朴麻黄汤的研究/开发/生产/临床应用全过程中质量评价或控制。本发明的构建方法能够将厚朴麻黄汤中主要化学成分在特征图谱中均有所体现，并指认18种化学成分，所建立的标准指纹图谱能够较为全面地反映厚朴麻黄汤的质量信息。CN115901988ACN115901988A权利要求书1/2页1.一种厚朴麻黄汤指纹图谱的构建方法，其特征在于，所述构建方法是取厚朴麻黄汤制备供试品溶液，所得供试品溶液经HPLC‑Q‑TOF‑MS法检测，即得所述厚朴麻黄汤指纹图谱；所述HPLC‑Q‑TOF‑MS中高效液相色谱采用的流动相A为乙腈、流动相B为浓度为0.1～0.3wt％的甲酸水溶液。2.根据权利要求1所述的厚朴麻黄汤指纹图谱的构建方法，其特征在于，所述高效液相色谱的洗脱方式为梯度洗脱；所述梯度洗脱的洗脱条件为：0～16min，5％流动相A，95％流动相B；16～18min，5％→9％流动相A，95％→91％流动相B；18～28min，9％→10％流动相A，91％→90％流动相B；28～32min，10％流动相A，90％流动相B；32～40min，10％→14％流动相A，90％→86％流动相B；40～52min，14％→16％流动相A，86％→84％流动相B；52～63min，16％→20％流动相A，84％→80％流动相B；63～73min，20％→33％流动相A，80％→67％流动相B；73～80min，33％→70％流动相A，67％→30％流动相B；80～90min，70％流动相A，30％流动相B。3.根据权利要求1或2所述的厚朴麻黄汤指纹图谱的构建方法，其特征在于，所述高效液相色谱的检测波长为280nm。4.根据权利要求1或2所述的厚朴麻黄汤指纹图谱的构建方法，其特征在于，所述高效液相色谱的柱温为34～36℃、流速为0.8～1.2mL/min。5.根据权利要求1或2所述的厚朴麻黄汤指纹图谱的构建方法，其特征在于，所述HPLC‑Q‑TOF‑MS的质谱条件为：干燥器(N2)流速为10.00L/min；温度为320℃；雾化器压力为45psig；毛细管电压为4000V；碎裂器为170V，skimmer65V，OCT1RFVpp,750V；采集频率皆为3spectra/s；离子模式为正离子模式。6.根据权利要求1或2所述的厚朴麻黄汤指纹图谱的构建方法，其特征在于，所述供试品溶液是取100重量份厚朴麻黄汤加水溶解，并定容至10体积份制得；所述重量份与体积份的比例关系为mg：mL。7.根据权利要求1或2所述的厚朴麻黄汤指纹图谱的构建方法，其特征在于，所述厚朴麻黄汤指纹图谱共获得并指认18个特征峰。8.根据权利要求7所述的厚朴麻黄汤指纹图谱的构建方法，其特征在于，18个所述特征峰的相对保留时间及对应的化学成分分别为：1号峰对应的化学成分为苯丙氨酸、保留时间为9.180；2号峰对应的化学成分为去甲基麻黄碱、保留时间为10.170；3号峰对应的化学成分为去甲基伪麻黄碱、保留时间为11.431；4号峰对应的化学成分为麻黄碱、保留时间为14.296；5号峰对应的化学成分为伪麻黄碱、保留时间为15.661；2CN115901988A权利要求书2/2页6号峰对应的化学成分为甲基麻黄碱、保留时间为17.093；7号峰对应的化学成分为甲基伪麻黄碱、保留时间为17.503；8号峰对应的化学成分为木兰箭毒碱、保留时间为27.598；9号峰对应的化学成分为苦杏仁苷、保留时间为33.0