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(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号(10)申请公布号CNCN103509068103509068A(43)申请公布日2014.01.15(21)申请号201210208658.2G01N33/08(2006.01)(22)申请日2012.06.19(83)生物保藏信息CGMCCNo.61412012.05.21(71)申请人北京勤邦生物技术有限公司地址102206北京市昌平区回龙观镇国际信息产业基地高新四街8号(72)发明人何方洋万宇平杨昌松孙震蒲小容刘琳靳开颜韩雪倩(51)Int.Cl.C07H15/23(2006.01)C07K14/765(2006.01)C07K14/77(2006.01)C07K14/795(2006.01)C07K14/75(2006.01)C07K14/47(2006.01)C07K1/113(2006.01)C07K16/44(2006.01)G01N33/577(2006.01)权权利要求书2页利要求书2页说明书5页说明书5页附图2页附图2页(54)发明名称丁胺卡那霉素半抗原及其制备方法和应用(57)摘要本发明公开了一种半抗原及其制备方法和应用,具体涉及一种丁胺卡那霉素半抗原。本发明还公开了所述半抗原的制备方法及其应用。基于丁胺卡那霉素半抗原建立的快速检测试剂盒产品,使用方便、检测成本低、检测方法高效、准确、快速、可同时进行丁胺卡那霉素残留的现场监控和大量样本的筛查。CN103509068ACN1035968ACN103509068A权利要求书1/2页1.一种丁胺卡那霉素半抗原,其特征在于分子结构式为:。2.一种制备权利要求1所述丁胺卡那霉素半抗原的方法,其特征在于包括如下步骤:0.59g丁胺卡那霉素、0.18g对羧基苯甲醛和1ml吡啶在20mlDMSO中的混合液,在60℃搅拌反应20小时,蒸除溶剂,柱层析纯化后在乙醇-水体系中重结晶得到丁胺卡那霉素与对羧基苯甲醛的缩合产物,得率70%。3.一种丁胺卡那霉素抗原,其特征在于由权利要求1所述的丁胺卡那霉素半抗原与载体蛋白偶联得到,分子结构式为:。4.一种制备权利要求3所述的丁胺卡那霉素抗原的方法,其包括如下步骤:取丁胺卡那霉素半抗原15mg用1.5ml水溶解,得到溶液Ⅰ;取50%的GA10μl加入溶液Ⅰ中,室温下搅拌反应18h得到溶液Ⅱ;取载体蛋白60mg用4.5ml水稀释后加入溶液Ⅱ中;反应过夜后加入24mgNaBH4反应3h,用三蒸水透析48小时,即得免疫原。取EDC50mg用2ml水使之充分溶解,得到溶液Ⅲ;取丁胺卡那霉素半抗原18mg用2ml2CN103509068A权利要求书2/2页水溶解得到溶液Ⅳ;取载体蛋白30mg溶于1ml0.01mol/LPBS(pH=8.0)溶液中得到溶液Ⅴ;将溶液Ⅳ与溶液Ⅴ混合,在磁力搅拌下逐滴加入溶液Ⅲ,室温下搅拌反应24小时,用三蒸水透析48小时,得到包被原。5.一种丁胺卡那霉素抗体,其是由丁胺卡那霉素免疫原免疫动物制备得到。6.如权利要求5所述的抗体,其特征在于所述抗体为丁胺卡那霉素单克隆抗体。7.如权力要求6所述的抗体,其特征在于丁胺卡那霉素单克隆抗体是由丁胺卡那霉素单克隆抗体杂交瘤细胞株D-4-3CGMCCNo.6141分泌获得。8.由权利要求7所述的抗体制备的丁胺卡那霉素酶联免疫试剂盒。9.权利要求8所述的丁胺卡那霉素酶联免疫试剂盒检测鸡蛋中丁胺卡那霉素残留的应用。3CN103509068A说明书1/5页丁胺卡那霉素半抗原及其制备方法和应用技术领域[0001]本发明涉及一种半抗原及其制备方法和应用,具体涉及丁胺卡那霉素半抗原及其制备方法和应用。背景技术[0002]氨基糖苷类抗生素(AGs)是由氨基糖与氨基环醇形成的苷,AGs的结构和理化性质相似。由于结构中含有多个氨基和羟基,故呈碱性,极性和水溶性较高。AGs的抗菌作用强,属常用的抗生素。常用的氨基糖苷类药物含有1个l,3或1,4二氨基环多醇和l或2个氨基糖。根据氨基环多醇的结构,可将AGs划分为两大类:链霉胺类和2-脱氧链霉胺类。按其来源,AGs又可分为:由链霉菌产生的抗生素,包括链霉素族、卡那霉素族和新霉素族;有小单孢菌产生的抗生素,主要包括庆大霉素族。[0003]丁胺卡那霉素(Amikin)又名阿米卡星,是卡那青霉素a的半合成衍生物的硫酸盐。临床主要用于对庆大霉素、卡那霉素耐药的革兰阴性杆菌如大肠杆菌、变形杆菌和绿脓杆菌引起的各种感染。长期或反复大量摄入丁胺卡那霉素可导致前庭神经和听神经损害,肾脏出现轻度损害,严重者可出现肾功能衰竭。卡那霉素属于氨基糖苷类抗生素,被广泛用于治疗猪、牛、鸡等由金黄色葡萄球菌及结核杆菌所致的各种感染。为保证我国出口禽肉的卫生质量和食用安全,促进禽肉出口,国家质量监督检验检疫