氟啶虫胺腈半抗原及其制备方法、抗原、抗体及其应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN113480474A(43)申请公布日2021.10.08(21)申请号202110849495.5C07K14/77(2006.01)(22)申请日2021.07.27C07K14/795(2006.01)C07K16/44(2006.01)(71)申请人深圳市易瑞生物技术股份有限公司G01N33/52(2006.01)地址518101广东省深圳市宝安区新安街G01N33/53(2006.01)道兴东社区留仙一路易瑞生物大厦G01N33/558(2006.01)101（整栋）G01N33/58(2006.01)(72)发明人王炳志杨星星严义勇许稳健付辉曾楚怡黄永健刘运旺王水树(74)专利代理机构北京汇知杰知识产权代理有限公司11587代理人杨巍柴春玲(51)Int.Cl.C07D213/55(2006.01)C07K14/765(2006.01)权利要求书3页说明书17页附图3页(54)发明名称氟啶虫胺腈半抗原及其制备方法、抗原、抗体及其应用(57)摘要本发明提供了氟啶虫胺腈半抗原、制备该半抗原的方法，由该半抗原偶联载体蛋白得到的氟啶虫胺腈抗原、利用该氟啶虫胺腈抗原免疫动物得到的氟啶虫胺腈抗体、上述氟啶虫胺腈半抗原、抗原、抗体在免疫学检测中的应用，由此制备的氟啶虫胺腈胶体金层析检测装置，以及利用上述装置检测样品中氟啶虫胺腈的方法。本发明提供的制备方法，使用的化学试剂容易得到、操作过程简单、反应产率较高、并且检测成本较低。本发明提供的检测装置能够快速、准确地检测出蔬菜或水果中氟啶虫胺腈的残留含量，能满足监管部门、检测机构现场监督执法的需要。本发明的检测方法具有敏度高、特异性强、成本低、操作简单、检测时间短、保质期长的优点。CN113480474ACN113480474A权利要求书1/3页1.一种氟啶虫胺腈半抗原，其中，所述氟啶虫胺腈半抗原的结构如式(I)所示：其中，n为1、2、3、4或5。2.一种制备权利要求1所述的氟啶虫胺腈半抗原的方法，其中，所述方法包括以下步骤：1)使6‑三氟甲基烟酸发生羧基的还原反应，得到中间体1：优选地，所述还原反应在硼烷二甲硫醚络合物的作用下进行；优选地，将6‑三氟甲基烟酸与四氢呋喃(THF)混合，加入硼烷二甲硫醚络合物，反应后，得到中间体1；优选地，6‑三氟甲基烟酸、THF、硼烷二甲硫醚络合物的摩尔比为1:(15‑20):(1‑5)；2)使中间体1发生卤代反应，得到中间体2：其中，x为卤素原子诸如F、Cl、Br或I；优选地，使中间体1与甲磺酰氯发生卤代反应，得到中间体2；优选地，所述卤代反应的溶剂为三乙胺、4‑二甲氨基吡啶(DMAP)、二氯甲烷；优选地，中间体1与甲磺酰氯的摩尔比为1:(1‑5)；3)使中间体2与甲硫醇钠发生取代反应，得到中间体3：优选地，所述取代反应的溶剂为极性溶剂；优选地，所述取代反应的溶剂为DMSO、DMF、丙酮、乙腈中的一种或多种的组合；优选地，中间体2与甲硫醇钠的摩尔比为1:(1‑5)；4)使中间体3与单氰胺上的氨基发生加成反应，得到中间体4：2CN113480474A权利要求书2/3页优选地，将中间体3、单氰胺和二氯甲烷混合，再加入碘苯二乙酸，反应后，得到中间体4；优选地，中间体3与单氰胺的摩尔比为1:(1‑2)；5)在氧化剂的作用下，使中间体4发生氧化反应，得到中间体5：优选地，所述氧化剂为间氯过氧苯甲酸(mCPBA)、双氧水或过氧苯甲酸；优选地，将乙醇、间氯过氧苯甲酸(mCPBA)和碳酸钾水溶液在‑5℃～5℃混合，然后加入中间体4的乙醇溶液，后升温至室温，加入饱和亚硫酸氢钠溶液，反应后，得到中间体5；优选地，中间体4与所述氧化剂的摩尔比为1:(2‑5)；6)使中间体5与卤代酯发生反应，得到中间体6：其中，所述卤代酯为6‑卤代己酸甲酯、6‑卤代己酸乙酯、6‑卤代己酸丙酯、6‑卤代己酸叔丁酯、5‑卤代戊酸甲酯、5‑卤代戊酸乙酯、5‑卤代戊酸丙酯、5‑卤代戊酸叔丁酯、4‑卤代丁酸甲酯、4‑卤代丁酸乙酯、4‑卤代丁酸丙酯、4‑卤代丁酸叔丁酯、3‑卤代丙酸甲酯、3‑卤代丙酸乙酯、3‑卤代丙酸丙酯、3‑卤代丙酸叔丁酯、2‑卤代乙酸甲酯、2‑卤代乙酸乙酯、2‑卤代乙酸丙酯或2‑卤代乙酸叔丁酯，其中，n为1、2、3、4或5；优选地，将中间体5和THF混合，加入六甲基磷酰三胺(HMPA)，将反应温度降至‑80℃～‑75℃，然后加入双(三甲基硅烷基)氨基钾，搅拌后加入4‑卤代丁酸甲酯，反应后，得到中间体6；优选地，中间体5与所述卤代酯的摩尔比为1:(1‑2)；7)使中间体6发生碱性水解反应，得到式(I)所示的化合物；优选地，所述碱性水解反应在氢氧化锂的作用下进行；优选地，中间体6与氢氧化锂的摩尔比为1:(1‑