苯并咪唑类药物半抗原及其制备方法和应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号(10)申请公布号CNCN104140396104140396A(43)申请公布日2014.11.12(21)申请号201310162837.1C07K16/44(2006.01)(22)申请日2013.05.06G01N21/31(2006.01)G01N33/535(2006.01)(71)申请人北京勤邦生物技术有限公司地址102206北京市昌平区回龙观国际信息产业基地高新四街8号(72)发明人冯才伟罗晓琴常平平陶光灿刘春雪李海静马腊腊(51)Int.Cl.C07D235/32(2006.01)C07K14/765(2006.01)C07K14/77(2006.01)C07K14/795(2006.01)C07K14/75(2006.01)C07K14/47(2006.01)C07K1/107(2006.01)权权利要求书2页利要求书2页说明书6页说明书6页附图2页附图2页(54)发明名称苯并咪唑类药物半抗原及其制备方法和应用(57)摘要本发明公开了一种苯并咪唑类药物半抗原及其制备方法和应用。本发明提供的苯并咪唑类药物半抗原，结构式如式Ⅰ所示：（Ⅰ）。基于苯并咪唑类药物半抗原建立的快速检测试剂盒产品，使用方便、检测成本低、检测方法高效、准确、快速、可同时检测大批量的样本，适于进行动物源性食品中苯并咪唑类药物残留的现场监控和大量样本的快速筛查。CN104140396ACN104396ACN104140396A权利要求书1/2页1.一种苯并咪唑类药物半抗原，其特征在于分子结构式如式Ⅰ所示：式Ⅰ。2.一种如权利要求1所述的苯并咪唑类药物半抗原的制备方法，其特征在于包括如下步骤：取阿苯达唑0.5g，加甲醇100ml搅拌，加KOH0.2g搅拌，60℃加热反应3h。TLC检测，原料基本消失，反应完成。停止反应，冷却到室温，旋蒸除去甲醇，加水溶解，抽滤，除去浑浊，滤液加稀盐酸调节pH值到5，有大量白色沉淀析出，抽滤，加乙醇洗涤，抽滤，得到白色固体，真空干燥，得到半抗原产物。3.一种苯并咪唑类药物抗原，其特征在于由权利要求1所述的苯并咪唑类药物半抗原与载体蛋白偶联得到，分子结构式如式Ⅱ所示：式Ⅱ。4.一种如权利要求3所述的苯并咪唑类药物抗原的制备方法，其特征在于包括如下步骤：取12.3mg苯并咪唑类药物半抗原用1mlDMF溶解，取15mgEDC用0.2ml水充分溶解后加入上述溶液中，室温下搅拌24h，即可得到反应液A。称取BSA40mg，使之充分溶解在3ml水中，将反应液A逐滴缓慢滴加到蛋白溶液中，并于室温下搅拌24h。用0.01mol/L的PBS溶液在4℃透析3天，每天换3次透析液，以除去未反应的小分子物质得到免疫原。分装，于-20℃保存备用。取15.5mg苯并咪唑类药物半抗原用1.5mlDMF溶解冷却至10℃得到溶液B，取氯甲酸异丁酯10μl加入溶液B中，10℃搅拌反应30min得到溶液C；取25mgOVA用2.2ml50mmol/LNa2CO3溶解，和上述溶液C在10℃反应4h，然后4℃过夜；用0.01mol/L的PBS溶液在4℃透析3天，每天换3次透析液，以除去未反应的小分子物质得到包被原。分装，于-20℃保存备用。5.由权利要求1所述的苯并咪唑类半抗原或权利要求3-4任一所述的苯并咪唑类药物抗原制备的抗体。6.如权利要求5所述的抗体，其特征在于所述抗体为苯并咪唑类药物单克隆抗体。7.权利要求1所述的苯并咪唑类药物半抗原或权利要求3-4中任一所述的苯并咪唑类2CN104140396A权利要求书2/2页药物抗原在检测苯并咪唑类药物或制备检测苯并咪唑类药物的产品中的应用。8.如权利要求7所述的检测苯并咪唑类药物的产品，其特征在于：苯并咪唑类药物包括氟苯咪唑、丙氧咪唑、甲苯咪唑、阿苯达唑、奥芬达唑、丙硫咪唑亚砜。3CN104140396A说明书1/6页苯并咪唑类药物半抗原及其制备方法和应用技术领域[0001]本发明涉及一种苯并咪唑类药物半抗原及其制备方法和应用。背景技术[0002]苯并咪唑类药物（Benzimidazoles，BMZs）具有广泛的生物活性，对于动物体内各种寄生线虫、绦虫具有很强的驱杀作用，目前在兽医临床上应用广泛。常用的苯并咪唑类药物包括阿苯达唑、奥芬达唑、芬苯达唑、氟苯咪唑、甲苯咪唑、噻苯咪唑和丙氧苯咪唑。但由于苯并咪唑类药物在实验动物显示致畸和致突变作用，且在人体内转化的代谢产物亦有毒理作用，是食品残留中重要的监控对象。中国、美国、欧盟、日本等国家或地区将苯并咪唑类药物列入限制使用的药物和动物源性食品残留检测的监控对象，并制订了各种苯并咪唑类药物（包括其某些代谢物）在不同动物体内（包括肌肉、组织等）的最大残留限量（MRLs），在不同的动物和不同